【正文】 HC與上術(shù)疾病的混合發(fā)病。因此，流行病學(xué)、臨床和病理學(xué)診斷只能作為 HC初診的依據(jù)。因此，流行病學(xué)、臨床和病理學(xué)診斷只能作為HC初診的依據(jù)，不能作為確診的根據(jù)。 HC的確診必須經(jīng)過實(shí)驗(yàn)室診斷方能確認(rèn)。 08:10:01 豬瘟診斷 ?HC的實(shí)驗(yàn)室診斷方法轉(zhuǎn)交有許多種，但總的說來，可分為兩類，一類是鑒定 HC病原，主要是針對 HC病毒和病毒抗原的檢測，兔體交叉免疫試驗(yàn)、免疫酶染色試驗(yàn)。新城疫病毒強(qiáng)化法，病毒分離與鑒定試驗(yàn)，免疫熒光抗體試驗(yàn)等方法主要屬于這一類；另一類是血清學(xué)診斷，主要是針對特異性抗感的檢測，單抗酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、間接血凝試驗(yàn)、斑點(diǎn)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)。瓊擴(kuò)試驗(yàn)、血清中和試驗(yàn)等均屬于這一類。下面簡要介紹一下主要的 HC病原和抗體診斷方法。 08:10:01 豬瘟診斷 ?1．病原診斷： ?（ 1）兔體交叉免疫試驗(yàn)： HC強(qiáng)毒不引起家兔體溫反應(yīng)，但能使其產(chǎn)生免疫力，而 C兔化弱毒能使家兔產(chǎn)生定熱反應(yīng)，但對已產(chǎn)生免疫力的家兔則不產(chǎn)生體溫反應(yīng)。利用這一原理，將病豬的病料用抗菌素處理后，接種家兔并每 6小時(shí)測遇一次連續(xù)測 5天，同時(shí)設(shè)注射生理鹽水的對照兔， 5天后對所有家兔靜脈注射 HC兔化弱毒，同樣每 6小時(shí)測溫一次，連續(xù)測溫 96小時(shí)，如試驗(yàn)對照免發(fā)生定型熱反應(yīng)，說明試驗(yàn)成立，可以分析判定結(jié)果，試驗(yàn)組兔出現(xiàn)定型熱反應(yīng)，則說明病料中所含的病毒不是HCV，反之試驗(yàn)組兔不發(fā)生定型熱反應(yīng)，說明病料中所含的病毒是 HCV。 08:10:01 豬瘟診斷 ?（ 2）免疫酶染色試驗(yàn)：取病豬扁挑體、腺、腎、淋巴結(jié)作壓組織壓片或凍凍切片，在 2%戊醛和甲醛等量組合液中固定后作 HC酶標(biāo)記抗體和底物染色鏡檢，如細(xì)胞漿染成深褐色為陽性；黃色或無色為陰性，正常對照應(yīng)為陰性， HC兔化弱毒接種的豬組織細(xì)胞凍呈微褐色，與強(qiáng)毒株感染有明顯示區(qū)別。 ?（ 3）免疫熒光抗體試驗(yàn)：采取 HC早期病豬的扁桃體和淋巴結(jié)及晚期病豬的脾和腎或肺組織，作凍凍切片或組織印片，丙酮固定后用 HC熒光抗體染色檢查，細(xì)胞漿內(nèi)呈現(xiàn)明亮的黃綠熒光，判為 HC感染陽性。正常對照豬組織細(xì)胞漿內(nèi)應(yīng)無黃綠色熒光。由于 HC兔化弱毒在豬體內(nèi)只存在 14天，因此，注射 HC兔化弱毒苗的豬僅在接種后 14天內(nèi)的扁桃體上皮細(xì)胞漿內(nèi)可見到微弱的黃綠色熒光，其染色的亮度和顏色與強(qiáng)毒有較明顯的區(qū)別。 08:10:01 豬瘟診斷 ?（ 4）病毒分離與鑒定：取病豬扁桃體、淋巴結(jié)、腺或腎組織，加雙抗后磨成乳劑，濾過、離心后取上法，接種對 HCV易感的豬腎傳代細(xì)胞系，如 PK15細(xì)胞等，接種 4872小時(shí)后，取出接毒種后的細(xì)胞片，用 HC免疫熒光抗體法或免疫酶染法檢查，結(jié)果判定同上。 08:10:01 豬瘟診斷 ?2．血清學(xué)診斷： ?（ 1） HC單抗酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)：本試驗(yàn)是利用豬 HC弱毒單抗純化的弱毒酶聯(lián)抗原和 HC強(qiáng)毒單抗純化的強(qiáng)毒酶聯(lián)抗原鑒別診斷豬瘟抗體疫苗免疫接種后產(chǎn)生的抗體和自然感染 HC強(qiáng)毒后產(chǎn)生的抗體，以此區(qū)別豬瘟免疫豬及自然感染豬。方法是：用弱毒單抗純化的弱毒抗原或強(qiáng)毒單抗純化的強(qiáng)毒抗原分別包被酶聯(lián)板，洗滌后加入稀釋的被檢血清置 37℃ 溫箱作用 1小時(shí)，再洗滌后加入已標(biāo)記的酶結(jié)合物，經(jīng)37℃ 溫箱作用 1小時(shí)后，洗滌加入底物顯色，終止反應(yīng)，置于酶聯(lián)讀數(shù)儀下，以 190nm波長讀取被檢血清孔的光吸收值（ OD）。 08:10:01 豬瘟診斷 ?結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)：在弱毒酶聯(lián)板上： OD≥，為 HC弱毒抗體陽性， OD HC弱毒抗體陰性。 ?在強(qiáng)毒酶聯(lián)板上， OD≥ HC強(qiáng)毒抗體陽性， OD，為強(qiáng)毒抗體陰性。 08:10:01 豬瘟診斷 ?（ 2）血清中和試驗(yàn)：用已知定量的HCV檢測被血清的滴度，即取不同稀釋度的被檢血清和等量病毒液混合，置37℃ 感作 1小時(shí)后，接種 PK15細(xì)胞片，同時(shí)設(shè)備各種對照組，繼續(xù)培養(yǎng) 4872小時(shí)后，取出細(xì)胞片用災(zāi)光抗體法檢查，計(jì)算各細(xì)胞片中熒光細(xì)胞的數(shù)目，與對照組比較，能 100%抑制熒光細(xì)胞的最大血清稀釋度即為該血清的抗體滴度。 08:10:01 豬瘟診斷 ?診斷時(shí)，除注意上述 HC容易相混淆的其他繁殖障礙型病毒病相區(qū)別外，還應(yīng)注意與敗血型沙門氏菌病、豬丹毒、豬巴氏桿菌病、敗血性鏈球菌病、弓形體病和黃曲霉毒素中毒癥鑒別。 08:10:01 豬瘟防制措施 ?現(xiàn)代 HC防制是一項(xiàng)系統(tǒng)工程，它必須從疾病的傳染源、傳播媒介、易感動(dòng)物、生態(tài)環(huán)境等多個(gè)環(huán)節(jié)著手，采取綜合性的防制措施，及時(shí)發(fā)現(xiàn)和淘汰無臨床癥狀的帶毒豬，建立健康無帶毒豬存在的繁殖母豬群，制定嚴(yán)格、科學(xué)和確實(shí)有效的免疫接種子計(jì)劃，認(rèn)真執(zhí)行免疫程序，定期檢測免疫效果，及時(shí)發(fā)現(xiàn)淘汰帶毒豬，培育健康不帶毒的后備豬群及新生仔豬群，實(shí)現(xiàn)科學(xué)的飼養(yǎng)管理，加強(qiáng)綜合防制技術(shù)措施，控制其他疾病的入侵，建立良好的生態(tài)環(huán)境，切斷疾病傳播途徑，增強(qiáng)豬群體質(zhì)，提高免疫效果，才能真正實(shí)現(xiàn)控制以致消滅 HC的目的。 08:10:01 豬瘟防制措施 ?及時(shí)發(fā)現(xiàn)和淘汰帶毒豬：目前全世界養(yǎng)豬國家防制 HC的辦法主要有兩種，一是以撲殺的方式，二是免疫的方式，前者主要是以切斷傳染源的原理來防制 HC，后者主要是通過免疫使易感豬變?yōu)橛械挚沽Φ姆且赘胸i的方式來防制HC，這兩種辦法對于防制 HC都起到了非常好的效果。 ?但這兩種辦法都存在一共同的問題，就是沒有及時(shí)發(fā)現(xiàn)和淘汰 HC持續(xù)感染帶毒豬，結(jié)果造成目前在世界許多國家 HC仍時(shí)有發(fā)生，即使已宣布消滅 HC十多年的國家也不例外。 08:10:01 豬瘟防制措施 ?究其原因，不管是撲殺還是免疫防制，人們常常只注意發(fā)現(xiàn)和淘汰有臨床癥狀的病豬，而對那些既無臨床癥狀，又無抗體的帶毒豬往往是忽視的，這就使得 HC能通過帶毒豬在豬群內(nèi)緩慢傳播，一旦條件具備，如母豬孕懷，引進(jìn)新的易感豬或病毒變異等就可造成豬群發(fā)病，呈現(xiàn)臨床可見的 HC癥狀。 ?因此，現(xiàn)代 HC防制的核心是定期診斷、及時(shí)發(fā)現(xiàn)和淘汰帶毒豬。其診斷方法可用上述 HC病毒和抗原的診斷方法中的任何一種，最常用的是 HCFA。 08:10:01 豬瘟防制措施 ?淘汰帶毒豬凈化 HC污染豬場的工作應(yīng)按以下順序進(jìn)行：種豬群 → 后備種豬群 →新生仔豬群 → 肥育豬群。對種豬群及后備種豬群必須逐頭檢測以確保種群中無一頭帶毒豬，其他豬群可按一定比例抽檢，發(fā)現(xiàn)帶毒豬堅(jiān)決淘汰并實(shí)行定期檢測制度。 08:10:01 豬瘟防制措施 ?免疫： HC的免疫接種是當(dāng)前我國及世界上發(fā)展中國家防制 HC的主要手段。 ?我國現(xiàn)用的 HCLV是世界上公認(rèn)的安全有效沒有殘余毒力的疫苗，經(jīng)中監(jiān)所幾代從事 HC研究人員的試驗(yàn)證明，我國現(xiàn)行的 HCLV有如下特點(diǎn)： ? 1．病毒感染家兔后只發(fā)生定型熱反應(yīng)，無其他臨床癥狀和病理損害。 ? 2．定型熱反應(yīng)兔的各臟器中均有病毒，其中以脾及腸淋巴結(jié)的滴度最高，為 104~105，用作種毒及制苗材料，其它組織中均有病毒，唯滴度稍低。 08:10:01 豬瘟防制措施 ?3．制苗種毒曾在兔體中連續(xù)傳代到 985代，經(jīng)鑒定遺傳性狀不變，說明種毒性能穩(wěn)定。 ?4．在兔體內(nèi) 3~6天毒價(jià)達(dá)到高鋒，第 7天開始下降，到 12天，已測不出病毒。 ?5．用兔毒免疫接種時(shí)，對各種品種和日齡的豬是極其安全的。接種不論年齡大小的各品種豬，均不產(chǎn)生 HC臨床癥狀，不造成持續(xù)性感染 HC，不影響仔豬發(fā)育。 ?6．兔毒接種不同妊娠期的懷孕母豬不造成流產(chǎn)、產(chǎn)胎、木乃伊及發(fā)育不良的仔豬，不能過胎盤垂直感染仔豬。 08:10:01 豬瘟防制措施 ?7兔毒在免疫豬體內(nèi)僅能保毒 14天，免疫豬不從尿、糞中排毒，也不引起非免疫豬同居感染。 ?8．豬免疫接種兔毒 48小時(shí)后即可抵抗自然感染， 72小時(shí)后可產(chǎn)生堅(jiān)強(qiáng)的免疫力，接種 35天后用 HC弱毒單抗可測出有效免疫抗體，對斷奶豬的免疫期可達(dá)一年半，免疫力為 100%。 ? 9．對 985代兔毒，用豬測定結(jié)果表明：兔毒免疫原性并不改變，將 346代兔連續(xù)通過易感斷奶仔豬 7代，毒力不返強(qiáng)，說明兔毒遺傳性穩(wěn)定。為了避免長期傳代發(fā)生變異，現(xiàn)中監(jiān)所控制發(fā)放 480代左右的兔毒作用為生產(chǎn)用種毒，并要求制苗單位定期更換。 08:10:01 豬瘟防制措施 ?10．現(xiàn)行的豬瘟 HC兔化弱毒細(xì)胞完全能抵抗目前國內(nèi)流行的不同毒力的單個(gè)或多個(gè) HC野毒株的一次、二次和交叉攻擊，對免疫豬的保護(hù)率為 100%。 ?綜上所述，我國現(xiàn)用的 HCLV疫苗是最安全有效的疫苗。要想使好的疫苗充分發(fā)揮其免疫效果，就必須有科學(xué)合理的使用方法，只有根據(jù)檢測結(jié)果，結(jié)合各地實(shí)際情況，才能制定出切實(shí)可行，確有實(shí)效的免疫程序。才能真正選擇HCLV疫苗在防制 HC中的最佳效果和重要作用。 08:10:01 豬瘟防制措施 ?治療：目前， HC尚未無有效治療法。對于價(jià)值較高的種豬，在發(fā)病初期可用抗HC血清治療，同群豬也可用抗血清作緊急被動(dòng)免疫預(yù)防。若伴有其他細(xì)菌性疾病發(fā)生時(shí)，可用抗菌素及有特異性藥物進(jìn)行輔助治療，以提高機(jī)體的抵抗力。 08:10:01 豬瘟防制措施 ?防制辦法：預(yù)防控制和消滅 HC，主要依靠綜合防制技術(shù)措施。 “ 九五 ” 期間中監(jiān)所丘惠琛、王在時(shí)等人承擔(dān)了國家 “ 九五 ” 攻關(guān)課題 “ 豬瘟綜合防治技術(shù)研究 ” 。經(jīng)過研究人員 5年的努力，豬瘟綜合防治技術(shù)取得了可喜的成績。 ?研究結(jié)果表明：由于 HC的垂直傳播是引起 HC持續(xù)感染的主要原因。因此，以種公、母豬及后備種豬的凈化為主是豬瘟綜合防治技術(shù)的關(guān)鍵。 08:10:01 豬瘟防制措施 ?而定期施實(shí)以 HCFA方法檢查種豬群，對陽性豬實(shí)行淘汰撲殺，以建立新的健康種豬群，繁衍健康后代。經(jīng)過多次反復(fù)凈化后，即會(huì)大幅度低豬群的陽性率，同時(shí)結(jié)合其他防制措施，即可使豬瘟得到有效控制。 5年來，以我國 5個(gè)省市受 HC污染的 7個(gè)不同規(guī)模的集約化豬場為重點(diǎn)，實(shí)施凈化，均取得較好的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。 ?實(shí)驗(yàn)證明，不管一個(gè)豬場的 HC情況多么復(fù)雜，只要耐心細(xì)致地好綜合防治，嚴(yán)格執(zhí)行 《 豬瘟綜合防制技術(shù)措施 》 （見以下附件），需花~2年左右的時(shí)間， HC例會(huì)得到凈化，并受到有效的控制。這套綜合防治措施不受地理?xiàng)l件和氣候的影響，適用全國各種規(guī)模的豬場。 08:10:01 豬瘟防制措施 ?通過對 HC綜合防治技術(shù)方方面面的研究及實(shí)踐，我們認(rèn)為在兩年內(nèi)有效控制一個(gè)豬場的 HC是安全可能的， 35年有效控制一個(gè)縣的 HC也是可能的。要控制一個(gè)市、一個(gè)省的 HC可能需要長一點(diǎn)時(shí)間，要消滅 HC，特別是要消滅全國的 HC則需要更長的時(shí)間，但決不是不可能，也不是遙遙無期。目前是應(yīng)該而且是可以提出具體的日程表的時(shí)候了。 08:10:01 豬瘟防制措施 ?附：豬瘟綜合防治技術(shù)措施（參考稿） ?1．未發(fā)生豬瘟豬場的預(yù)防措施： ?1． 1 嚴(yán)格把住引進(jìn)種豬關(guān) ?1． 1． 1 引進(jìn)種豬時(shí)，均需進(jìn)行種豬來源豬場的疫病史調(diào)查，種豬來源豬場必須符合中華人民共和國國務(wù)院 《 種畜禽管理?xiàng)l例 》 和農(nóng)業(yè)部 《 種畜禽管理?xiàng)l例實(shí)施細(xì)則 》 及農(nóng)業(yè)部 《 “種畜禽生產(chǎn)經(jīng)營許可證 ” 管理辦法 》 。 ?1． 1． 2 引進(jìn)種豬時(shí)，須對種豬進(jìn)行豬瘟及其它繁殖障礙疾病檢查，以確定是否為帶毒豬，待確定確實(shí)無帶毒時(shí)，方可引進(jìn)，引進(jìn)后仍需隔離觀察，經(jīng)證實(shí)完全健康時(shí)才可全群。 08:10:01 豬瘟防制措施 ?1． 2 培育健康、無豬瘟帶毒豬和其它繁殖障礙疾病的種豬群和后備種豬群。 ?1． 3 嚴(yán)格禁止從外單位購進(jìn)商品育肥豬。 ?1． 4 結(jié)合本地及本場的實(shí)際情況，制定確定、有效的豬瘟免疫程序，嚴(yán)格執(zhí)行免疫措施并做好免疫記錄和病史記錄。 ?1． 5 對本場制定的免疫程序進(jìn)行一次完整的抗體跟蹤監(jiān)測，以掌握該免疫程序的抗體消長規(guī)律，并制做標(biāo)準(zhǔn)的抗體消長規(guī)律曲線圖。 ? 1． 6 制定嚴(yán)格定期地檢疫制度和群體免疫效果監(jiān)制度，以隨時(shí)掌握本場的疫情和免疫抗體水平。 08:10:01 豬瘟防制措施 ?1． 7 及時(shí)淘汰帶毒豬和外觀不健康的豬，并按有關(guān)規(guī)定嚴(yán)格處理，禁止隨處亂扔。 ? 1． 8 加強(qiáng)豬場的科學(xué)化管理，實(shí)行定期消毒和全進(jìn)全出制度。 ?1． 9 加強(qiáng)其它疾病的綜合防治技術(shù)措施。 ?2 發(fā)生可疑豬瘟豬場的緊急防治措施： ? 2． 1 迅速隔離、封鎖、消毒發(fā)病豬及圈舍。 2． 2 用實(shí)驗(yàn)室方法快速確診是否為豬瘟感染，或是否還有其它病原的混合感染。 ? 08:10:01 豬瘟防制措施 ?2． 3 若確診為有豬瘟感染，即對全場豬進(jìn)行24頭份豬瘟疫苗緊急接種，對新生仔豬采用03570日齡免疫程序，同時(shí)注意觀察注射一的豬體反應(yīng)，一旦出現(xiàn)發(fā)病豬，迅速按豬瘟帶毒豬處理。 ?2． 4 死亡的豬應(yīng)在專門的解剖室解剖檢查，后經(jīng)高溫煮透、焚毀、深埋等嚴(yán)格措施銷毀，嚴(yán)禁隨處亂扔。 ? 2． 5 進(jìn)行全場緊急消毒處理，加強(qiáng)工作人員管理和消毒，禁止場內(nèi)