[工學(xué)]花藥和花粉培養(yǎng)-資料下載頁(yè)
2024-10-13 19:55本頁(yè)面
【正文】 B5 ? 水稻等禾谷類： N6 ? 蔗糖應(yīng)用最廣，既是最好的碳源，又起調(diào)節(jié)滲透壓的作用 ? 不同植物種類、不同誘導(dǎo)時(shí)期最適碳源濃度不同，通常以 25%為宜 ? 煙草： 2%誘導(dǎo)胚狀體 ? 小麥： 810%愈傷； 58%分化 ? 水稻： 46%愈傷； 23%分化 ? 玉米： 1215%愈傷 花粉 愈傷組織 植株 胚狀體 植株 脫分化 再分化 關(guān)鍵決定于激素種類、濃度、配比 實(shí)例 ? 小麥： 2mg/L 愈傷； 2mg/L 胚狀體 茄科 高生長(zhǎng)素 花粉胚 愈傷組織 愈傷組織 低生長(zhǎng)素 低生長(zhǎng)素 高生長(zhǎng)素 植 株 高細(xì)胞分裂素 ? 有機(jī)附加物 ? 水解乳蛋白 ? 水解酪蛋白 ? 酵母提取物 ? 肌醇 ? 谷氨酰胺等 ? 活性炭 （ %) ? 吸附了瓊脂中不利于細(xì)胞生長(zhǎng)的某些雜質(zhì) ? 吸附了培養(yǎng)基高壓滅菌蔗糖產(chǎn)生5羥甲基糠醛 ? 吸附了激素，降低了激素水平 （三）培養(yǎng)方法和培養(yǎng)條件 ? 保證完全無(wú)菌條件 ? 注意接種密度 ? 104105粒 /ml為好，花藥組織分泌的活性物質(zhì)相互作用有利于誘導(dǎo) ? 密度太高，養(yǎng)分消耗太快 ? 密度太低，誘導(dǎo)率下降 ? 液體培養(yǎng)基近年來(lái)較多采用 ? 優(yōu)點(diǎn) :誘導(dǎo)率顯著提高 ? 缺點(diǎn) :有些植物進(jìn)一步分化困難，白化苗率提高 ? 利用條件培養(yǎng)基也可大大提高培養(yǎng)效率 ? 溫度： 最重要，通常 2428℃ 最適 ? 光照： 影響分化途徑 花粉 愈傷組織 植株 胚狀體 暗 光 光 花粉胚 植株 ? 從花藥囊中長(zhǎng)出，莖葉細(xì)弱，根系不發(fā)達(dá)，很難直接移栽，需鍛煉壯苗 （四）植株的誘導(dǎo)和移栽 愈傷組織 植株 ? 愈傷組織的年齡顯著影響分化頻率 實(shí) 例 小麥水稻 愈傷組織23mm 分化率5080% 分化率810% 58天 20天 轉(zhuǎn)移 分化培養(yǎng)基 結(jié) 論 愈傷組織及時(shí)轉(zhuǎn)移是誘導(dǎo)分化的關(guān)鍵。太早不利于愈傷成活和生長(zhǎng)；太晚分化率下降 通常，愈傷 1mm 即可轉(zhuǎn)移 （五）花粉植株的倍性和加倍 ? 花粉植株中含有大量的非單倍體 單倍體 % 二倍體 % 多倍體 +非整倍體 % 混倍體 % 2496株水稻花粉植株 ? 非單倍體出現(xiàn)頻率與 植株種類 、 花粉發(fā)育時(shí)期 、激素種類和濃度 、 花粉植株的發(fā)生方式 、 繼代培養(yǎng)時(shí)間 等有關(guān) 倍 性 ? 大部分單倍體需經(jīng)人工加倍，通常秋水仙素， % 加 倍
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