mtt法測定細胞生長曲線-資料下載頁
2025-08-12 09:22本頁面
【導讀】取生長狀況良好的細胞，常規(guī)消化制成單細胞懸液，計數(shù)，調(diào)整細胞成六個濃度梯度，依次為：5×103，1. ×104，2×104，3×104，4×104，5×104/ml，均勻接種細胞于96孔細胞培養(yǎng)板，每孔加細胞懸液200μ。棄去上清液，每孔加入150μlDMSO，振蕩10min，使MTT藍紫色結晶完全溶解，用酶聯(lián)免疫檢測儀于。以培養(yǎng)時間為橫軸，吸光值為縱軸，繪制生長曲線。我做的時候因為沒有平板離心機，就用手甩板，力量要掌握好，不重不輕，雖然會損失一部分。細胞，但由于細胞本身的重力原因大多數(shù)都保存下來了。度的藥物，對照組加入等量培養(yǎng)基，每個濃度平行接種3孔,5d后離心，去上清，每孔加入5mg/mlMTT10µl. 及PBS100µl,37℃,5%CO2,飽和濕度培養(yǎng)4h后離心去除上清，加入200µlDMSO，充分振蕩溶解甲瓚顆粒。后用酶標儀測定各孔的OD值,實驗重復3次。
【正文】 同濃度的藥物，對照組加入等量培養(yǎng)基，每個濃度平行接種 3孔 , 5d后離心，去上清，每孔加入 5mg/ml MTT 10181。l及 PBS 100181。l,37℃ ,5%CO2,飽和濕度培養(yǎng) 4h后離心去除上清 ，加入 200181。l DMSO，充分振蕩溶解甲瓚顆粒后用酶標儀 (波長 570nm或 540nm)測定各孔的 OD 值 , 實驗重復 3次。
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