【文章內(nèi)容簡介】 在免疫反應中，樣品中的抗原濃度超過定量范圍（帶前域）達到異常高高值時。標準曲線反而會出現(xiàn)下降的傾向。稱這種現(xiàn)象為帶域現(xiàn)象，儀器可對測試的濃度是否在吸光度減少領域進行檢查，稱為前區(qū)檢查。前區(qū)檢查分為帶前區(qū)檢查一點法和帶前區(qū)檢查兩點法。 帶前區(qū)檢查一點法 終點分析法、并用添加抗原或抗體的方法檢查免疫反應后的前帶現(xiàn)象（ PROZONE CHECK）。分析時需要輸入前區(qū)檢查值的界限值。 三、速率法（動力學法） 上海醫(yī)療器械高等?？茖W校畢業(yè)論文 8 連續(xù)監(jiān)測反應過程，根據(jù)所測定的產(chǎn)物生成或底物消耗的速度進行定量分析的方法。在 反應時間進程曲線上為反應呈恒速區(qū)段（斜率保持不變）如圖 85。在整個反應過程中，反應物可以勻速地生成某個產(chǎn)物，導致被測定溶液在某一波長下吸光度均勻地減小或增加，減小或增加的速度 (△ A/min)與被測物的活性或濃度成正比。速率法也被稱為動力學法，主要用于酶活性的測定。根據(jù)指定測光點之間吸光度的變化可以得出濃度或活性值。 使用動力學法分析時，要設置底物耗盡限，一些高濃度（活性）樣品使底物耗盡，使反應不再為 0 級反應，為能正確反映測定結(jié)果，需設置底物耗盡限 (某一特定吸光度 )，該吸光度限應正好是反應曲線中 線性區(qū)與非線性區(qū)，是在反應時間內(nèi)反應沒有發(fā)生底物耗盡時所能達到的最小 (反應曲線向下 )或最大 (反應曲線向上 )的吸光度值。不輸入表示不進行底物耗盡檢查。 使用動力學法分析時要進行線性度分析，用于檢查動力學法設定的測光的范圍的吸光度變化的線性。檢查的方法根據(jù)測光點數(shù)（ N）分為兩種。 1) 測定點≥ 9 個線性度 =(前 6 個點吸光度的變化率－后 6 個點的吸光度變化率 )/所有點的吸光度變化率 2) 4≤測定點≤ 8線性度 =(前 3 個點吸光度的變化率－后 3 個點的吸光度變化率 )/所有點的吸光度變化率 固定時間法（又稱兩點速率法） 又稱一級動力學法，指在一定的反應時間內(nèi)，反應速度與底物濃度的一次方成正比，即 v=k[S]。由于底物在不斷的消耗，因此整個反應速度在不斷的減小，表現(xiàn)為吸光度的增加 (或降低 ) 速度越來越小。這類反應達到平衡的時間很長，理論上可以在任意時間段進行監(jiān)測，但由于血清成份復雜，反應剛啟動時反應較復雜，雜反應較多，必需經(jīng)過一段延遲時間才能進入穩(wěn)定反應期。對于任何一級反應，反應開始后在一給定時間 t 時底物濃度〔 S〕為： 〔 S〕 =〔 So〕 ekt 〔 So〕是最初的底物濃度 ， e 是自然對數(shù)的底， k 是速度常數(shù)。 即在一固定時間間隔中，底物濃度的變化量正比于底物的初濃度。這是一級反應的通性。該段時間內(nèi)吸光度的增加 (或 )降低與被測定物的濃度成正比，見下圖。固定時間法又被稱為初速率法、一級動力學法、二點動力學法等。 固定時間在方法學上比平衡法要求高，所有影響反應速率的因素如 pH、溫度酶量必須在兩點分析中保持恒定，并準確定時，必須同時用標準液校正。使用固定時間法分析時要設置底物耗盡限，一些高濃度（活性）樣品使底物耗盡，使反應不再為 1級反應，為能正確反映測定結(jié)果，需設置 底物耗盡限 圖 86 固定時間法 (某一特定吸光度 )，該吸光度限應正好是 1 級反應區(qū)與多級反應區(qū) (固定時間法 )的臨界點，是在反應時間內(nèi)反應沒有發(fā)生底物耗盡時所能達到的最小 (反應曲線向下 )或最大(反應曲線向上 )的吸光度值。不輸入表示不進行底物耗盡檢查。 定標方法 定標功能是為把測定的反應液的吸光度變化量，變?yōu)闈舛燃盎钚灾档脴藴是€的制作功能。 在儀器中，定標方法分為兩大類，即線性定標和非線性定標，其中線性定標又包括 K直線法 (又稱單點線性定標 )、兩點線性定標 (又稱線性法 )和多點 (大于 3 點 )線性定標 (又稱線性回歸法 )，主要適用于比色法測定的項目；非線性定標主要包括 3P 對數(shù)法、 4P 對數(shù)法、樣條法和折線法，主要適用于比濁法測定的項目。 一、校準點的種類 科華卓越 320 全自動生化儀結(jié)構(gòu)及維修保養(yǎng) 9 根據(jù)不同的校準需要，選取校準點作測定，常用于檢查校準曲線的穩(wěn)定性。包括空白校準：校準零濃度標準 1，對上次校準曲線，根據(jù)本次空白吸光度或吸光度變化量，對空白吸光度作部分補償。量程校準：對標準 1 校準點以外的另一校準點作校準，根據(jù)本次吸光度或吸光度變化量，對照上次校準曲線，對斜率作部分補償。全點校準：對所設定的各濃度標準液的校準點均 作校準，校準曲線的參數(shù)全部更新。 二、校準檢查 SD 檢查 在校準時，對每個標注液各測定 2 次，用其平均值。兩次測定的吸光度之差若比設定的離散性允許吸光度大，出現(xiàn)提示注意的報警。 （差限）檢查 在實行非線性校準曲線及線性（多點）的校準時，若由擬合式求得的各濃度的吸光度與測得的吸光度之差比漂移限允許吸光度值還要大時，出現(xiàn)提示注意的報警。 在校準時，其他標準液的吸光度（非線性及線性（多點）的濃度最高的標準液的吸光度）對標準液（ 1） 的吸光度之差比靈敏度允許吸光度還要小時，出現(xiàn)提示注意的報警。 質(zhì)控方法 一、實時質(zhì)控 本儀器用 Westgard 方法進行質(zhì)控。對兩種質(zhì)控物（ X 和 Y）進行雙份測定，并且已知這兩種質(zhì)控品中的每項實驗的平均值（ X ）和標準差（ SD），根據(jù)判斷推理（多規(guī)則）來處理測定的質(zhì)控結(jié)果，并且可判斷此時測定的質(zhì)控結(jié)果是否可以報告。如果判斷出有錯誤，則在屏幕上顯示出一個報警并說明是偶然誤差或是系統(tǒng)誤差。 進入質(zhì)控值設置屏幕在分析之前，對每項需做質(zhì)控的實驗進行下列輸入。首先輸入質(zhì)控樣品名稱，樣品類型 （血清，尿等）以及質(zhì)控樣品的編號。然后輸入每項實驗的日內(nèi)平均 QC 值和標準差。 在實時質(zhì)控屏幕的輸入對每項實驗輸入分析通道號。對質(zhì)控（ X） .輸入質(zhì)控樣品（ X）的號。對質(zhì)控（ Y） .輸入質(zhì)控樣品（ Y）的號。在質(zhì)控規(guī)則欄，可選擇所有規(guī)則或是選擇其中一部分。 實時質(zhì)控的取消若只有一個質(zhì)控品或不進行實時質(zhì)控，在實時質(zhì)控屏幕上將 X 和 Y 輸 入同一個質(zhì)控品號即可。 二、日內(nèi)質(zhì)控 每個測定數(shù)據(jù)可在質(zhì)控工作菜單的“日內(nèi)質(zhì)控”屏幕下進行檢查，質(zhì)控數(shù)據(jù)。經(jīng)過統(tǒng)計學計算之后在質(zhì)控工作菜單的“日內(nèi)質(zhì)控”中的“質(zhì)控數(shù) 據(jù)”屏幕上得到確認。質(zhì)控可使用多個質(zhì)控樣品。此儀器對質(zhì)控品個數(shù)沒有嚴格限制，對每個質(zhì)控品最多測定項目數(shù)也不做限制。 三、日間質(zhì)控 可管理 31 天的日內(nèi)質(zhì)控數(shù)據(jù)。一日內(nèi)每一 QC 數(shù)據(jù)的均值自動累積。每個測定的數(shù)據(jù)可在“日間質(zhì)控”中的“質(zhì)控數(shù)據(jù)”屏幕上得到確認。將日內(nèi)數(shù)據(jù)的平均值或累積日內(nèi)數(shù)據(jù)的特定的測定值累積起來，可組成日間質(zhì)控值。將日間數(shù)據(jù)的平均值或累積日間數(shù)據(jù)的特定的測定值累積起來，可組成月間質(zhì)控值。 統(tǒng)計分析 精密度分析（重復性計算）用于檢驗實驗項目的批內(nèi)精密度。只用當儀器 處于待機狀態(tài)時才可進行此計算。相關性分析用于檢驗實驗項目的自身相關或兩個不同測試方法結(jié)果數(shù)據(jù)的相關性。只上海醫(yī)療器械高等?？茖W校畢業(yè)論文 10 有當儀器處于待機狀態(tài)時才可進行此計算。 儀器結(jié)構(gòu) 功能概述 本儀器可對血清和尿液進行成分測定，其主要過程完全是自動的，如：加樣本，加試劑，混合攪拌，比色以及數(shù)據(jù)的輸出打印，最后對儀器部件進行清洗和保養(yǎng)等。 儀器功能 儀器使用光學法測定樣本 (血清，尿液，其他 )的成分。首先將試劑 R1和樣本放入比色杯中，然后將試劑 R2（單試劑除外）放入比色杯中進行混合，經(jīng) 過一定溫度和一定時間的孵育，通過光學測定法，對其進行測定，測量所得的數(shù)據(jù)通過計算機對數(shù)據(jù)進行處理后進行打印輸出。分析方法包括終點法，速率法和固定時間法 (兩點速率法 )。 總體構(gòu)成 圖 31 濃廢液出口：反應液的輸出口，使用廠商提供出水管道連接到濃廢液桶中。 濃廢液傳感器接口：將廠商提供濃廢液桶的傳感器連接到此接口。 淡廢液出口：其他清洗液出口，可以使用廠商提供出水管道直接連接到排水管道中。 凈水入口：去離子水輸入口，使用廠商提供出水管道連接到去離子水供給系統(tǒng)中。 科華卓越 320 全自動生化儀結(jié)構(gòu)及維修保養(yǎng) 11 圖 32 串口：儀器數(shù)據(jù)通訊輸入輸出接口，采用科華公司提供 的專用通信線連接到儀器外部計算機的串行口上。 電源線入口：儀器供電線入口，電源線連接到用戶提供 的電源插座上。 電源插座輸出：提供儀器操作計算機電源，與打印機電 源。 開 /關 電源：儀器的總電源，總電源打開時，儀器的試 劑盤制冷打開。正常開機順序是，先打開此電源，然后在打 開儀器前面板右上方開按鈕。關機順序是，先關閉儀器前面 的關按鈕，然后再關閉此電源。 圖 33 主要功能單元 主要功能單元包括比色單元，試劑樣本單元， 2個加樣臂，清洗臂部件，攪拌臂，注射泵單元。 一、比色單元 比色單元如下圖所示包括 63個比色杯，加溫系統(tǒng)，傳動系統(tǒng)，光學測試系統(tǒng)。 比色單元的功能是將加入反應液的比色杯在 37゜ C的環(huán)境中，根據(jù)所需的時間進行孵育，同時通過光學測試系統(tǒng)測試其吸光度，將測試所得的數(shù)據(jù)通過計算機進行處理后在計算機的顯示屏上顯示，并使用打印機打印出來。 上海醫(yī)療器械高等?？茖W校畢業(yè)論文 12 圖 34 二、試劑樣本單元 試劑單元包括 72個試劑位、制冷系統(tǒng)和傳動系統(tǒng)，位于試劑樣品盤內(nèi)，試劑瓶分兩環(huán)排列，各為 36個，內(nèi)環(huán)容積為 35ml，中環(huán)容積為 20ml如 圖所示， 試劑單元的功能是將試劑送至指定位置，供試劑臂吸取試劑用，制冷系統(tǒng)的作用是使試劑在不工作時保持在 28゜ C的溫度范圍內(nèi)。本試劑單元可供單、雙試劑使用，并且試劑 1和試劑 2的位置可任意放置的。樣本單元由兩部分組成，在樣品試劑盤外圈有 54個樣本位，在比色盤前面有樣品條可放置 10個樣品位，共計 64個樣品位。 樣本單元的功能是放置不同規(guī)格的樣本試管，供加樣臂吸取樣本，同時也可放置樣品針清洗劑，供樣品針維護保養(yǎng)用。本單元可以使用 2ml的微量杯， 7ml試管和 5ml的試管。 圖 35 三、加樣臂 加樣臂是由一個樣本臂和一個試劑臂組成，每個臂都是有上下的直線運動和左右的旋轉(zhuǎn)運動兩科華卓越 320 全自動生化儀結(jié)構(gòu)及維修保養(yǎng) 13 套機構(gòu)組成。每套臂同時具有一套加樣針，該加樣針有液面探測功能和針的防撞功能。 樣本臂的功能是將一定量的樣本送至相應的比色杯中，供反應和測試用。 試劑臂的功能是將一定量的試劑送至相應的比色杯中，供反應和測試用。 圖 36 四、清洗臂 清洗臂是由清洗上臂和上下直線運動的機構(gòu)組成。清洗上臂共有 7個清洗針及管路組成，前 5個清洗針用于清洗比色杯，其中每個都由一根吸水針和一根吐水針組成，這 樣可以對比色杯進行 5次沖洗，后 2個清洗針用于吸空比色杯，其中每個都有一根吸氣針，第 7個清洗針端部安有水刷，這樣可對比色杯四壁進行吸干處理，確保比色杯清潔干爽。 清洗臂的功能是對比色盤中的比色杯進行清洗和保養(yǎng)，以確保測量數(shù)據(jù)的正確性，同時可對比色杯進行注水保養(yǎng)，以便下次使用。清洗臂所使用的去離子水是去離子水桶（凈水桶）供給的，而產(chǎn)生的廢水則傾入廢水桶。 圖 37 五、攪拌臂 攪拌臂是由攪拌上臂和上下直線運動和左右旋轉(zhuǎn)運動兩套機構(gòu)組成。 攪拌臂的功能是對加入的反應液進行充分的攪拌，使其能在孵育期間充 分反應，以便得出正確的結(jié)果。 上海醫(yī)療器械高等專科學校畢業(yè)論文 14 圖 38 六、注射泵單元 注射泵單元是由兩套注射泵部件構(gòu)成，它們分別是 100ml和 1000ml注射泵和兩套相同的驅(qū)動機構(gòu)構(gòu)成。 注射泵單元的功能是使加樣針從樣本位或試劑位中精確地抽取一定量的溶液，注入到比色杯中，使樣本與試劑進行反應。 圖 39 其他部分 一、上蓋、門與機架 儀器的支撐與防護部分，上蓋在儀器運行的過程中，應將上蓋蓋下，門只有在添加清洗液或凈水桶維修保養(yǎng)時打開。 二、撐腳與腳輪 在儀器安裝到位后，應將撐腳放下，并使儀器的臺面處于水平位置后 ，固定撐腳，腳輪是在近距離的搬運時，可將腳輪放下，以利推行。 三、開 關 儀器運行與停止的開關，當按下“開”按鈕時儀器開始運行，而當按下“關”按鈕時儀器運行停止，但儀器仍處于待機狀態(tài)，比色盤的保溫及試劑盤的制冷仍處于工作狀態(tài)。 四、凈水桶與清洗液桶 科華卓越 320 全自動生化儀結(jié)構(gòu)及維修保養(yǎng) 15 凈水桶是為儀器在運行的過程中對加樣針、攪拌棒和比色杯清洗提供純凈水，凈水桶內(nèi)安裝有液位傳感器，液位超過傳感器時儀器提供報警信息。凈水桶的入水口位于儀器后部，可以使用專用的軟管連接至儀器外面的凈水桶，也可以直接連到凈水設備的出口。 清洗液桶 位于儀器前面的左下方。清洗液是用于清洗儀器比色杯的清洗劑。 五、清洗池 清洗池共有三個，分別是樣本臂清洗池，試劑臂清洗池，攪拌臂清洗池，清洗用的凈水是由凈水桶供給，而清洗后產(chǎn)生的廢水進入廢水桶。 六、濃廢水桶 濃廢水桶是承接儀器在運行的過程中，由于清洗樣品針和比色杯產(chǎn)生的污水，濃廢液桶內(nèi)有液位傳感器，當廢液液位超過傳感器時，儀器產(chǎn)生報警提示。濃廢液桶的出口和液位傳感器位于儀器的后面，用戶可以根據(jù)實際情況將濃廢液引入自備的容量較大的容器或?qū)Ｓ孟滤乐?。攪拌臂是由攪拌上臂和上下直線運動和 左右旋轉(zhuǎn)運動兩套機構(gòu)組成。 攪拌臂的功能是對加入的反應液進行充分的攪拌，使其能在孵育期間充分反應，以便