【文章內(nèi)容簡介】 響取多菌靈原藥1 mL丙酮溶解，然后用蒸餾水稀釋成500倍、1000倍、2000倍、4000倍、8000倍、16000倍、32000倍 7個濃度梯度；取戊唑醇原藥1 mL異丙醇溶解，然后用蒸餾水稀釋成250倍、500倍、1000倍、2000倍、4000倍、8000倍、16000倍、7個濃度梯度。根據(jù)各菌種對化學(xué)藥劑敏感程度的不同分別用不同濃度梯度測試。將各濃度藥液分別取1 ml加入99 ml培養(yǎng)基中搖勻，則最終稀釋濃度為多菌靈：20, 10, 5, , , , mg/L； 戊唑醇：40, 20, 10, 5, , , mg/L。用多菌靈測試的赤霉菌株，敏感型：26號和42號，濃度梯度為：5, , , ， mg/L；中間型：34號和37號，濃度梯度為：10, 5, , , mg/L；不敏感型：11號和46號，濃度梯度為：20, 10, 5, , mg/L。用戊唑醇測試的赤霉菌株，敏感型：26號和42號，濃度梯度為：10， 5， ， mg/L；中間型：34號和37號，濃度梯度為：20，10，5， mg/L；不敏感型：11號和46號, 濃度梯度為：40，20，10，5， mg/L。 cm的打孔器制成菌盤，分別接入對應(yīng)的含藥培養(yǎng)基中，每處理4次重復(fù)，置于25 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72 h，觀察記錄菌落大小，用十字交叉法測量菌落直徑，計算不同藥劑對小麥赤霉菌的抑制率。然后將抑菌率換算成機(jī)率值，繪制LgC—機(jī)率值曲線，計算抑制中濃度EC50。 多菌靈、戊唑醇原藥對小麥赤霉病菌孢子萌發(fā)的影響 孢子萌發(fā)法：將在綠豆湯培養(yǎng)基中搖床培養(yǎng)（ 100 rpm, 28℃）7天的小麥赤霉菌經(jīng)兩層紗布過濾，用無菌水將12種供試小麥赤霉菌配制成在160倍顯微鏡下每視野50個分生孢子的孢子懸浮液。 mL丙酮溶解多菌靈并以無菌水配制成40, 20, 10, 5, , , mg/L等 7個濃度梯度； mL異丙醇溶解戊唑醇并以無菌水配制成80, 40， 20，10，5， , mg/L 等7個濃度梯度備用。將小麥赤霉病菌孢子懸浮液搖勻，分別用移液槍取20 181。L滴加在帶有凹陷的載玻片上，同時對應(yīng)加入配好的多菌靈、戊唑醇不同濃度的藥液20 181。L，每菌種孢子懸浮液最終所含藥液濃度為：A組（ 含多菌靈）： 11號和46號菌株( 不敏感型)為20, 10, 5, , mg/L； 34號和37號菌株（中間型）為10, 5, , , mg/L；26號和42號菌株(敏感型)為5, , , ， mg/L。B組（含戊唑醇）：11號和46號菌株(不敏感型)為40，20，10，5， mg/L；34號和37號菌株（中間型）為20，10，5， mg/L ；26號和42號菌株(敏感型)為10，5，， mg/L。 每處理4次重復(fù)，載玻片擺放在用滅菌濾紙保濕的潔凈保濕盒中，在25℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，12h后鏡檢各處理孢子萌發(fā)情況。每處理4個視野，計算孢子萌發(fā)率（%）和抑制率（%）。3 結(jié)果與分析由圖1可以看出，不同化學(xué)藥劑對小麥赤霉菌菌絲生長的抑制作用存在顯著差異。在六種藥劑中，50%%戊唑醇可濕性粉劑對小麥赤霉菌的抑制作用較大，明顯高于其他藥劑，抑制率分別達(dá)到了100%%，而70%%。因此，以下試驗選用95%多菌靈原藥和95%戊唑醇原藥作為以下進(jìn)一步實驗的測試藥劑。（EC50）的測定的結(jié)果根據(jù)圖圖3，95%多菌靈原藥和95%戊唑醇原藥的毒力曲線得到相關(guān)擬合方程，分別為y = + ( r = ) 和y = + ( r = ) ,根據(jù)方程計算95%多菌靈原藥和95% mg/ mg/L。對照此數(shù)據(jù)，確定下一步實驗所需藥劑的濃度。由圖圖圖6可以看出，第一，多數(shù)菌株對兩種藥劑的反應(yīng)一致，即對多菌靈敏感的菌株對戊唑醇也表現(xiàn)為敏感型，對多菌靈不敏感的菌株對戊唑醇也表現(xiàn)為不敏感型。第二，小麥赤霉病菌不同菌株對95%多菌靈原藥和95%戊唑醇原藥的敏感性有顯著差異。多菌靈測試菌株， cm ( 3號菌株 HWH 39) , cm ( 24號菌株 XLN116) , 。戊唑醇測試菌株， cm ( 42號菌株BNS13) ， cm ( 8號菌株BDX312) , 。 第三，95%多菌靈原藥對小麥赤霉病的抑制作用要大于95%戊唑醇原藥， cm, cm。根據(jù)不同菌株對兩種藥劑的敏感性將多菌靈測試的48個菌株分為三組，即敏感型：HWH39, XPH32, XPH34, HWH31, HWZ12, HWZ18, BNS13, HWZ13, HWH32, SLC12, HQN14, BNS15, XRT18, XRT13, BNS112, SLC18共16個菌株。 中間型: BDX323, HWZ17, BDX312, HWZ11, HWZ16, XLN113, HQN12, HWH414, BNS18, HWH45, SLC15, HWZ14, HWH413, BNS17, SLC13, BDX313共16個菌株。 不敏感型: HQN13, XPH37, BDX36, XRT111, XRH35, HQN18, XLN115, HQN15, XRT12, BNS19, XLN114, BNS12, BNS110, XLN19, XRT14, XLN116共16個菌株。 用同樣的方法將戊唑醇測試的48個菌株也分為三組，即敏感型： BNS13, HWH32, HWH39, XPH32, XPH34, HWZ12, HQN18, XRT14, HWZ16, HQN12, XLN116, XLN114, SLC18, HWH45, HWH31, XRT18共16個菌株。 中間型： HWZ18, HWH413, XLN19, HWZ14, XRT13, HQN13, BNS112, BDX323, HWZ17, XLN113, HWZ11, XLN115, HQN14, HWH414, SLC13, SLC12共16個菌株。 不敏感型： BNS17, BNS12, HWZ13, XRT111, BDX36, HQN15, BDX313, BNS19, BNS15, SLC16, BNS110, XPH37, XPH35, BNS18, XRT12, BDX312共16個菌株。根據(jù)測試結(jié)果，從48個菌株中選出對多菌靈和戊唑醇反應(yīng)一致的3組共6個菌株，即敏感型：26號XPH34和42號BNS13；中間型：34號HWZ11和37號HWZ14；不敏感型：11號XRT12和46號BNS19，這6個菌株被作為以下實驗的測試菌株。 、戊唑醇對小麥赤霉病菌菌絲生長的測定結(jié)果根據(jù)表表表5，小麥赤霉病不同菌株菌絲生長對不同藥劑的反應(yīng)趨勢大致相同，即無論是多菌靈還是戊唑醇，隨著藥劑濃度的增大，抑制率隨之提高。從不同的赤霉病菌種對藥劑濃度變化的敏感程度看，第一組11號XRT12和46號BNS19對藥劑濃度變化的敏感程度較小，表現(xiàn)為不敏感型；第三組26號XPH34和42號BNS13對藥劑濃度變化的敏感程度較強(qiáng)，表現(xiàn)為敏感型；第二組34號HWZ11和37號HWZ14對藥劑濃度變化的敏感程度適中，為中間型。EC50是反映藥劑對菌絲生長抑制能力的一個重要指標(biāo)，它指的是抑制50%個體所需藥劑的濃度。EC50越大，表明達(dá)到一定的抑制效果所需的藥劑濃度越大，意味著菌絲對藥劑的反應(yīng)不敏感。在本試驗中，不論是用多菌靈處理還是用戊唑醇處理的6個赤霉病菌株，都是相對敏感的第三組抑制中濃度最小，相對不敏感的第一組抑制中濃度最大，第二組介于兩者之間。小麥赤霉病菌的不同菌株對藥劑的敏感程度存在差異，并且對多菌靈表現(xiàn)地變化較大。不敏感型菌株的EC50( mg/L)比敏感型菌株的EC50（ mg/L），而對于戊唑醇來說則較為緩和，不敏感型菌株的EC50( mg/L ) 比敏感型菌株的EC50 ( mg/L) 。不同藥劑對小麥赤霉菌菌絲生長的影響不同，用多菌靈處理的6個菌株， mg/L, 用戊唑醇處理的6個赤霉病菌株， mg/L, 顯著高于多菌靈。表3 多菌靈對不同敏感程度小麥赤霉病菌絲生長的影響Table 3 Effect of Carbendazim to the mycelial growth of different Fusarium graminearum strains菌株 Isolate濃度Concentration(mg\L)濃度對數(shù) oncentrationlogarithm菌落直徑(cm) Diameter ofcolony抑制百分率(%)Inhibition percentage機(jī)率值(y) Value of Probability11號2010546號2010534號10537號10526號542號對照 ck5表4 戊唑醇對不同敏感程度小麥赤霉病菌絲生長的影響Table 4 Effect of Tebuconazole to the mycelial growth of different Fusarium graminearum strains菌株濃度Concentration(mg\L)濃度對數(shù)oncentrationlogarithm菌落直徑(cm) Diameter ofcolony抑制百分率(%)Inhibition percentage機(jī)率值(y) Value of Probability11號402010546號4020105034號2010537號2010526號10542號對照 ck105表5 多菌靈、戊唑醇對不同敏感程度小麥赤霉病菌株菌絲生長抑制作用的毒力曲線方程Table 5 Virulence curve of Carbendazim and Tebuconazole to the mycelial growth of different Fusarium graminearum strains 多菌靈處理Treatment by Carbendazim戊唑醇處理Treatment by Tebuconazole菌株Isolate毒力方程Virulence equationEC50毒力方程Virulence equationEC5011號46號34號37號26號42號EC50均值Y=+Y=+Y=+Y=+Y=+Y=+ mg/L mg/L mg/L mg/L mg/L mg/L mg/LY=+Y=+Y=+Y=+Y=+Y=+ mg/L mg/L mg/L mg/L mg/L mg/L mg/L 多菌靈、戊唑醇對小麥赤霉病菌孢子萌發(fā)的測定結(jié)果根據(jù)表表表8，不同藥劑對小麥赤霉病菌孢子萌發(fā)的反應(yīng)趨勢與對菌絲生長的反應(yīng)大致相同，即隨著藥劑濃度的增大，抑制率隨之提高。從不同的赤霉病菌種對藥劑濃度變化的敏感性不同，第一組（11號、46號）的回歸系數(shù)最小，對藥劑濃度變化的敏感程度較??；第三組（26號、42號）回歸系數(shù)最大，對藥劑濃度變化的敏感程度較強(qiáng)；第二組（34號、37號）介于兩者之間，對藥劑濃度變化的敏感程度適中。從抑制中濃度來看，抑制中濃度越大，分生孢子對藥劑的反應(yīng)就越不敏感。在本實