【文章內(nèi)容簡介】 內(nèi)質(zhì)量控制內(nèi)部質(zhì)量控制是在良好實驗室整體環(huán)境支持下，從樣品接收到發(fā)出報告整個過程每個環(huán)節(jié)的管理過程，包括：（1）人員；（2）實驗室分區(qū)和環(huán)境；（3）儀器；（4）檢測過程（試劑、操作過程，質(zhì)控品使用）；（5）數(shù)據(jù)。HIV1病毒載量檢測人員分為檢驗人、復(fù)核人、簽發(fā)人。 所有相關(guān)檢驗人員需經(jīng)操作培訓(xùn)，能獨立熟練地操作，并經(jīng)考核合格，持證上崗。、簽發(fā)人應(yīng)具備對檢測過程進(jìn)行分析、解決問題的能力。HIV1病毒載量檢測實驗室原則上應(yīng)分為三個獨立工作區(qū)：試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣品處理區(qū)、擴增產(chǎn)物分析區(qū)，并設(shè)在不同房間。不同檢測方法的分區(qū)功能和要求可有所不同。 試劑準(zhǔn)備區(qū)：擴增試劑的配制、分裝和保存； 樣品處理區(qū)：樣品登記、分裝，核酸提取、保存和加樣； 擴增產(chǎn)物分析區(qū)：產(chǎn)物擴增的測定、結(jié)果分析、登記及報告。嚴(yán)格要求三區(qū)的空氣流向：從試劑準(zhǔn)備區(qū)到樣品處理區(qū)，然后到擴增產(chǎn)物分析區(qū)，不能逆向流動。實驗室的設(shè)置及輔助設(shè)備的具體要求參見第二章。 實驗室環(huán)境的要求；，應(yīng)避免陽光直射設(shè)備；~25℃；~70%；，HIV1病毒載量檢測儀應(yīng)配備穩(wěn)壓電源；，無灰塵。，用75%%次氯酸鈉及時處理操作臺面。 儀器設(shè)備質(zhì)控、溫濕度計須經(jīng)計量部門校準(zhǔn)，每年一次。每季度期間核查一次。 HIV1病毒載量檢測儀、離心機可以委托公司校準(zhǔn)，每年一次。、水浴箱用校準(zhǔn)合格的溫度計測量溫度，并做好記錄。 所有試劑盒須嚴(yán)格按要求條件保存。，要記錄拆封時間，所有試劑嚴(yán)格控制在有效期內(nèi)使用。 實驗用水：要求使用無DNA和RNA酶的水。 操作過程質(zhì)控嚴(yán)格執(zhí)行儀器和試劑的標(biāo)準(zhǔn)操作程序（SOP），不得擅自修改。每次實驗需同時使用試劑盒內(nèi)的質(zhì)控品以及一個HIV1 RNA為500015000拷貝/毫升的外部質(zhì)控品。按實際使用量的要求配制大樣品量的血漿（推薦每次配置量可使用兩年），充分混勻。用無菌凍存管定量分裝，標(biāo)記，封口，凍存于80℃以下非自動除霜冰箱內(nèi)。隨機選出10管外部質(zhì)控品，按照實驗室的檢測條件進(jìn)行HIV1病毒載量檢測，將拷貝值換算成Log10值，計算算術(shù)平均值（m）和標(biāo)準(zhǔn)偏差（s）。根據(jù)外部質(zhì)控品的定值，繪制質(zhì)控圖。在質(zhì)控圖上顯示所有10次質(zhì)控品檢測值的Log10值、 值范圍。每次檢測都應(yīng)帶1個外部對照，將得到的外部對照Log10值標(biāo)在質(zhì)控圖上， 值范圍判斷實驗結(jié)果是否有效，每次測得值在平均值177。使用新批次的外部對照質(zhì)控品時，必須重新繪制質(zhì)控圖。 試劑盒質(zhì)控品的使用每次實驗按照試劑盒說明書的要求使用試劑盒提供的質(zhì)控品，并滿足質(zhì)控品的要求。 數(shù)據(jù)分析、結(jié)果報告 在試劑盒及外部質(zhì)控品結(jié)果滿足要求的前提下，對樣品進(jìn)行分析。 外部質(zhì)控品不合格，樣品需要重新檢測。 結(jié)果超過檢測上限的樣品應(yīng)稀釋以后重新檢測。 復(fù)核人對檢測結(jié)果進(jìn)行仔細(xì)復(fù)核并對結(jié)果提出結(jié)論、簽字。 簽發(fā)人對結(jié)果的結(jié)論進(jìn)行審核、分析、總結(jié)、簽字。 按不同方法的要求，以拷貝/毫升或國際單位/毫升為單位報告樣品的HIV1病毒載量值。第六章 外部質(zhì)量控制HIV1病毒載量檢測的外部質(zhì)量控制可以通過參加外部質(zhì)量評價，提高實驗結(jié)果的可比性，發(fā)現(xiàn)系統(tǒng)誤差，改進(jìn)實驗室工作，提高檢測質(zhì)量。艾滋病參比實驗室自2004年開始參加由美國國立衛(wèi)生研究院（NIH）組織的HIV1病毒載量檢測考核工作，考核盤有5個樣品組成，分別考核實驗室檢測的靈敏度、特異性、穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性，通過將結(jié)果與國際上參與考核的所有實驗室結(jié)果進(jìn)行比對評估，給出綜合評估結(jié)果。通過參加考核，保證艾滋病參比實驗室的不同HIV1病毒載量檢測系統(tǒng)的有效性。目前，艾滋病檢測實驗室通過參加艾滋病參比實驗室組織的HIV1病毒載量檢測能力驗證來實施外部質(zhì)量控制。 HIV1病毒載量檢測能力驗證（PT）的組織艾滋病參比實驗室為HIV1病毒載量檢測能力驗證（PT）的組織者，負(fù)責(zé)制定國內(nèi)HIV1病毒載量檢測能力驗證的計劃并組織實施。建議國內(nèi)所有從事HIV1病毒載量檢測的實驗室參加該PT項目，在規(guī)定時間內(nèi)使用有效試劑與實驗樣品一起檢測，填寫HIV1病毒載量實驗結(jié)果報告單（附表46），上報艾滋病參比實驗室。鼓勵有條件的實驗室參加國際組織的PT活動。 HIV1病毒載量檢測能力驗證（PT）的實施 PT樣品組成：每次5份。包括陰性、不同拷貝數(shù)的陽性樣品。 PT頻率：一年2次，分別為3月和9月。 PT樣品的接收與保存：要求參加PT的實驗室收到考核樣品后，立即進(jìn)行核對、檢查，填寫HIV1病毒載量檢測能力驗證樣品接收專用單（附表3），3天內(nèi)將接收專用單傳回艾滋病參比實驗室。如發(fā)現(xiàn)考核樣品缺失、量不足、空管等情況，及時書面回報，艾滋病參比實驗室負(fù)責(zé)補寄或更換。收到樣品后應(yīng)及時檢測或在70度以下保存。 PT樣品的檢測：要求將考核樣品同實驗室常規(guī)樣品一起檢測，由常規(guī)檢測人員進(jìn)行，不應(yīng)作為特殊樣品處理。 PT結(jié)果的報告和處理：參加PT的實驗室必須在規(guī)定的時間內(nèi)（收到樣品3個月內(nèi)），用電子郵件報告實驗結(jié)果，并將HIV1病毒載量實驗結(jié)果報告單（附表46）和打印的儀器原始記錄一起上報給艾滋病參比實驗室，后者將負(fù)責(zé)結(jié)果錄入和處理。