【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 內(nèi)質(zhì)量控制內(nèi)部質(zhì)量控制是在良好實(shí)驗(yàn)室整體環(huán)境支持下，從樣品接收到發(fā)出報(bào)告整個(gè)過(guò)程每個(gè)環(huán)節(jié)的管理過(guò)程，包括：（1）人員；（2）實(shí)驗(yàn)室分區(qū)和環(huán)境；（3）儀器；（4）檢測(cè)過(guò)程（試劑、操作過(guò)程，質(zhì)控品使用）；（5）數(shù)據(jù)。HIV1病毒載量檢測(cè)人員分為檢驗(yàn)人、復(fù)核人、簽發(fā)人。 所有相關(guān)檢驗(yàn)人員需經(jīng)操作培訓(xùn)，能獨(dú)立熟練地操作，并經(jīng)考核合格，持證上崗。、簽發(fā)人應(yīng)具備對(duì)檢測(cè)過(guò)程進(jìn)行分析、解決問(wèn)題的能力。HIV1病毒載量檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室原則上應(yīng)分為三個(gè)獨(dú)立工作區(qū)：試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣品處理區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)，并設(shè)在不同房間。不同檢測(cè)方法的分區(qū)功能和要求可有所不同。 試劑準(zhǔn)備區(qū)：擴(kuò)增試劑的配制、分裝和保存； 樣品處理區(qū)：樣品登記、分裝，核酸提取、保存和加樣； 擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)：產(chǎn)物擴(kuò)增的測(cè)定、結(jié)果分析、登記及報(bào)告。嚴(yán)格要求三區(qū)的空氣流向：從試劑準(zhǔn)備區(qū)到樣品處理區(qū)，然后到擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)，不能逆向流動(dòng)。實(shí)驗(yàn)室的設(shè)置及輔助設(shè)備的具體要求參見(jiàn)第二章。 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境的要求；，應(yīng)避免陽(yáng)光直射設(shè)備；~25℃；~70%；，HIV1病毒載量檢測(cè)儀應(yīng)配備穩(wěn)壓電源；，無(wú)灰塵。，用75%%次氯酸鈉及時(shí)處理操作臺(tái)面。 儀器設(shè)備質(zhì)控、溫濕度計(jì)須經(jīng)計(jì)量部門(mén)校準(zhǔn)，每年一次。每季度期間核查一次。 HIV1病毒載量檢測(cè)儀、離心機(jī)可以委托公司校準(zhǔn)，每年一次。、水浴箱用校準(zhǔn)合格的溫度計(jì)測(cè)量溫度，并做好記錄。 所有試劑盒須嚴(yán)格按要求條件保存。，要記錄拆封時(shí)間，所有試劑嚴(yán)格控制在有效期內(nèi)使用。 實(shí)驗(yàn)用水：要求使用無(wú)DNA和RNA酶的水。 操作過(guò)程質(zhì)控嚴(yán)格執(zhí)行儀器和試劑的標(biāo)準(zhǔn)操作程序（SOP），不得擅自修改。每次實(shí)驗(yàn)需同時(shí)使用試劑盒內(nèi)的質(zhì)控品以及一個(gè)HIV1 RNA為500015000拷貝/毫升的外部質(zhì)控品。按實(shí)際使用量的要求配制大樣品量的血漿（推薦每次配置量可使用兩年），充分混勻。用無(wú)菌凍存管定量分裝，標(biāo)記，封口，凍存于80℃以下非自動(dòng)除霜冰箱內(nèi)。隨機(jī)選出10管外部質(zhì)控品，按照實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)條件進(jìn)行HIV1病毒載量檢測(cè)，將拷貝值換算成Log10值，計(jì)算算術(shù)平均值（m）和標(biāo)準(zhǔn)偏差（s）。根據(jù)外部質(zhì)控品的定值，繪制質(zhì)控圖。在質(zhì)控圖上顯示所有10次質(zhì)控品檢測(cè)值的Log10值、 值范圍。每次檢測(cè)都應(yīng)帶1個(gè)外部對(duì)照，將得到的外部對(duì)照Log10值標(biāo)在質(zhì)控圖上， 值范圍判斷實(shí)驗(yàn)結(jié)果是否有效，每次測(cè)得值在平均值177。使用新批次的外部對(duì)照質(zhì)控品時(shí)，必須重新繪制質(zhì)控圖。 試劑盒質(zhì)控品的使用每次實(shí)驗(yàn)按照試劑盒說(shuō)明書(shū)的要求使用試劑盒提供的質(zhì)控品，并滿(mǎn)足質(zhì)控品的要求。 數(shù)據(jù)分析、結(jié)果報(bào)告 在試劑盒及外部質(zhì)控品結(jié)果滿(mǎn)足要求的前提下，對(duì)樣品進(jìn)行分析。 外部質(zhì)控品不合格，樣品需要重新檢測(cè)。 結(jié)果超過(guò)檢測(cè)上限的樣品應(yīng)稀釋以后重新檢測(cè)。 復(fù)核人對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行仔細(xì)復(fù)核并對(duì)結(jié)果提出結(jié)論、簽字。 簽發(fā)人對(duì)結(jié)果的結(jié)論進(jìn)行審核、分析、總結(jié)、簽字。 按不同方法的要求，以拷貝/毫升或國(guó)際單位/毫升為單位報(bào)告樣品的HIV1病毒載量值。第六章 外部質(zhì)量控制HIV1病毒載量檢測(cè)的外部質(zhì)量控制可以通過(guò)參加外部質(zhì)量評(píng)價(jià)，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可比性，發(fā)現(xiàn)系統(tǒng)誤差，改進(jìn)實(shí)驗(yàn)室工作，提高檢測(cè)質(zhì)量。艾滋病參比實(shí)驗(yàn)室自2004年開(kāi)始參加由美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院（NIH）組織的HIV1病毒載量檢測(cè)考核工作，考核盤(pán)有5個(gè)樣品組成，分別考核實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的靈敏度、特異性、穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性，通過(guò)將結(jié)果與國(guó)際上參與考核的所有實(shí)驗(yàn)室結(jié)果進(jìn)行比對(duì)評(píng)估，給出綜合評(píng)估結(jié)果。通過(guò)參加考核，保證艾滋病參比實(shí)驗(yàn)室的不同HIV1病毒載量檢測(cè)系統(tǒng)的有效性。目前，艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室通過(guò)參加艾滋病參比實(shí)驗(yàn)室組織的HIV1病毒載量檢測(cè)能力驗(yàn)證來(lái)實(shí)施外部質(zhì)量控制。 HIV1病毒載量檢測(cè)能力驗(yàn)證（PT）的組織艾滋病參比實(shí)驗(yàn)室為HIV1病毒載量檢測(cè)能力驗(yàn)證（PT）的組織者，負(fù)責(zé)制定國(guó)內(nèi)HIV1病毒載量檢測(cè)能力驗(yàn)證的計(jì)劃并組織實(shí)施。建議國(guó)內(nèi)所有從事HIV1病毒載量檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)室參加該P(yáng)T項(xiàng)目，在規(guī)定時(shí)間內(nèi)使用有效試劑與實(shí)驗(yàn)樣品一起檢測(cè)，填寫(xiě)HIV1病毒載量實(shí)驗(yàn)結(jié)果報(bào)告單（附表46），上報(bào)艾滋病參比實(shí)驗(yàn)室。鼓勵(lì)有條件的實(shí)驗(yàn)室參加國(guó)際組織的PT活動(dòng)。 HIV1病毒載量檢測(cè)能力驗(yàn)證（PT）的實(shí)施 PT樣品組成：每次5份。包括陰性、不同拷貝數(shù)的陽(yáng)性樣品。 PT頻率：一年2次，分別為3月和9月。 PT樣品的接收與保存：要求參加PT的實(shí)驗(yàn)室收到考核樣品后，立即進(jìn)行核對(duì)、檢查，填寫(xiě)HIV1病毒載量檢測(cè)能力驗(yàn)證樣品接收專(zhuān)用單（附表3），3天內(nèi)將接收專(zhuān)用單傳回艾滋病參比實(shí)驗(yàn)室。如發(fā)現(xiàn)考核樣品缺失、量不足、空管等情況，及時(shí)書(shū)面回報(bào)，艾滋病參比實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)補(bǔ)寄或更換。收到樣品后應(yīng)及時(shí)檢測(cè)或在70度以下保存。 PT樣品的檢測(cè)：要求將考核樣品同實(shí)驗(yàn)室常規(guī)樣品一起檢測(cè)，由常規(guī)檢測(cè)人員進(jìn)行，不應(yīng)作為特殊樣品處理。 PT結(jié)果的報(bào)告和處理：參加PT的實(shí)驗(yàn)室必須在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)（收到樣品3個(gè)月內(nèi)），用電子郵件報(bào)告實(shí)驗(yàn)結(jié)果，并將HIV1病毒載量實(shí)驗(yàn)結(jié)果報(bào)告單（附表46）和打印的儀器原始記錄一起上報(bào)給艾滋病參比實(shí)驗(yàn)室，后者將負(fù)責(zé)結(jié)果錄入和處理。