【文章內(nèi)容簡介】 血鉛含量。正確指導鉛中毒兒童驅(qū)鉛，對兒童的生長發(fā)育具有重要的意義。 血鉛是反映近期鉛接觸的敏感指標，且其水平與鉛中毒的程度密切相關(guān)。研究發(fā)現(xiàn) 淳安和桐鄉(xiāng)兒童血鉛水平顯著高于開化，其中桐鄉(xiāng)兒童的血鉛水平最高。國際兒童血鉛中毒分級標準 為： Ⅰ 級 ， 血鉛 ＜ 100ug/L，相對安全； Ⅱ 級 ， 血鉛100ug/L199ug/L， 血紅素代謝受影響，神經(jīng)傳導速度下降 ；Ⅲ級 ， 血鉛 200 ug/L499ug/L， 鐵鋅鈣代謝受影響，出現(xiàn)缺鈣、缺鋅、血紅蛋白合成障礙，可有免疫力低下、學習困難、注意力 不集中、智商水平下降或體格生長遲緩等癥狀 ；Ⅳ級 ，血鉛 500 ug/L699ug/L， 可出現(xiàn)性格多變、易激怒、多動癥、攻擊性行為、運動失 12 調(diào)、視力和聽力下降、不明原因腹痛、貧血和心律失常等中毒癥狀； Ⅴ級 ， 血鉛≥700ug/L， 可導致腎功能損害、鉛性腦病（頭痛、驚厥、昏迷等）甚至死亡 。本研究對象中，開化和淳安血鉛水平處于 Ⅰ 級，相對安全，而 桐鄉(xiāng)的血鉛水平已經(jīng)到達 Ⅱ 級范圍，在此暴露水平下可影響神經(jīng)傳導速度和認知能力，使兒童易出現(xiàn)頭暈、煩躁、注意力渙散、多動，這需我們引起重視。 研究 發(fā) 現(xiàn) ALAD12 型個體在鉛暴 露時更容易發(fā)生高血鉛，是鉛毒性的 易感和高危人群 [7,8] 。 本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn) ALAD12 基因型血鉛水平與 ALAD11 基因型血鉛水平無顯著性差異。但有趣的是，對照地區(qū)的 ALAD12 基因型血鉛水平反而降低 。與之前報道的 ALAD12 基因型血鉛水平不符 [3]?？赡芘c本研究的樣本量較少， 檢測到的ALAD12 基因型數(shù)量較少有關(guān)。另外，開化地處山區(qū)，綠化覆蓋面較大，工農(nóng)業(yè)污染較少，空氣質(zhì)量較好，因而鉛暴露水平本底值較低， ALAD12 基因型血鉛水平低也可能是一種自然的現(xiàn)象。 人體內(nèi)的鉛全部來自外界環(huán)境，外界環(huán)境包 括大氣污染、家居環(huán)境中的鉛均會引起兒童鉛中毒，并主要由消化道和呼吸道進入兒童體內(nèi) [9]。 對不同監(jiān)測點 ALAD12基 因型血鉛水平進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn)， 桐鄉(xiāng)和淳安地區(qū)的兒童血鉛水平顯著高于開化地區(qū)。分析原因之一可能是所處環(huán)境的差異。經(jīng)過對淳安，開化，桐鄉(xiāng)三個地區(qū) 的工業(yè)情況調(diào)查發(fā)現(xiàn)，桐鄉(xiāng)以皮革業(yè)為主，產(chǎn)生大量的廢水，重金屬污染比較嚴重 ；開化所處地理較偏僻，綠化較多，工業(yè)污染很少，反映的是一種比較原始的狀態(tài)； 淳安地區(qū)的工業(yè)主要為造酒業(yè)，近年來旅游經(jīng)濟發(fā)展迅速，由此帶來一系列副反應令人擔憂，比如水源水污染、汽車尾氣 污染等。因此本研究鉛暴露水平的結(jié)果與各個地區(qū)實際污染情況是比較吻合的。 Wetmur 等 研究 發(fā)現(xiàn)， ALAD 基因第 4 外顯子的第 177 堿基發(fā)生 GC 突變，這個突變改變了 ALAD 酶構(gòu)象，增加了 AIAD2 亞單位與鉛的親和力，使 AIAD2 亞單位與鉛的結(jié)合更為緊密，從而導致攜有 AIAD2 亞單位的個體 (ALAD22 型和 ALAD12 型 )在受到鉛暴露時更容易發(fā)生高血鉛和鉛中毒 [10]。本研究采用 PCRRFLP 技術(shù)對ALAD 基因型進行檢測，理論上可得到三種基因型： ALAD11 基因型、 ALAD12基因型、 ALAD22 基因型。結(jié)果中只檢測到 ALAD11 和 ALAD12 兩種基因型，未發(fā)現(xiàn) ALAD22 基因型，這與已有的國內(nèi)報道相似 [11]。根據(jù) HardyWeinberg 平衡 （ p+q）178。=p178。+2pq+q178。=1 推算出 2 種基因型的理論分布頻率為：等位基因 ALAD1 和 ALAD2的頻率分別為 %和 %， 這與先前報道的上海職業(yè)接觸工人的基因型分布頻率（等位基因 ALAD1 和 ALAD2 的頻率分別為 %和 %）相似 [12]。 ALAD基因型分布各地區(qū)之間無顯著性差異。提示浙江省兒童對鉛毒性的易感程度可能 是相似的。 在鉛中毒機制中，鉛會抑制 ALAD 和血紅素合成酶的活性。 ALAD 受抑制后， 13 δ氨基 γ酮戊酸 （ ALA） 形成膽色素原的過程受阻，使血中 ALA 增加，并由尿排出。另外由于 ALA 合成過程，主要是 ALA 合成酶受血紅素的反饋調(diào)節(jié)，即鉛對血紅素合成酶的抑制會間接促進 ALA 合成酶活性升高，導致 ALA 增加 [13]。 本研究結(jié)果顯示， 路橋?qū)W齡兒童尿 δALA 顯著高于開化，間接反映了該地可能存在鉛污染。從目前對路橋地區(qū)的了解，該地廢舊電器拆卸業(yè)發(fā)達，并且零星分布有電池制造企業(yè)，因此重金屬污染不可避免。桐鄉(xiāng)學齡兒童尿 δALA 顯著低于開化，但血鉛水平相對較高。這一結(jié)果與目前對鉛毒性機制的解釋不相符，是不是鉛能直接抑制 ALA合成酶，造成尿 δALA 降低，或者可能采樣地存在其它的污染源，拮抗鉛的毒性作用，因此有待進一步研究或證實。開化和淳安 學齡兒童的 血鉛和尿 δALA 水平 與 鉛毒性機制 相符 。 本研究采用的整群抽樣法，抽取浙江省具有代表性地區(qū)的兒童血樣和尿樣，進行血鉛水平、鉛易感情況及相關(guān)效應指標的檢測，從一定程度上反映了浙江省學齡兒童鉛污染的基本情況。本研究還顯示 桐鄉(xiāng)和淳安地區(qū)的兒童血鉛水平顯著高于開化地區(qū)，表明隨著浙江省經(jīng)濟的 發(fā)展可能帶來一定的副作用，如兒童鉛中毒等一系列與環(huán)境污染有關(guān)健康相關(guān)問題需要引起關(guān)注。因此，浙江省作為我國經(jīng)濟相對發(fā)達的沿海省份，鉛污染對兒童健康的影響問題更值得關(guān)注 。 參考文獻 [1]王倩，王潔． 2141名學齡前兒童血鉛水平調(diào)查研究．中國婦幼保健， 2020， 24(10)： 13891392． [2]王慧文，錢慧霞 .衢州市 1875 名兒童血鉛水平分析 .上海預防醫(yī)學雜志， 2020， 22（ 8）：411412． [3]王永偉 ,楊躍林 ,等 .ALAD 基因多態(tài)性與鉛毒性遺傳易感性關(guān)系的研究 .四川大學學報， 2020, 39（ 3）： 511513． [4]吳 勝虎．顫祟帷 ,等 ． ALAD 基因 型 與兒童 鉛 毒性易感性 研究 ．國外醫(yī)學兒科學分冊， 1999，26(2)： 8587． [5]張文眾，冷曙光 ,等 .基質(zhì) γ羧基 谷氨酸蛋白和氨基乙酰丙酸脫水酶基因多態(tài)性與兒童血鉛的關(guān)系 .環(huán)境與職業(yè)醫(yī)學 ,2020， 23（ 2）： 112114． [6]于風嶺，伊長英，王素蘭 ,等． 2624 例兒童血鉛的檢測與分析．中國婦幼保健， 2020， 19(11)：117117． [7]Wetmur JG, Lehner G, Desnick RJ. The δ aminolevulinate dehydratase polymorphism : higher blood lead levels in lead workers and environmentally exposed children with the 12 and 22 isozymes. Environ Res, 1991, 56: l09ll9. [8]Wetmur JG. Influence of the mon human α amunolevulrate dehydratase polymorphism on lead body burden. Enmron health Pellet, 1994, 102: 215219. 14 [9]劉曉瀛 .漫談兒童血鉛中毒 .中國醫(yī)療前沿 ,20l0， 18（ 5）： 1718． [10]Wetmur JG, Kaya AH, Plewinska M, et a1. Molecular characterization of the human δaminolevulinate acid dehydratase 2 (ALAD2) allele implications for molecular screening of individuals for geic susceptibility to lead poisoning. Am J Ge, 199l, 49: 757763. [11]陳涵一，劉莉，等 .基于不同人群的鉛暴露標志及相關(guān)易感基因 .衛(wèi)生研究雜志， 2020， 39（ 5）： 643646． [12]葉細標，吳翠娥 ,等 .δ氨基 γ酮戊 酸脫水酶和維生素 D受體基因多態(tài)性與鉛毒性易感關(guān)系的初步分析 .中華勞動衛(wèi)生職業(yè)病雜志， 2020， 20(5)： 372374． [13]張紅輝，羅曉寧 ,等 .37 例鉛中毒者尿 δ氨基 乙酰丙酸的分析報告 .中國城鄉(xiāng)企業(yè)衛(wèi)生 ,2020， 133(5)： 151． 15 本科畢業(yè)論文 (設計 )任務書 學 院 專 業(yè) 生物技術(shù) 姓 名 學 號 指導老師 職 稱 副主任醫(yī)師 合作老師 職 稱 主管技師 題 目 浙江省部分地區(qū)兒童鉛污染狀況 的 毒理學調(diào)查 一、課題的內(nèi)容和任務要求 、熟悉實 驗基本操作 了解目前 我國鉛水平 及對 人體和 環(huán)境的影響，結(jié)合查閱到的資料撰寫相關(guān)綜述性文章一篇。 掌握 ALAD 基因的多態(tài)性檢測 方法的常用指標和基本原理。 人體鉛暴露檢測的毒理學方法 掌握血樣中 ALAD 基因提取 方法，并 掌握 PCR 技術(shù)；酶切技術(shù)及電泳技術(shù)的檢測方法操作步驟。 、統(tǒng)計及論文撰寫 采用 軟件進行實驗資料的統(tǒng)計，完成綜述、英文翻譯及 浙江省部分地區(qū)兒童鉛污染狀況毒理學調(diào)查 論文各一篇。 二、進度安排（ 起止時間： 2020 年 7 月 ～ 2020 年 3 月 ） 文獻查閱，翻譯英文綜述，了解實驗背景，方法，目的。 熟悉實驗儀器如 PCR 儀，電泳槽等，初步嘗試實驗操作， 熟悉實驗流程。 正式進行實驗操作，重復 ， 對樣本 DNA 進行擴增、酶切及電泳最后判斷其基因型；對個地區(qū)的血鉛水平及尿 δALA 進行測定 。 數(shù)據(jù)的處理、統(tǒng)計和分析。 論文撰寫。 16 三、主要參考資料 [1]吳 勝虎，沈曉明，顏崇淮，等．應用 氨基 δ酮戊 酸脫氫酶基因型篩查兒童鉛毒性易感人群的研究．中華兒科雜志， 2020,38(7)： 435438． [2]Wetmur JG, Lehner G, δaminolevulinate dehydratase polymorphism: higher blood lead levels in lead workers and environmentally exposed children with the 12 and 22 isozymes. Environ Res, 1991, 56:l09ll9. [3]Wetmur JG. Influence of the mon human αamunolevulrate dehydratase polymorphism on lead body burden. Enmron health Pellet, 1994, 102:215219. [4]王永偉 ,楊躍林 ,等 .ALAD 基 因多態(tài)性與鉛毒性遺傳易感性關(guān)系的研究 .四川大學學報， 2020,39（ 3）： 511513. [5]吳勝虎 ．顫祟帷 ,等． ALAD 基因型與兒童鉛毒性易感性研究．國外醫(yī)學兒科學分冊， 1999， 26(2)： 8587. [6]張文眾，冷曙光 ,等 .基質(zhì) γ羧 基谷氨酸 蛋白和氨基乙酰丙酸脫水酶基因多態(tài)性與兒童血鉛的關(guān)系 .環(huán)境與職業(yè)醫(yī)學 ,2020， 23（ 2）： 112114. [7]葉細標，吳翠娥 ,等 .δ氨基 γ酮戊 酸脫水酶和維生 素 D受體基因多態(tài)性與鉛毒性易感關(guān)系的初步分析 .中華勞動衛(wèi)生職業(yè)病雜志， 2020,20(5)： 372374. [8]張紅輝，羅曉寧 ,等 .37 例鉛中毒者尿 δ氨基乙酰丙酸的分析報告 .中國城鄉(xiāng)企業(yè)衛(wèi) 生 ,2020,133(5): 1516. 簽名欄： 學生： 指導老師： 學院領(lǐng)導 ： 注意： 1．任務書由指導老師填寫、院領(lǐng)導審核，學生、指導老師、院領(lǐng)導均應簽字。 2．此任務書要求在畢業(yè)論文（設計）工作開始前下達。 17 本科畢業(yè)論文 (設計 )開題報告 學 院 專 業(yè) 生物技術(shù) 姓 名 學 號 指導老師 職 稱 副主任醫(yī)師 合作老師 職 稱 主管技師 題 目 浙江省部分地區(qū)兒童鉛污染狀況 的 毒理學調(diào)查 題目性質(zhì) 實驗研究 技術(shù)開發(fā) 工程設計 應用型 調(diào)查型 其他 一、選題依據(jù)和目標 目的、意義 : 從毒理學角度對浙江省 部分 地區(qū)兒童 ALAD 基因多態(tài)性、血鉛暴露水平和效應生物標志物尿 δALA 進行分析 ， 對這些地區(qū)兒童的 鉛 暴露 與基因 易感 性以及 毒性效應的相關(guān)性進行初步的探討。 根據(jù)研究結(jié)果，