雙水相萃取ppt課件(編輯修改稿)
2025-06-02 18:03 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 增大，蛋白質(zhì)分子的分配系數(shù)將偏離臨界點處的值 (m=1)，即大于 1或小于 1。因此 ,成相物質(zhì)的總濃度越高，系線越長，蛋白質(zhì)越容易分配于其中的某一相。 (2) 鹽的種類和濃度 ?鹽的種類和濃度對分配系數(shù)的影響主要反映在對 相間電位 和 蛋白質(zhì)疏水性 的影響。 ① 鹽的種類 ? 在雙聚合物系統(tǒng)中，無機離子具有各自的分配系數(shù)，不同電解質(zhì)的正負(fù)離子的分配系數(shù)不同，從而產(chǎn)生不同的相間電位。由于各相要保持電中性，使得帶電生物大分子，如蛋白質(zhì)和核酸等分別向兩相移動分配。 ② 鹽的濃度 ? 鹽的濃度不僅影響蛋白質(zhì)的表面疏水性，而且擾亂雙水相系統(tǒng)，改變各相中成相物質(zhì)的組成和相體積比。 ?例如， PEG/磷酸鹽體系中上下相的 PEG和磷酸鹽濃度及Cl在上下相中的分配平衡隨添加 NaCl濃度的增大而改變，這種相組成即相性質(zhì)的改變直接影響蛋白質(zhì)的分配系數(shù)，如圖。 ?離子強度對不同蛋白質(zhì)的影響程度不同，利用這一特點，通過調(diào)節(jié)雙水相系統(tǒng)的鹽濃度，可有效地萃取分離不同的蛋白質(zhì)。 （ 4）溫度的影響 ? 分配系數(shù)對溫度的變化不敏感 ? 成相聚合物對蛋白質(zhì)有穩(wěn)定化作用 ,所以室溫操作活性收率依然很高 ,而且室溫時粘度較冷卻時 (4 ℃ ) 低 ,有助于相的分離并節(jié)省了能源開支。 （一）目的物的萃取 如果目標(biāo)產(chǎn)物在上相中的分配系數(shù)足夠大，則細(xì)胞勻漿液中的目標(biāo)產(chǎn)物可采用一步或兩步雙水相萃取工藝獲得較高的純化倍數(shù)。 ?一步雙水相萃?。?是把生物材料懸浮液和雙水相
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