核苷酸代謝ppt課件(2)(編輯修改稿)
2025-05-31 02:28 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 鏈連接起來。 3’ 5’ 3’ 5’ OH P ?DNA連接酶（ 1967年發(fā)現(xiàn)） 消除 DNA 的超螺旋 ,根據(jù)作用方式不同而分為兩種 : ?拓?fù)洚悩?gòu)酶 (旋轉(zhuǎn)酶 ) 旋轉(zhuǎn)酶 Ⅰ 旋轉(zhuǎn)酶 Ⅱ ?旋轉(zhuǎn)酶 Π： 使 DNA兩條鏈發(fā)生斷裂和再連接?？梢孕纬韶?fù)超螺旋 ,需要由 ATP或 GTP提供能量 . 解開雙螺旋 ,使其成為單鏈 .通過水解 ATP將 DNA兩條鏈打開。每解開一對堿基需要水解 2個(gè) ATP分子。 rep蛋白就是解螺旋酶，還有解螺旋酶 I、II、 III。 rep蛋白沿 3 ’ ?5’ 移動(dòng)，而解螺旋酶 I、 II、III沿 5 ’ ?3’ 移動(dòng)。 ?解旋酶 （解鏈酶） ?其它蛋白因子 ?單鏈結(jié)合蛋白 (SSBsinglestrand binding protein)(又叫螺旋去穩(wěn)定蛋白 )：穩(wěn)定已被解開的 DNA單鏈，阻止復(fù)性和保護(hù)單鏈不被核酸酶降解。 √ 引發(fā)酶 :催化 RNA引物合成的 RNA聚合酶 . 引發(fā)酶需要 ATP或 GTP提供能量 . ?DNA的復(fù)制：以 DNA為模板合成 DNA。 ?逆轉(zhuǎn)錄：以 RNA為模板合成 DNA。 ?修復(fù)合成 （ DNA聚合酶 I、連接酶等） ?雙鏈的解開 ?RNA引物的合成 ?DNA鏈的延伸 ?切除 RNA引物，填補(bǔ)缺口，連接相鄰的 DNA片段 四、 DNA的復(fù)制過程： （以大腸桿菌為例） (一 ) 雙鏈的解開 ?DNA的復(fù)制有特定的起始位點(diǎn)，叫做復(fù)制原點(diǎn)。常用 ori(或 o）表示。 ?從復(fù)制原點(diǎn)到終點(diǎn)，組成一個(gè)復(fù)制單位，叫復(fù)制子。 ?大腸桿菌染色體 DNA以及真核生物的細(xì)胞器DNA為雙鏈環(huán)狀，只有一個(gè)復(fù)制原點(diǎn) . ?真核生物染色體 DNA是線性雙鏈分子，含有多個(gè)復(fù)制原點(diǎn) ,因此是多復(fù)制子 . ? 復(fù)制原點(diǎn)在原點(diǎn)處形成一個(gè)眼狀結(jié)構(gòu)，叫復(fù)制眼。 ? DNA復(fù)制進(jìn)行時(shí)，在眼的兩側(cè)出現(xiàn)兩個(gè)叉子狀的生長點(diǎn) (growth point)，叫復(fù)制叉。 ?(大腸桿菌）由 rep 蛋白在復(fù)制叉內(nèi)解開親代雙螺旋 DNA，分開的雙鏈再與 SSB結(jié)合，防止鏈內(nèi)退火 復(fù)制眼的結(jié)構(gòu)： (b)復(fù)制叉雙向復(fù)制起點(diǎn)復(fù)制叉起點(diǎn)(a)單向復(fù)制復(fù)制叉復(fù)制叉 起點(diǎn) 復(fù)制叉 延伸 延伸 起點(diǎn) 領(lǐng)頭鏈 領(lǐng)頭鏈 隨后鏈 隨后鏈 3’ 5’ 3’ 5’ DNA的雙向復(fù)制 (二 ) 引發(fā)體和引物 由蛋白因子（如 dnaB等）識別復(fù)制起始點(diǎn)，并與其他蛋白因子以及引物酶一起組裝形成引發(fā)體 .在引物酶的催化下，以 DNA為模板，合成一段短的 RNA片段， 引物酶的底物是核苷三磷酸 ，在引物的 5’ 端含 3個(gè)磷酸殘基 ,3’端為游離的羥基。 引物長度為 (原 )50至 100個(gè)核苷酸， (真 )較短 ,約 10. Dna A Dna B、 Dna C DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶 SSB 3? 5? 3? 5? 含有解螺旋酶、 DnaC蛋白、引物酶和 DNA復(fù)制起始區(qū)域的復(fù)合結(jié)構(gòu)稱為引發(fā)體。 ? 在 DNA聚合酶的催化下 ,根據(jù)模板鏈 3’ →5′的核苷酸序列 ,在 RNA引物的 3′OH末端逐個(gè)添加脫氧核苷三磷酸 ,延伸方向是 5′→3′,每形成一個(gè)磷酸二酯鍵即釋放 1個(gè)焦磷酸 , ? 隨著復(fù)制叉的推進(jìn) ， 兩條新鏈的合成方向是不同的：一條鏈延伸的方向與復(fù)制叉前進(jìn)的方向一致 ， 它的合成能連續(xù)進(jìn)行 ， 稱為 前導(dǎo)鏈 ； ?另一條鏈延伸的方向與復(fù)制叉前進(jìn)的方向相反，不能被連續(xù)合成，需要復(fù)制叉推進(jìn)了一定的長度，有了一段 DNA單鏈后，才能以此為模板合成一個(gè)片段。因此這條新鏈的合成是不連續(xù)的，所以稱為 滯后鏈 。 復(fù)制叉 起點(diǎn) 復(fù)制叉 延伸 延伸 起點(diǎn) 前導(dǎo)鏈 前導(dǎo)鏈 滯后鏈 滯后鏈 3’ 5’ 3’ 5’ DNA的雙向復(fù)制 前導(dǎo)鏈 滯后鏈 岡崎片段 前導(dǎo)鏈： 以 3’ → 5’ 方向的親代鏈為模板連續(xù)合成的子代鏈。 滯后鏈 ：以 5’ →3’ 方向的親代鏈為模板的子代鏈先逆復(fù)制叉移動(dòng)方向合成岡崎片段，再連接成滯后鏈。 半不連續(xù)復(fù)制 — 在 DNA復(fù)制時(shí)，領(lǐng)頭鏈?zhǔn)沁B續(xù)合成的 ,而隨后鏈的合成是不連續(xù)的，這種復(fù)制方式稱為半不連續(xù)復(fù)制。 ?岡崎片段 在 DNA復(fù)制過程中，領(lǐng)頭鏈能連續(xù)合成，而隨后鏈只是多個(gè)短片段，這些不連續(xù)的小片段以其發(fā)現(xiàn)者的名字命名為岡崎片段。 岡崎片段真核 100200個(gè)核苷酸 原核 10002022個(gè)核苷酸。 ? 復(fù)制
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