遺傳物質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)、性質(zhì)和功能(編輯修改稿)
2025-05-29 05:41 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 發(fā)重新締合成為雙螺旋結(jié)構(gòu)的過程稱為 復(fù)性 。 變性 DNA在緩慢冷卻時可以復(fù)性，稱為 退火 核酸的變性和復(fù)性在基因工程中有何應(yīng)用？ ? 已經(jīng)復(fù)性的 DNA分子如果兩條鏈來源不同，就叫 雜交分子 ? 核酸的雜交 （ hybridization ） 序列互補(bǔ)的單鏈RNA和 DNA，或 DNA和 DNA，或 RNA和 RNA，根據(jù)堿基互補(bǔ)的原則，借助氫鍵相連而形成雙鏈雜交分子的過程 二、核酸分子雜交的基本原理 探針 probe: 是一段可以與靶核酸序列特異結(jié)合發(fā)生相互作用的核酸序列，經(jīng)過標(biāo)記后可以用來檢測出靶核酸序列 探針的性質(zhì)： DNA， RNA，雙鏈或單鏈均可 探針的長度：從 20bp到幾 kb都可以 探針的標(biāo)記：同位素或非同位素 三、核酸探針及標(biāo)記 ? 1. Southern blot ? 1975英國分子生物學(xué)家 DNA 印跡方法 ? 檢測 DNA ? 2. Northern blot ? 1977年 Alwine 建立 Thonas 改進(jìn) 的 RNA 印跡方法 ? 檢測 RNA ? 3. Western blot ? 以親和或免疫反應(yīng)檢測蛋白的蛋白質(zhì)印跡方法 四、核酸分子雜交的應(yīng)用 Southern Blot ? 4. hybridization in situ 原位雜交 ? 在組織或細(xì)胞水平上使用標(biāo)記探針與細(xì)胞內(nèi)DNA或 RNA雜交的方法 ? ? 如斑點(diǎn)雜交 ,狹縫雜交 ,菌落雜交 ,噬菌斑雜交 ,本質(zhì)還是 Southern or Northern blot 6. Biochip生物芯片 來源于微陣列技術(shù) (Microarray) 生物芯片 ：將數(shù)以萬計的生物大分子探針分別固定在微小載體表面而制成的芯片。目前有蛋白質(zhì)芯片和核酸芯片兩類。 原理 :核酸或蛋白質(zhì)之間的雜交 1998年世界十大科技進(jìn)展之一 第四節(jié) 反義核酸及藥物 p18 （ 1）概念： 反義核酸 是根據(jù)堿基互補(bǔ)的原理 ,利用人工合成或細(xì)胞中天然存在的 DNA或 RNA片段 (或其化學(xué)修飾的衍生物 )與目的靶序列核酸結(jié)合，通過空間位阻作用或誘導(dǎo) RNAase活性的降解作用，在復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、剪接、 mRNA轉(zhuǎn)運(yùn)及翻譯等水平上，抑制或封閉目的靶基因的表達(dá)。 反義核酸的功能主要取決于其穩(wěn)定性、生物利用度以及與靶基因結(jié)合或反應(yīng)的特性。 1. 反義核酸 (antisense nucleic acid) （ 2） .反義核酸作用的靶區(qū)域 ? mRNA5’非翻譯區(qū) ? mRNA5’編碼區(qū) ? mRNA5’帽子形成位點(diǎn)區(qū)域 ? 前體 mRNA外顯子與內(nèi)含子結(jié)合部位 ? mRNA polyA形成位點(diǎn)區(qū)域 ? 阻止 mRNA的成熟及其向胞漿中的轉(zhuǎn)運(yùn) 反義技術(shù) 是利用人工合成或細(xì)胞中天然存在的 DNA或 RNA片段 (或其衍生物 )與特定的基因相互作用 ,從而抑制基因的表達(dá)。目前發(fā)展到第三代。 第一代 硫代修飾寡聚核苷酸 第二代 甲氧 /乙氧基反義寡核苷酸 第三代 肽核酸（ PNA） 20年來 ,反義核酸藥物的發(fā)展非常緩慢 ,僅有一個反義藥物進(jìn)入市場 ,惟一獲得批準(zhǔn)的 RNA反義藥物是 1998年 8月 27日得到美國 FDA正式批準(zhǔn)的諾華、 Isis制藥的福米韋生（ f
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