實(shí)驗(yàn)三植物不定芽誘導(dǎo)與快繁技術(shù)(編輯修改稿)
2025-06-20 01:46 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 草、馬鈴薯、小麥可快速生長(zhǎng)并繼代培養(yǎng)無(wú)限生長(zhǎng)。蘿卜、豌豆需長(zhǎng)時(shí)間且有限。木本植物很難生長(zhǎng)。 營(yíng)養(yǎng)條件 硝酸鹽是最好氮源，蔗糖是最好碳源，鐵、錳、硼、硫、維生素不能缺少。 激素 生長(zhǎng)素對(duì)不同植物反應(yīng)不同 pH 光照和溫度 2527℃ 第二節(jié) 莖尖培養(yǎng) 一、概念和意義 莖尖培養(yǎng)概念 莖尖分生組織培養(yǎng)：指對(duì)不超過(guò) 尖或幾十微米的莖尖進(jìn)行的培養(yǎng)。特點(diǎn)：可獲無(wú)病毒苗，操作困難，成苗時(shí)間長(zhǎng)。 普通莖尖培養(yǎng)：對(duì)幾毫米至幾十毫米長(zhǎng)的莖尖、芽尖及側(cè)芽的培養(yǎng)。操作技術(shù)簡(jiǎn)單、易成活、成苗時(shí)間短、繁殖速度快。 莖尖培養(yǎng)意義 莖尖培養(yǎng)在園藝植物離體培養(yǎng)中最常見，可快速繁殖無(wú)性系、培養(yǎng)無(wú)病毒苗、品種改良。 二、莖尖培養(yǎng)一般方法 （一）材料的制備 健壯枝梢 去除葉片 分成 12cm自來(lái)水沖洗消毒 75%的酒精 30秒 %升汞或 20倍次氯酸鈉消毒810min無(wú)菌水 修剪剝離莖尖，通常切割下頂端 （無(wú)菌水） 接種。 （二）培養(yǎng)基 多為 MS培養(yǎng)基及其改良配方，還有 White配方、B5配方、 Heller配方、 Gautheret配方等。 （三）培養(yǎng)方法 固體培養(yǎng)法 特點(diǎn)：瓊脂做凝固劑，莖尖基部緊貼培養(yǎng)基。 優(yōu)點(diǎn)：操作較為簡(jiǎn)單，普遍。 缺點(diǎn)：對(duì)有些植物培養(yǎng)較難。 操作：培養(yǎng)基分裝 —— 滅菌 —— 冷卻 —— 莖尖接種 —— 25+3℃ 培養(yǎng)。 紙橋培養(yǎng)法 濾紙取代瓊脂，液體培養(yǎng)基。 優(yōu)點(diǎn)：營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)能均衡持久地供給外植體，利于外植體健康生長(zhǎng)。 缺點(diǎn)：操作復(fù)雜。 三、普通莖尖培養(yǎng)與繁殖技術(shù) 莖尖培養(yǎng)可進(jìn)行植物的無(wú)性快繁，并且技術(shù)較為成熟，也叫微繁技術(shù)。 （一）莖尖微繁技術(shù)的一般方法 無(wú)菌培養(yǎng)體系的建立 外植體制備：正在生長(zhǎng)的芽或腋芽、莖段、鱗莖切塊、塊莖、球莖。莖尖組織大小為帶 24個(gè)葉原基或更多。 操作程序：類似一般無(wú)菌操作基本技術(shù)培養(yǎng)基： MS、 B White等，糖 23%，生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑。 培養(yǎng)條件： 10003000Lx、 16h、 25℃ 。 芽的增殖 ⑴頂芽和腋芽的發(fā)育；利用頂端優(yōu)勢(shì) ⑵誘導(dǎo)不定芽產(chǎn)生；外植體直接產(chǎn)生不定芽 外植體脫分化 愈傷組織 不定芽 ⑶原球莖的發(fā)育； 原球莖 — 種子發(fā)芽時(shí)，胚根部不出現(xiàn)，胚逐漸增大，種皮一端破裂，膨大的胚呈圓錐狀，稱為原球莖。即縮短的、珠粒狀的、胚性細(xì)胞組成、類似于球莖的器官。 芽和種子發(fā)育 — 原球莖 — 植株 中間繁殖體的增殖 第二階段產(chǎn)生的芽、苗和原球莖，統(tǒng)稱為中間繁殖體。 莖尖的發(fā)育方向及調(diào)節(jié)是
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