外文翻譯--運(yùn)用實(shí)時pcr技術(shù)監(jiān)測生物浸出黃銅礦中的嗜熱微生物的數(shù)量(編輯修改稿)
2025-06-26 05:48 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 分別為 107個細(xì)胞毫升 1 X射線衍射分析結(jié)果表明，浸出群落殘留 1， 4和 5主要包括黃銅礦，黃鉀鐵礬，硫酸鉛礦和二氧化鉛。然而，黃鉀鐵礬是由沒有發(fā)現(xiàn)殘留的非生物浸出控制，群落 2和 3。在非生物浸出渣控制主要包含 黃銅礦，硫酸鉛礦，并導(dǎo)致二氧化碳，而浸出渣的主要群落 2和 3載有黃銅礦，黃鐵礦，硫酸鉛礦 ,再導(dǎo)致氧化。 驗證 PCR產(chǎn)物的特異性 常規(guī) PCR擴(kuò)增的產(chǎn)物質(zhì)量用 ％（ w/v）的瓊脂糖凝膠電泳和溴化乙錠染色進(jìn)行檢查。每個 PCR產(chǎn)物中包含一個單片段預(yù)期的大?。▓D 2），結(jié)果揭示了 BLAST分析（數(shù)據(jù)未顯示），該 PCR產(chǎn)物序列比較一致，都是100％，這證明了擴(kuò)增的 DNA片段正確的。 熔解曲線分析表明，熒光信號同時獲得一個實(shí)時 PCR檢測起源從具體的 PCR產(chǎn)物，而不是從人造的引物二聚體。實(shí)時 PCR檢測數(shù)據(jù)分析表明，單一的熔 融峰對應(yīng)于標(biāo)準(zhǔn)的 DNA觀察了所有樣本（數(shù)據(jù)未顯示）。 實(shí)時 PCR檢測驗證 所有的標(biāo)準(zhǔn)曲線具有很高的相關(guān)系數(shù)，類似的擴(kuò)增效率，以及類似的斜率（見表 2）。 PCR擴(kuò)增特定的16SrRNA基因是基于其非特異性，同 16S rRNA基因樣本相比較在這項研究中的其他物種。該實(shí)驗，測試在擴(kuò)增的 16S rRNA的特異性 DNA存在和 105的所有其他副本的情況下本研究的物種進(jìn)行了研究。觀察到無明顯差異在存在和缺乏競爭的非特異性引物的 DNA與所有測試的基礎(chǔ)上熒光擴(kuò)增圖譜指數(shù)（數(shù)據(jù)未所示）。結(jié)果表明，該方法可用于檢測和 量化提取樣本含有混合菌種目標(biāo) DNA。 為了進(jìn)一步驗證實(shí)時 PCR檢測，個別 16S rRNA基因擴(kuò)增的標(biāo)準(zhǔn)（每個為 104拷貝 /測試）從 4不同的物種，包括 At. caldus s2, YSK, F. thermophilum L1, and 用特異性引物擴(kuò)增及其復(fù)印件數(shù)字是計算參照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果表明，拷貝數(shù)經(jīng)檢測，估計在實(shí)際的匹配副本因子 （表 2），表明了實(shí)時 PCR方法可用于量化混合的 DNA樣本個別 16S rRNA基因。 黃 銅礦浸出嗜酸系統(tǒng)中溫和嗜熱細(xì)菌實(shí)時定量 PCR技術(shù) 實(shí)時 PCR法用于跟蹤微生物群落 4和第 5浸礦環(huán)境。滲濾液樣品撤回后 15日和第 28天。 分析結(jié)果表明，群落 4的群落結(jié)構(gòu)在生物浸出急劇變化過程（圖 3）。雖然 3株菌株在群落 4日開始有相同的細(xì)胞數(shù)， At. caldus s2and L. ferriphilum YSK共占超過 99％的生物浸出體系中的總原核生物中間階段。F. thermophilum L1僅在后期和 16S rRNA基因的拷貝數(shù)占 22％的總拷貝檢測中發(fā)現(xiàn)。 分析結(jié)果表明，群落 4的群落結(jié)構(gòu)在生物浸 出急劇變化過程（圖 3）。雖然 3株菌株在群落 4日開始有相同的細(xì)胞數(shù)， At. caldus s2and L. ferriphilum YSK共占超過 99％的生物浸出體系中的總原核生物中間階段。F. thermophilum L1僅在后期和 16S rRNA基因的拷貝數(shù)占 22％的總拷貝檢測中發(fā)現(xiàn)。 At. caldus s2 and Sulfobacillus sp. LN都是在浸礦微生物系統(tǒng) 5中占主導(dǎo)。 L. ferriphilum YSK 5 的 16S rRNA基因拷貝總數(shù)在的從中期階段的 20％的中下降至尾期約 2％。相 比之下， 16S rRNA基因 F. thermophilum L1 的在最后階段拷貝數(shù)占 41％，雖然中間階段 F. thermophilum L1的比例是在群落中最小。 討論 實(shí)時 PCR分析，所有的標(biāo)準(zhǔn)曲線具有較高的相關(guān)系數(shù)和類似的斜率 。此外，設(shè)計特異性引物 PCR擴(kuò)增效率是適當(dāng)?shù)模ㄒ姳?2）。因此，被允許作為標(biāo)準(zhǔn)曲線使用。單熔融峰表明，引物二聚體有沒有像人造的一樣。 此外，中度嗜熱嗜酸使用在研究中只包含一到兩個拷貝的 16S rRNA基因 每個基因組（劉等人 。 2020年）。 16S rRNA基因的變異每一株副本應(yīng)大致代表的人口動力。因此，實(shí)時 PCR檢測可申請快速檢測和定量變化中的嗜熱細(xì)菌浸出涉及溫和黃銅礦。 在本研究中使用的 Ferroplasma （沖部等。 2020年）到。他們也往往選擇建造 39。邏輯設(shè)計 39。群落在 4060℃（羅林斯和約翰遜 2020年）。 L. ferriphilum YSK是自養(yǎng)氧化中度嗜熱菌。據(jù)說在 At. caldus s2的可能貢獻(xiàn)，間接地通過產(chǎn)生酸性硫化物礦物氧化，并經(jīng)刪除元素硫，否則可能損害溶解過程形成鈍化 層（多普森與林斯特龍， 1999年）。 Ferroplasma菌。是鐵氧化嗜酸古細(xì)菌，而且似乎是一個非常不同的組微生物（多普森等人。 2020年 。 Golyshina等人。 2020年 。Hawkes et al. 2020).F. thermophilum L1是一個混合營養(yǎng)嗜熱溫和古菌。 Sulfobacillus藻中 LN的是混合營養(yǎng)鐵，用硫氧化和嗜熱。 生物淋濾的硫化物有兩種基本的機(jī)制。直接的機(jī)制，它本來是該礦物硫官能團(tuán)是生物氧化硫酸鹽檢測無任何中間。與此相反，在所謂的間接機(jī)制，它基本上包括鐵的氧化反應(yīng)（三） 在金屬硫離子解散。在這個化學(xué)反應(yīng)，鐵（ II）離子和元素硫（ S8的）應(yīng)產(chǎn)生。然后，這些化合物是生物氧化為鐵（ III）離子和硫酸。硫酸鹽的生產(chǎn)也造成了減少垃圾滲濾液的 pH值（ Sand et al. 2020）。 在浸出過程中，形成鈍化層認(rèn)為是由礦物表面上的黃鉀鐵礬沉淀，作為溶解緩慢的原因，鈍化更大的阻礙是限制礦物表面層銅萃取流動的細(xì)菌，營養(yǎng)鹽，氧化劑，反應(yīng)從產(chǎn)品和（斯托特等。 2020沃特林 2020年）。在我們的實(shí)驗中，溶解黃銅礦也經(jīng)歷了類似的變化。據(jù)初步在浸礦體系 pH值的增加是由于酸溶解和氧化亞鐵。由于硫氧化元 素硫氧化細(xì)菌和黃鉀鐵礬的形成， pH值開始下降生物浸出后 5天的環(huán)境?？扇苄澡F鐵濃度下降后， 20天的生物浸出 系統(tǒng) 1， 4和 5，因為黃鉀鐵礬沉淀。 群落 2沒有群落 3有效。少量酵母提取物為 F. thermophilum L1在實(shí)驗室中生長所必須的，并可能為其提供生長因子，但在其自然的環(huán)境中，像真菌等微生物可能提供這一增長因子（多普森等人。 2020年）。相較于群落含 L. ferriphilum，群落 2和 3似乎有效地減少由黃銅礦浸出銅。 ferriphilum具有較高的比生長速率和亞鐵嗜熱氧化速度比樓，這在導(dǎo)致浸出效率更 高。該群落 4比群落 1有較高的浸出效率，表明。相較于群落包含兩個或三個不同的物種生理中度嗜熱嗜酸，更復(fù)雜的群落 5為最高浸出效率。 微生物浸礦過程中的動態(tài)應(yīng)與細(xì)菌浸出的環(huán)境是一致的。其中包括硫元素和許多 polythionate
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