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正文內(nèi)容

20xx性別鑒定計(編輯修改稿)

2025-01-17 00:46 本頁面
 

【文章內(nèi)容簡介】 、圖12的泳道泳道16加的是DL2000 DNA marker,起指示DNA條帶的作用。DL2000 DNA marker的條帶大小由上至下分別是2kb、1kb、750bp、500bp、250bp、100bp。由于點樣時間太長,圖11泳道1和圖12的泳道1的DL2000 DNA marker樣品彌散了,因此在圖中沒有顯示出來。
圖11的泳道13,圖12的泳道5是加入的樣品是陰性對照,陰性對照組PCR反應(yīng)體系不加模版,在100bp處有引物多聚體的條帶,對女生的電泳結(jié)果起對照作用。
圖11的泳道12,圖12的泳道15是加入的樣品是陽性對照,在299bp處有條帶,能對男生的電泳結(jié)果起對照作用。
除DL2000 DNA marker的上樣孔外,其他上樣孔在100bp處都有或深或淺的條帶,此處的條帶是引物自身配對所形成的引物多聚體,條帶深可能是因為:①上樣量相對較多;②所配總反映體系時沒有充分混勻,導(dǎo)致分裝過程中引物含量相對較多;③引物自身形成二聚體的量過多。條帶淺可能是因為:①上樣量相對較少;②所配總反映體系時沒有充分混勻,導(dǎo)致分裝過程中引物含量相對較少;③引物自身形成二聚體的量過少。
女生的上樣孔為圖11的泳道11122和圖12的泳道114。所有的上樣孔在100bp附近都有條帶,是由于形成了引物多聚體。圖12的泳道114除了在100bp處有條帶之外,在其上方也有較弱的條帶,可能是操作過程中引入了DNA雜質(zhì)而導(dǎo)致樣品不純。
男生的上樣孔為圖11的泳道111121和圖12的泳道113。除泳道16外,其他上樣孔在250bp靠上的位置均存在299bp的條帶,有的條帶深有的條帶淺,可能是由于在取樣過程中用牙簽刮取的口腔上皮細胞量不同,導(dǎo)致所提取的DNA量不同,PCR擴增的片段的量也就不同了,也有可能是上樣過程中點樣量存在差異而導(dǎo)致最終條帶亮度不同。男生的泳道也均會形成100bp大小的引物多聚體。泳道16沒有299bp的條帶可能是因為DNA模版沒有加進PCR反應(yīng)體系。
我的上樣孔為圖12的泳道7,存在100bp左右的引物多聚體,我的條帶較淺是因為點樣過程中樣品點漂了;由于我的條帶較淺,我的雜質(zhì)也不太明顯。
,每桌可配成master后分裝,這樣可以保證加樣量比較均一和準確,此外,每桌設(shè)置一個陰性對照和一個陽性對照。
,以免樣品被污染使電泳結(jié)果不準確。
,分別是復(fù)性溫度(X℃)、延伸時間(Y s)、和循環(huán)次數(shù)(Z Cycles)。復(fù)性溫度(X℃)由片段復(fù)雜程度決定的,片段復(fù)雜程度越高,復(fù)性溫度越高。延伸時間(Y s)取決于目的基因的長度,目的基因越長,延伸時間越長。對于循環(huán)次數(shù)(Z Cycles),循環(huán)次數(shù)越多DNA濃
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