20xx性別鑒定計(jì)(編輯修改稿)
2025-01-17 00:46 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 、圖12的泳道泳道16加的是DL2000 DNA marker，起指示DNA條帶的作用。DL2000 DNA marker的條帶大小由上至下分別是2kb、1kb、750bp、500bp、250bp、100bp。由于點(diǎn)樣時(shí)間太長，圖11泳道1和圖12的泳道1的DL2000 DNA marker樣品彌散了，因此在圖中沒有顯示出來。
圖11的泳道13，圖12的泳道5是加入的樣品是陰性對照，陰性對照組PCR反應(yīng)體系不加模版，在100bp處有引物多聚體的條帶，對女生的電泳結(jié)果起對照作用。
圖11的泳道12，圖12的泳道15是加入的樣品是陽性對照，在299bp處有條帶，能對男生的電泳結(jié)果起對照作用。
除DL2000 DNA marker的上樣孔外，其他上樣孔在100bp處都有或深或淺的條帶，此處的條帶是引物自身配對所形成的引物多聚體，條帶深可能是因?yàn)椋孩偕蠘恿肯鄬^多；②所配總反映體系時(shí)沒有充分混勻，導(dǎo)致分裝過程中引物含量相對較多；③引物自身形成二聚體的量過多。條帶淺可能是因?yàn)椋孩偕蠘恿肯鄬^少；②所配總反映體系時(shí)沒有充分混勻，導(dǎo)致分裝過程中引物含量相對較少；③引物自身形成二聚體的量過少。
女生的上樣孔為圖11的泳道11122和圖12的泳道114。所有的上樣孔在100bp附近都有條帶，是由于形成了引物多聚體。圖12的泳道114除了在100bp處有條帶之外，在其上方也有較弱的條帶，可能是操作過程中引入了DNA雜質(zhì)而導(dǎo)致樣品不純。
男生的上樣孔為圖11的泳道111121和圖12的泳道113。除泳道16外，其他上樣孔在250bp靠上的位置均存在299bp的條帶，有的條帶深有的條帶淺，可能是由于在取樣過程中用牙簽刮取的口腔上皮細(xì)胞量不同，導(dǎo)致所提取的DNA量不同，PCR擴(kuò)增的片段的量也就不同了，也有可能是上樣過程中點(diǎn)樣量存在差異而導(dǎo)致最終條帶亮度不同。男生的泳道也均會形成100bp大小的引物多聚體。泳道16沒有299bp的條帶可能是因?yàn)镈NA模版沒有加進(jìn)PCR反應(yīng)體系。
我的上樣孔為圖12的泳道7，存在100bp左右的引物多聚體，我的條帶較淺是因?yàn)辄c(diǎn)樣過程中樣品點(diǎn)漂了；由于我的條帶較淺，我的雜質(zhì)也不太明顯。
，每桌可配成master后分裝，這樣可以保證加樣量比較均一和準(zhǔn)確，此外，每桌設(shè)置一個(gè)陰性對照和一個(gè)陽性對照。
，以免樣品被污染使電泳結(jié)果不準(zhǔn)確。
，分別是復(fù)性溫度（X℃）、延伸時(shí)間（Y s）、和循環(huán)次數(shù)（Z Cycles）。復(fù)性溫度（X℃）由片段復(fù)雜程度決定的，片段復(fù)雜程度越高，復(fù)性溫度越高。延伸時(shí)間（Y s）取決于目的基因的長度，目的基因越長，延伸時(shí)間越長。對于循環(huán)次數(shù)（Z Cycles），循環(huán)次數(shù)越多DNA濃
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