【正文】 根據(jù)F因子存在的狀態(tài)不同而將細菌分為： ① F－ 菌株：缺乏 F 因子。iw224。 ③ 殺死Hfr 將不同接合時間的細菌樣品稀釋后接種在含有鏈霉素的完 全培養(yǎng)基上，結(jié)果對鏈霉素敏感的Hfr菌株被殺死，只有F－ 細菌存活。o)。,時間圖距與重組(zh242。 環(huán)狀DNA轉(zhuǎn)化：整體進入整合。nzh224。,基因順序和圖距的計算(j236。,（1）烈性噬菌體的增殖 感染宿主細胞后就進入(j236。進入的DNA片段可以和寄主細胞DNA發(fā)生重組，形成遺傳結(jié)構(gòu)發(fā)生重組的細菌細胞——轉(zhuǎn)導子（transductant） 轉(zhuǎn)導的細菌DNA片段長度大約為一個病毒基因組的大小，細菌染色體比病毒的染色體大得多，細菌染色體斷裂后形成非常多的片段，到底在轉(zhuǎn)導過程中，被包進病毒外殼蛋白的中是那個片斷，完成是隨機的，所以稱作普遍性轉(zhuǎn)導,第五十三頁，共六十八頁。,轉(zhuǎn)導(zhuǎn dǎo)作圖例子,解：上述三個基因在遺傳圖上的順序(sh249。當在紫外光誘導下，可產(chǎn)生裂解途徑，λ染色體從寄主染色體上切離下來時，由于少數(shù)不規(guī)則的交換，產(chǎn)生轉(zhuǎn)導噬菌體λ dgal+（d代表噬菌體缺陷，defective）。,第二類：只有一個λdgal+ 噬菌體感染一個細胞，λdgal+ 與 E.coli gal－通過雙交換（重組），產(chǎn)生λdgal－。jūn)樣品稀釋后接種在含有鏈霉素的完。ng)總結(jié),7.1 細菌(x236。因為用紫外線處理這種轉(zhuǎn)導子可以誘導λ溶解。所以只轉(zhuǎn)移細菌染色體的特定部分。即二基因距離愈近就愈可能被包裝到同一個轉(zhuǎn)導子中并共同轉(zhuǎn)移到同一個受體細胞中，形成一個共轉(zhuǎn)導子a+b+。由于噬菌體外殼蛋白(d224。jūn)的轉(zhuǎn)導作圖,細菌(x236。 兩種可能的排列順序：p－o－q 和 p－q－o。 這種雜合的DNA復制以后，形成一個親代類型（受體）的DNA和一個重組類型的DNA并導致轉(zhuǎn)化細胞的形成與表達。)與轉(zhuǎn)導作圖,7.5.1 細菌的轉(zhuǎn)化(zhuǎnhu224。 選出的lac－ade＋類型即是重組(zh242。,F 因子(yīnzǐ)在細菌染色體上有許多插入位點，而且其插入片段的取向不同而形成不同的Hfr品系。ngch233。,第二十七頁，共六十八頁。 F因子也可以整合到細菌染色體中，像這種帶有一個整合的F 因子的品系則稱為高頻(ɡāo p237。)。接合能傳遞大段的DNA，在細菌的 遺傳重組中是效率最高的。Lac－表型可能是因為lacZ＋或lacY＋基因發(fā)生突變，分別產(chǎn)生了基因型為lacZ－或lacY－的突變型菌株。 2005年報道了第二個菌株E. coli K12 W3110基因組的完整序列。 對擬核成分分析表明，DNA占80％，其余為RNA和蛋白質(zhì)。bāo)伸長而采取二分分裂（binary fission）的方式分開。ili224。,7.1.1 細菌(x236。)的環(huán)狀閉合DNA雙鏈，沒有組蛋白和其他蛋白質(zhì)結(jié)合，也不形成核小體結(jié)構(gòu)。,第九頁，共六十八頁。,E. coli 的全基因組,僅顯示部分基因 注意圖距單位：min,第十三頁，共六十八頁。ngdī)。jūn)的接合,注意(zh249。lǐ)接觸是接合重組的必要條件,第二十三頁，共六十八頁。 ② F＋ 菌株：具有游離的 F 因子。i)基因形成部分二倍體,部分(b249。 ④ 檢查F－ 細菌所含供體基因 將獲得不同接合時間的F－ 細菌樣品都 分別接種在含疊氮化鈉，含噬菌體T1，含乳糖而無葡萄糖，含半乳糖 而無葡萄糖的培養(yǎng)基上，統(tǒng)計各供體基因出現(xiàn)的頻率。 這時可用傳統(tǒng)的重組作用法（recombination mapping） 例如： 根據(jù)中斷雜交試驗（時間單位法），已知lac 和 ade 這兩個基因是緊密連鎖的，在某些品系的雜交中 ade基因是后于lac 進入F－細胞的。nɡ zǔ)率圖距的關系,用時間單位法測得這兩個基因間的距離是1分鐘，用重組法測得的重組值是20％。 片段DNA轉(zhuǎn)化：單鏈進入整合。o)概率定律，兩個片段同時轉(zhuǎn)化的概率是它們的單獨轉(zhuǎn)化的概率的乘積，這種概率是很低的。 su224。nr249。,第五十四頁，共六十八頁。nx249。轉(zhuǎn)導噬菌體約喪失25％的噬菌體基因，卻獲得了整合位置附近的細菌基因gal+ 等。這樣(zh232。選擇在腺甘酸（ade）缺乏的培養(yǎng)基上生長的類型。ir243。這種類型的轉(zhuǎn)導子（λdgal+/gal－ ）是不穩(wěn)定的。nyǒu)一個特定的位置。由于兩個基因（a+b+或b+c+）共同進入一個轉(zhuǎn)導顆粒的機率和它們之間的距離成反比。,普遍性轉(zhuǎn)導(zhuǎn dǎo),轉(zhuǎn)導病毒（Transducing phages），其產(chǎn)生的頻率非常低（10－5～10－7）。,7.5.1 細菌(x236。這兩個基因也是彼此連鎖的。n)重組，形成雜合的DNA分子（heteroduplex DNA）。,7.5 細菌的轉(zhuǎn)化(zhuǎnhu224。 它們表明ade基因已轉(zhuǎn)入細胞。n)雜交作圖,第三十二頁，共六十八頁。 形成(x237。 ⑤ F′ F－ ，可接合，并將受體F－ 轉(zhuǎn)變?yōu)镕′ ，并對所攜帶的宿主基因是高頻重組。n)重組 high frequency of recombination，Hfr,F＋ 與F－ 之間雜交只有F因子的傳遞，而細菌的染色體并不轉(zhuǎn)移，因此盡管F因子轉(zhuǎn)移頻率很高，但兩者染色體之間重組頻率很低，大約是每百萬個細胞中發(fā)生一次重組，因此F＋ 品系稱為 低頻重組（ low frequency recombination，Lfr） 。)，只有象DNA這樣0.1微米的游離分子、培養(yǎng)液和營養(yǎng)物質(zhì)可以通過(tōnggu242。nɡ zǔ)可以通過三種途徑來實現(xiàn)： （1）接合（conjugation）：細菌細胞經(jīng)直接接觸，把一個 細胞（供體）的遺傳物質(zhì)傳遞給另一個細胞（受體）， 從而實現(xiàn)遺傳重組。 如Lac－突變型不能分解乳糖，因此就不能生長在以乳糖為唯一碳源的基本(jīběn)培養(yǎng)基中，而野生型Lac＋細菌都能利用乳糖。,在K12 MG1655菌株中，基因的平均長度為950bp,基因之間的平均間隔約為118bp，但是菌株之間可能會有很大的差別。ng)：1 333 μm長，而其細胞長度約為2 μm 、寬1μm ，必須壓縮最少1 000倍后才能裝入細胞中。 細菌繁殖：雙鏈環(huán)形DNA分子隨著細胞(x236。,本章主要以大腸桿菌（E. coli ）為材料(c225。jūn)的細胞,E. coli 的菌落colony,第四頁，共六十八頁。位于細胞內(nèi)一個稱為“擬核”（nucleoid）的區(qū)域中。,如用DNA酶處理大腸桿菌擬核，各結(jié)構(gòu)域DNA鏈將會斷裂，超螺旋結(jié)構(gòu)受到破壞，變?yōu)樗沙谛徒Y(jié)構(gòu)。,7.2