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分離工程朱家文第六章吸附與制備色譜(留存版)

2024-10-20 20:38上一頁面

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【正文】 m g /L 減少到約 1 .5 m g / L , 并使生產(chǎn)中溶劑損耗減少約三分之二。然而, 色譜 分離不僅與保留參數(shù)有關(guān)。由上式可知,色譜柱的性能(理論板數(shù) n )對(duì)分離的分辨率的大小有直接的影響。 制備型色譜(層析)則是用于分離、富集或純化混合物 中的某一或某些組分,為此需要一定的處理量,一般進(jìn)樣量要比分析型色譜大的多。 吸附與制備色譜 分離工程 變壓吸附 利用固體吸附劑(如分子篩等)對(duì)不同的氣體組分具有一定的吸附選擇性和平衡吸附量隨組分分壓升高而增加的特性,實(shí)行加壓吸附、減壓脫附的操作方法,從而進(jìn)行氣體混合物的分離。荷電量較高的蛋白質(zhì)和離子交換基團(tuán)的結(jié)合較強(qiáng),反之則較弱,因而它們的保留時(shí)間不同而能用層析方法使之分離。 吸附與制備色譜 分離工程 各種蛋白質(zhì)液相色譜 分離原理 色譜 類型 分子大小和形狀 凝膠過濾 凈電荷 離子交換 色譜 等電點(diǎn) 等電聚焦 色譜 疏水性 疏水作用 色譜 反相 色譜 生物活性功能 親和 色譜 抗體 抗原作用 免疫吸附 糖含量 外源凝集素親和 色譜 自由 SH 基團(tuán)含量 共價(jià) 色譜 金屬離子結(jié)合 金屬離子螯合物親和 色譜 其它 羥基磷灰石 色譜 染料親和 色譜 吸附與制備色譜 分離工程 應(yīng)用 實(shí)例: 蛋白質(zhì)的離子交換色譜 離子交換色譜是一種吸附色譜技術(shù),它 的基本原理是基于正負(fù)離子間的相互作用。目前的逆流連續(xù)吸附技術(shù)多采用所謂模擬移動(dòng)床操作方式,即整個(gè)吸附柱分成多段小柱,利用旋轉(zhuǎn)閥之類的液流分配裝置,模擬實(shí)現(xiàn)分段小柱和流動(dòng)相之間的逆流移動(dòng)。 色譜的梯度洗脫法 吸附與制備色譜 分離工程 理論板概念是對(duì)色譜過程的簡化的經(jīng)驗(yàn)型的描述,實(shí)際的色譜過程是非常復(fù)雜的。優(yōu)化的分離條件應(yīng)使所有欲分離的組分對(duì)之間的 R s 均大于1 。 0 2 4 681 .5 .3 .2 .15VRV00VolumekRf顯然,只要色譜載體對(duì)溶質(zhì)有吸附作用, V R 將大于 V 0 。 CMCS吸附與制備色譜 分離工程 Langmuir 吸附等溫式 假定對(duì)于指定的吸附質(zhì)分子 P , 吸附劑上的吸附位點(diǎn) S 是以一對(duì)一的方式進(jìn)行可逆吸附,則吸附平衡關(guān)系可表示為 PSSP ? ???; ]][[][SPPSK ? 式中, K 是吸附平衡常數(shù); [ PS ]= C S , [ P ]= C M , [ S ] + [ PS ]= Q 是單位吸附劑表面積(或單位吸附劑質(zhì)量)上吸附位點(diǎn)的數(shù)量,稱之為吸附劑的吸附容量。研究表明,活性炭可吸附約相當(dāng)與其裝載質(zhì)量 10% 的氯苯,吸附飽和后的活性炭可用水蒸氣脫附后重復(fù)使用。從左圖可以看出,譜圖 a 和 b 中兩種組分分別具有相同的保留值,但分離效果卻大不一樣。)1()1( ?? ??稱為選擇性因子,是一個(gè)很重要的參數(shù)。能有適當(dāng)?shù)姆蛛x度,并要考慮 層析分離過程的規(guī)模、速率和分離成本。變壓吸附一般是常溫操作,循環(huán)周期短,易于實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化。 由于具有多種強(qiáng)或弱、陰離子或陽離子交換凝膠可供選擇 ,流動(dòng)相的電荷以及離子強(qiáng)度也可在廣泛的范圍內(nèi)調(diào)節(jié),離子交換色譜具有廣泛的適用性。在這些色譜過程中,分離介質(zhì)是相應(yīng)的吸附劑(色譜固定相) , 它們 通常是各種具有良好親水性和生物 相容性的凝膠和有機(jī)聚合物多孔介質(zhì) , 并 偶聯(lián) 有不同 的 能 可逆 結(jié)合 蛋白質(zhì) 的 功能 基團(tuán) 。然而,在液固(氣固)接觸的吸附和層析過中,由于難以使固相與流動(dòng)相之間實(shí)現(xiàn)真實(shí)逆流運(yùn)動(dòng),直
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