【正文】 編輯 干擾素α2b生產(chǎn)工藝研究及行業(yè)分析1 前言干擾素是1957年英國(guó)科學(xué)家Isaccs等發(fā)現(xiàn)的。干擾素將要成為21世紀(jì)抗病毒、抗癌癥最為廣泛的藥物之一[3]。如今臨床應(yīng)用的需求量越來(lái)越高，如何使基因工程干擾素大規(guī)模產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)成為了重要課題。 基因工程假單胞桿菌發(fā)酵生產(chǎn)工藝該工藝采用腐生型假單胞桿菌（Pseudomonas putida）作為宿主，發(fā)酵周期短，只有幾個(gè)小時(shí)，無(wú)需變性、復(fù)性過(guò)程，獲得有活性產(chǎn)品。DO為30%，3～4h，OD。 預(yù)處理沉淀（1）加絮凝劑聚乙烯亞胺:2℃～10℃，攪拌45min，對(duì)菌體碎片進(jìn)行絮凝。 陰離子交換層析與濃縮（1）（）平衡樹脂。（3）蛋白質(zhì)含量，純度測(cè)定，分子量。成為基因工程制藥產(chǎn)業(yè)發(fā)展的巨大障礙因素。2006年2009年我國(guó)干擾素產(chǎn)量統(tǒng)計(jì)單位：千克數(shù)據(jù)來(lái)源：中國(guó)市場(chǎng)調(diào)查研究中心 供需平衡分析迄今為止，我國(guó)干擾素生產(chǎn)商已多達(dá)20多家。2006年2009年我國(guó)干擾素需求量統(tǒng)計(jì)單位：千克數(shù)據(jù)來(lái)源：中國(guó)市場(chǎng)調(diào)查研究中心 需求地域結(jié)構(gòu)分析我國(guó)干擾素區(qū)域市場(chǎng)需求分析數(shù)據(jù)來(lái)源：中國(guó)市場(chǎng)調(diào)查研究中心 產(chǎn)品結(jié)構(gòu)分析干擾素按制作方法不同，可分為利用基因工程生產(chǎn)的重組α干擾素和人自然干擾素兩大類。主要表現(xiàn)在以下幾個(gè)方面：（1）同種產(chǎn)品生產(chǎn)廠家過(guò)多，造成市場(chǎng)惡性競(jìng)爭(zhēng)， 嚴(yán)重影響產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展。（2）分裝。（3）洗脫與收集：（）。 干擾素的分離純化工藝過(guò)程 干擾素α2b分離工藝過(guò)程（1）裂解緩沖液：純化水配制，2℃～10℃（）。（3）檢測(cè)：OD值和發(fā)酵液雜菌檢查。重組人干擾素rhuIFN上市產(chǎn)品一覽表 1986 rhuIFNα2a rhuIFNα2b 1990 rhuIFNγ1b 1993 rhuIFNβ1b 2001－2002 PEG化IFN PEGIntron Pegasys 動(dòng)物無(wú)限細(xì)胞系培養(yǎng)生產(chǎn)工藝工藝采用分泌表達(dá)，產(chǎn)量低，成本高，過(guò)程嚴(yán)格。隨著生物技術(shù)的發(fā)展,通過(guò)先進(jìn)的基因工程技術(shù),可以在人體外大規(guī)模生產(chǎn)干擾素。干擾素首先作用于細(xì)胞的干擾素受體，經(jīng)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等一系列生休過(guò)程，激活細(xì)胞基因表達(dá)多種抗病毒蛋白，實(shí)現(xiàn)對(duì)病毒的抑制作用。他們把滅活的流感病毒作用于小雞細(xì)胞，結(jié)果發(fā)現(xiàn)這些細(xì)胞產(chǎn)生了一種可溶性物質(zhì)，這種物質(zhì)能抑制流感病毒，并且能干擾其它病毒的繁殖，因此，他們將這種物質(zhì)稱為“干擾素”。α干擾素是迄今為止治療慢性乙肝的首選抗病毒藥物, 一般肝炎治療藥物的顯效率在20%30%左右。想要推廣干擾素的使用,必須建立高效生產(chǎn)干擾素的體系[4]。其純化過(guò)程淘汰抗體親和層析。（4）檢測(cè)：顯微鏡和LB培養(yǎng)基劃線檢查，控制雜菌。（2）加凝聚劑醋酸鈣溶液:2℃～10℃,攪拌15min，對(duì)菌體碎片、DNA等進(jìn)行沉淀。（2）鹽濃度線性梯度5～50 ms/cm進(jìn)行洗脫，（3）配合SDSPAGE收集干擾素峰。（4）