【正文】 2滴定操作253終點(diǎn)判斷154結(jié)果處理155實(shí)驗(yàn)結(jié)束整理臺(tái)面56操作過(guò)程的熟練程度15試題編號(hào)：ST1207 玉米粉中氮含量的測(cè)定 考核技能點(diǎn)編號(hào)：JN123（1）任務(wù)描述 發(fā)酵過(guò)程中通過(guò)對(duì)原料中總氮的測(cè)定，可以了解發(fā)酵過(guò)程中原料的碳氮比情況，對(duì)于合理安排發(fā)酵過(guò)程具有重要意義。5H20） 硫酸鉀硫酸（）硼酸溶液（20g/L）氫氧化鈉溶液（400g/L）對(duì)于給定的分析樣品和試劑，能夠準(zhǔn)確稱量藥品配制所需試劑，根據(jù)要求完成滴定過(guò)程，準(zhǔn)確終點(diǎn)判斷，記錄結(jié)果，運(yùn)用相應(yīng)的公式進(jìn)行計(jì)算（公式已知），并給出正確結(jié)果。同時(shí)還廣泛地用于抗生素、氨基酸、有機(jī)酸的生產(chǎn)。 TBE緩沖液（pH ）。儀器與器材：722S可見(jiàn)分光光度計(jì)，坐標(biāo)紙（3） 考核時(shí)量考核時(shí)間：90分鐘（4） 評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)目序號(hào)評(píng)分技術(shù)點(diǎn)得分?jǐn)?shù)備注（現(xiàn)場(chǎng)記錄）1曲線的制作252分光光度計(jì)的使用253比色皿的選擇154結(jié)果處理155實(shí)驗(yàn)結(jié)束整理臺(tái)面56操作過(guò)程的熟練程度15試題編號(hào)：ST135茯苓多糖和豬苓多糖水解和鑒定 技能點(diǎn)編號(hào)：JN135（1） 任務(wù)描述茯苓多糖和豬苓多糖，分別是中藥茯苓和豬苓的主要成分。由于三氯醋酸可以沉淀蛋白質(zhì)，所以核蛋白可被三氯醋酸沉淀，再用10％NaCl溶液可以將核酸從沉淀中溶解出來(lái)，而70%左右的乙醇可以沉淀溶液中的核酸，故在10%NaCl溶出液中加入乙醇到適當(dāng)濃度后可使核酸沉淀析出。并在熱水浴中攪拌使固體溶解(如不能全部溶解，再加20%Na2SO3溶液每次數(shù)滴，但加入量以lmL為限度)，置冷處可保存2~3周，如顏色變黃時(shí)，要重新配制。⑦ pH試紙。不同物質(zhì)由于有特定的吸收曲線，故可通過(guò)測(cè)定吸收曲線為物質(zhì)定性分析提供依據(jù)，同時(shí)也可為物質(zhì)的定量分析尋找最大吸收波長(zhǎng)。電泳時(shí)加溴化乙錠（EB），其與DNA結(jié)合形成一種熒光絡(luò)合物，在254~365 nm紫外線照射下可產(chǎn)生熒光，可用于檢測(cè)DNA。⑧甘薯粉儀器與設(shè)備:7支消化管，凱氏定氮儀一套，消化爐，酸式滴定管1支，量筒，移液管，燒杯，滴管。凱氏定氮法是測(cè)定總有機(jī)氮量較為準(zhǔn)確、操作較為簡(jiǎn)單的方法之一。6N NaOH：稱取120gNaOH溶于500ml蒸餾水中。5H2O），溶于蒸餾水中并稀釋到1000ml。器材：電熱恒溫水浴鍋，調(diào)溫電爐，滴定管，抽濾裝置，玻璃棒，燒杯，手套三角瓶，石棉網(wǎng)，滴管，蒸餾水，250ml錐形瓶，100ml容量瓶，玻璃珠。因此發(fā)酵液中還原糖的測(cè)定是對(duì)整個(gè)發(fā)酵情況的重要監(jiān)測(cè)指標(biāo)。每個(gè)大方格邊長(zhǎng)為1mm，則每一大方格的面積為1mm2，每個(gè)小方格的面積為1／400mm2，蓋上蓋玻片后，所以每個(gè)計(jì)數(shù)室(大方格)，每個(gè)小方格的體積為l／4000mm3。水的細(xì)菌學(xué)測(cè)定適用于飲用水、水源水、地表水和各種工礦企業(yè)廢水、生活污水中的細(xì)菌檢驗(yàn)。（3）考核時(shí)量 操作完成時(shí)間：120分鐘（4）評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)目序號(hào)評(píng)分技術(shù)點(diǎn)得分?jǐn)?shù)備注（現(xiàn)場(chǎng)記錄）1稱量藥品102溶解203調(diào)節(jié)pH104過(guò)濾分裝105包扎標(biāo)記56滅菌257保存58實(shí)驗(yàn)結(jié)束整理臺(tái)面59操作過(guò)程的熟練程度10試題編號(hào)：ST1113大腸桿菌的革蘭氏染色 考核技能點(diǎn)編號(hào)：JN112（1）任務(wù)描述革蘭氏染色反應(yīng)是細(xì)菌分類和鑒定的重要性狀。一般培養(yǎng)基的滅菌采用高壓蒸汽滅菌。高氏1號(hào)培養(yǎng)基另外，培養(yǎng)基還應(yīng)具有適宜的pH值、一定的緩沖能力、一定的氧化還原電位及合適的滲透壓。蛋白胨、牛肉膏、NaCl、K2HPO瓊脂、NaNOKCl、MgSOFeSO蔗糖、麥芽糖、木糖、葡萄糖、半乳糖、乳糖、土豆汁、豆芽計(jì)、磷酸銨、5%NaOH溶液、5%HCl溶液。（3）考核時(shí)量 操作完成時(shí)間：120分鐘（4）評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)目序號(hào)評(píng)分技術(shù)點(diǎn)得分?jǐn)?shù)備注（現(xiàn)場(chǎng)記錄）1稱量藥品102溶解203調(diào)節(jié)pH104過(guò)濾分裝105包扎標(biāo)記56滅菌257保存58實(shí)驗(yàn)結(jié)束整理臺(tái)面59操作過(guò)程的熟練程度10試題編號(hào)：ST1105酵母培養(yǎng)基的配制與滅菌 考核技能點(diǎn)編號(hào)：JN111 （1）任務(wù)描述培養(yǎng)基是供微生物生長(zhǎng)、繁殖、代謝的混合養(yǎng)料。一般培養(yǎng)基的滅菌采用高壓蒸汽滅菌。由于微生物具有不同的營(yíng)養(yǎng)類型，對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的要求也各不相同，加之實(shí)驗(yàn)和研究的目的不同，所以培養(yǎng)基的種類很多，使用的原料也各有差異，但從營(yíng)養(yǎng)角度分析，培養(yǎng)基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)素以及水分等。成績(jī)?cè)u(píng)定共分為四等：表31 專業(yè)技能考核成績(jī)?cè)u(píng)定等級(jí)序號(hào)分?jǐn)?shù)范圍成績(jī)1總分＜60分不及格260分≤總分＜75分及格375分≤總分＜85分良好4總分≥85分優(yōu)秀成績(jī)發(fā)布由湖南省教育廳在網(wǎng)上統(tǒng)一向社會(huì)公布抽查學(xué)校的平均成績(jī)和合格率及排名等，考核不公布學(xué)生個(gè)人成績(jī)。. . . . .2014年湖南省高職院校學(xué)生專業(yè)技能抽查考試題庫(kù)生物技術(shù)及應(yīng)用專業(yè) 2014年11月一、 適應(yīng)專業(yè)與對(duì)象1．適應(yīng)專業(yè)本標(biāo)準(zhǔn)適用于湖南省高等職業(yè)院校目前開(kāi)設(shè)的生物技術(shù)及應(yīng)用專業(yè)。三、題庫(kù)概述生物技術(shù)及應(yīng)用專業(yè)技能抽查考試的內(nèi)容集中為“專業(yè)技能基礎(chǔ)模塊”和“專業(yè)技能方向模塊”兩大模塊。另外，培養(yǎng)基還應(yīng)具有適宜的pH值、一定的緩沖能力、一定的氧化還原電位及合適的滲透壓。（2）實(shí)施條件試劑。由于微生物具有不同的營(yíng)養(yǎng)類型，對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的要求也各不相同，加之實(shí)驗(yàn)和研究的目的不同，所以培養(yǎng)基的種類很多，使用的原料也各有差異，但從營(yíng)養(yǎng)角度分析，培養(yǎng)基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)素以及水分等。材料。 任何一種培養(yǎng)基一經(jīng)制成就應(yīng)及時(shí)徹底滅菌，以備純培養(yǎng)用。器材:天平、稱量紙、牛角匙、精密pH試紙、量筒、刻度搪瓷杯、試管、三角瓶、漏斗、分裝架、移液管及移液管筒、培養(yǎng)皿及培養(yǎng)皿盒、玻璃棒、燒杯、試管架、鐵絲筐、剪刀、酒精燈、棉花、線繩、牛皮紙或報(bào)紙、紗布、乳膠管、電爐、滅菌鍋、干燥箱。（2）實(shí)施條件試劑。革蘭氏染色法不僅能觀察到細(xì)菌的形態(tài)，而且還可將所有細(xì)菌區(qū)分為兩大類：染色反應(yīng)呈藍(lán)紫色的稱為革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌，用G 表示；染色反應(yīng)呈紅色（復(fù)染顏色）的稱為革蘭氏陰性細(xì)菌，用G表示。是常規(guī)監(jiān)測(cè)項(xiàng)目，特別是細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定、總大腸菌群和糞大腸菌的測(cè)定，是必測(cè)項(xiàng)目，要求要上報(bào)的。使用血球計(jì)數(shù)板直接計(jì)數(shù)時(shí)，先要測(cè)定每個(gè)小方格(或中方格)中微生物的數(shù)量，再換算成每毫升菌液(或每克樣品)中微生物細(xì)胞的數(shù)量。對(duì)于給定的發(fā)酵原料玉米粉，要求考生能夠準(zhǔn)確分析其中的還原糖含量，采用費(fèi)林試劑法測(cè)得正確結(jié)果；正確把握分析過(guò)程中的各項(xiàng)操作；能夠根據(jù)給定的處理方法處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)；最后給出實(shí)驗(yàn)報(bào)告和實(shí)驗(yàn)結(jié)果。（3）考核時(shí)量 操作完成時(shí)間：120分鐘（4）評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)目序號(hào)評(píng)分技術(shù)點(diǎn)得分?jǐn)?shù)備注（現(xiàn)場(chǎng)記錄）1移液管移液過(guò)程252滴定操作253終點(diǎn)判斷154結(jié)果處理155實(shí)驗(yàn)結(jié)束整理臺(tái)面56操作過(guò)程的熟練程度15試題編號(hào)：ST1204玉米粉中總糖的測(cè)定 考核技能點(diǎn)編號(hào)：JN122（1）任務(wù)描述發(fā)酵過(guò)程中通過(guò)對(duì)原料總糖的測(cè)定，可以了解發(fā)酵過(guò)程中原料的初始配料、定額消耗等情況，對(duì)于合理安排發(fā)酵過(guò)程具有重要意義。堿性酒石酸銅乙液：稱取50g酒石酸鉀鈉及75g NaOH，溶于蒸餾水中，再加入4g亞鐵氰化鉀［K4Fe（CN）6］，完全溶解后，用蒸餾水稀釋到1000ml，貯存于具橡皮塞玻璃瓶中。%酚酞指示劑。對(duì)給定的發(fā)酵原料木薯粉，要求考生能夠準(zhǔn)確分析其中的總氮含量，采用凱氏定氮法測(cè)得正確結(jié)果；正確把握分析過(guò)程中的各項(xiàng)操作；能夠根據(jù)給定的處理方法處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)；最后給出實(shí)驗(yàn)報(bào)告和實(shí)驗(yàn)結(jié)果。（3）考核時(shí)量 操作完成時(shí)間：120分鐘（4）評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)目序號(hào)評(píng)分技術(shù)點(diǎn)得分?jǐn)?shù)備注（現(xiàn)場(chǎng)記錄）1樣品消化過(guò)程202定氮裝置的檢查與洗滌103堿化蒸餾204樣品滴定205結(jié)果處理106實(shí)驗(yàn)結(jié)束整理臺(tái)面57操作過(guò)程的熟練程度15試題編號(hào)：ST1210白酒中總酸含量測(cè)定 考核技能點(diǎn)編號(hào)：JN124（1）任務(wù)描述白酒中的總酸用標(biāo)準(zhǔn)堿溶液直接滴定，根據(jù)所消耗的堿量推算出白酒中總酸的含量。設(shè)備與器材：離心機(jī)，分光光度計(jì)，恒溫水浴鍋，試管架，秒表；試管，移液管，燒杯，離心管。如有必要可從凝膠中回收DNA片段，用于分子克隆或探針標(biāo)記等操作。掌握可見(jiàn)分光光度計(jì)的使用方法，熟悉吸收曲線繪制的原理、操作及意義。⑧ 班氏試劑：取硫酸銅（CuSO 4 5H2O) mL水中，另以檸檬酸鈉173 g，無(wú)水碳酸鈉l00 g溶于700 mL水中。⑨二苯胺試劑：取1g純的二苯胺溶于100mL冰醋酸(AR)中，放在棕色瓶中，此試劑也須臨時(shí)配制。儀器與器材：水浴鍋，試管，滴管，移液管（3） 考核時(shí)量考核時(shí)間：90分鐘（4） 評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)目序號(hào)評(píng)分技術(shù)點(diǎn)得分?jǐn)?shù)備注（現(xiàn)場(chǎng)記錄）1移液管的操作202滴定管的使用253PH試紙的使用154結(jié)果處理155實(shí)驗(yàn)結(jié)束整理臺(tái)面106操作過(guò)程的熟練程度15試題編號(hào)：ST136肝組織中核酸的分離與鑒定 技能點(diǎn)編號(hào)：JN136（1） 任務(wù)描述組織細(xì)胞中的核糖核酸(RNA)與脫氧核糖核酸(DNA)大部分與蛋白質(zhì)結(jié)合而形成核蛋白。將血細(xì)胞用10mL蒸餾水溶解，破細(xì)胞后，3000rpm離心10min，取上清，再利用蒸餾水稀釋到415nm處的消光值為1左右，放入冰箱備用。（2） 實(shí)施條件試劑與材料：5 TBE緩沖液（）：54 g Tris堿， g硼酸，20 mL mol／L EDTA (pH )，加水至1 L。特別是釀酒酵母利用淀粉原料發(fā)酵時(shí)，淀粉液化后的糖化作用是必不可少的工序，因?yàn)榇蠖鄶?shù)釀酒酵母只能利用可發(fā)酵的糖進(jìn)行酒精發(fā)酵。（2）實(shí)施條件試劑：①5g/L酚酞指示劑（考生自配）②（考生自配）儀器：①50ml堿式滴定管②50ml移液管③250ml三角瓶④50ml量杯（3）考核時(shí)量 操作完成時(shí)間：120分鐘（4）評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)目序號(hào)評(píng)分技術(shù)點(diǎn)得分?jǐn)?shù)備注（現(xiàn)場(chǎng)記錄）1天平稱量過(guò)程152移液管移液過(guò)程203滴定操作224終點(diǎn)判斷155結(jié)果處理106實(shí)驗(yàn)結(jié)束整理臺(tái)面57操作過(guò)程的熟練程度15 試題編號(hào)：ST1210檸檬酸酸度的測(cè)定 考核技能點(diǎn)編號(hào)：JN124（1）任務(wù)描述檸檬酸的酸度可用堿液直接滴定，根據(jù)所消耗的堿量推算出檸檬酸的酸度。硫酸銅（CuSO4器材：電熱恒溫水浴鍋，調(diào)溫電爐，滴定管，抽濾裝置，玻璃棒，燒杯，手套三角瓶，石棉網(wǎng)，滴管，蒸餾水，250ml錐形瓶，100ml容量瓶，玻璃珠。6mol/LHCl：取250ml濃HCl（35%～38%）用蒸餾水稀釋到500ml。（2）實(shí)施條件試劑：堿性酒石酸銅甲液：稱取15g硫酸銅（CuSO45H2O），溶于蒸餾水中并稀釋到1000ml。 目鏡測(cè)微尺是一塊圓形玻片，在玻片中央把5mm長(zhǎng)度刻成50等分，或把10 mm長(zhǎng)度刻成100等分。我國(guó)生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，生活飲用水的大腸菌群總數(shù)l L不得超過(guò)3個(gè)。革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌的細(xì)胞壁主要是由肽聚糖形成的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)組成的，在染色過(guò)程中，當(dāng)用乙醇處理時(shí)，由于脫水而引起網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)中的孔徑變小，通透性降低，使結(jié)晶紫碘復(fù)合物被保留在細(xì)胞內(nèi)而不易脫色，因此，呈現(xiàn)藍(lán)紫色；革蘭氏陰性細(xì)菌的細(xì)胞壁中肽聚糖含量低，而脂類物質(zhì)含量高，當(dāng)用乙醇處理時(shí)，脂類物質(zhì)溶解，細(xì)胞壁的通透性增加，使結(jié)晶紫碘復(fù)合物易被乙醇抽出而脫色，然后又被染上了復(fù)染液（番紅）的顏色，因此呈現(xiàn)紅色。材料。由于微生物具有不同的營(yíng)養(yǎng)類型，對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的要求也各不相同，加之實(shí)驗(yàn)和研究的目的不同，所以培養(yǎng)基的種類很多，使用的原料也各有差異，但從營(yíng)養(yǎng)角度分析，培養(yǎng)基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)素以及水分等。（2）實(shí)施條件試劑。器材:天平、稱量紙、牛角匙、精密pH試紙、量筒、刻度搪瓷杯、試管、三角瓶、漏斗、分裝架、移液管及移液管筒、培養(yǎng)皿及培養(yǎng)皿盒、玻璃棒、燒杯、試管架、鐵絲筐、剪刀、酒精燈、棉花、線繩、牛皮紙或報(bào)紙、紗布、乳膠管、電爐、滅菌鍋、干燥箱。 任何一種培養(yǎng)基一經(jīng)制成就應(yīng)及時(shí)徹底滅菌，以備純培養(yǎng)用。材料。加瓊脂制成的培養(yǎng)基在98～100℃下融化，于45℃以下凝固。“專業(yè)技能基礎(chǔ)模塊”主要測(cè)試學(xué)生根據(jù)給定的工作環(huán)境進(jìn)行微生物的無(wú)菌操作的技能；測(cè)試學(xué)生依據(jù)給定的儀器和藥品等條件，完成相應(yīng)的生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)的技能；測(cè)試學(xué)生根據(jù)已知的操作，充分運(yùn)用分析與檢測(cè)的知識(shí)來(lái)分析物質(zhì)理化數(shù)據(jù)