【正文】 群、菌落在瓊脂介面散布、瓊脂干燥、可能存在的厭氧菌等都是潛在的不利因素。在有些情況下，從試驗(yàn)樣品中取下微生物的方法也會(huì)分解這種聚集。如果存在殺滅微牛物或抑制微生物的物質(zhì)， 適用。一般來(lái)說(shuō)，檢測(cè)的數(shù)據(jù)量下限要超過(guò)100個(gè)菌落形成單位(Bfu)。 如果嫁接的微生物數(shù)量與回收的數(shù)量差異不大，或者，細(xì)菌抑制試驗(yàn)中沒(méi)有發(fā)現(xiàn)微生物的生長(zhǎng)，則應(yīng)對(duì)生物負(fù)載測(cè)定方法予以重新審議。 在某些產(chǎn)品上，進(jìn)行重復(fù)處理后有必要確定產(chǎn)品上是否還存有存活微生物。 51 0 100 每一產(chǎn)品用一定量的微生物懸液進(jìn)行接種并可以在層流條件下進(jìn)行干燥(如果對(duì)產(chǎn)品適用)。 使經(jīng)接種的產(chǎn)品在經(jīng)受上述選定的洗脫技術(shù)，洗脫的平均芽抱數(shù)為35，其范圍是在2545之間。，并測(cè)定出存活計(jì)數(shù)。 范圍= 78 % to 95 %運(yùn)用一種瓊脂覆蓋的理想情況也包括在了本計(jì)算中。 0瓊脂覆蓋 55 從產(chǎn)品上回收的微生物數(shù)與產(chǎn)品上實(shí)際的微生物數(shù)間的精確關(guān)系是永遠(yuǎn)無(wú)法驗(yàn)證的。 確定出產(chǎn)品上微生物的估計(jì)值后，再將該技術(shù)應(yīng)用于同一產(chǎn)品來(lái)確定是否還有微生物被洗下。所用微生物的數(shù)量應(yīng)接近100。 檢測(cè)微生物的其他方法估計(jì)生物負(fù)載時(shí)還可使用菌落計(jì)數(shù)以外的其他方法。濾膜和洗提液應(yīng)相容。 如果存在殺滅微生物或抑制微生物的物質(zhì)。根據(jù)具體的應(yīng)用 ，% %之間。 0,067 M 磷酸phosphate0,43 %氫氧化鈉sodium Bhloride0,1% 蛋白胨peptone 、稀釋液和轉(zhuǎn)送培養(yǎng)基，洗脫液可用于從產(chǎn)品上取下微生物。 設(shè)備結(jié)構(gòu)和內(nèi)腔大小可能限制從表面徹底取下生物體所需的力的大小。 應(yīng)盡力盡快將試驗(yàn)樣品移至試驗(yàn)室。污染源也會(huì)影響到附著程度。2） 用肉眼直接計(jì)數(shù)，然后用510倍放大鏡檢查，有否遺漏。注意事項(xiàng)：1）在無(wú)菌操作臺(tái)上做試驗(yàn)，防止環(huán)境對(duì)樣品的再次污染，采取一切措施防止人為對(duì)樣本的污染。生物膜可以在數(shù)分鐘年形成，而且可能在與組織附和或已經(jīng)使用過(guò)的醫(yī)療器械上生長(zhǎng)出大得多的生物膜。 ，所以可能會(huì)生成微生物濃度較低的懸浮液。 含有可吸收取樣材料的棉拭子通常被固定于桿或把手上。 當(dāng)用液體從固體表面取下微生物時(shí)，可考慮使用表面活化劑。 通用林格氏溶液Ringer 由于該方法的效率普遍較低，所以只有在其他方法都不適用的情況下使用接觸板和玻璃片一般只適用于平的或至少是規(guī)則的表面。 如果洗脫液中有殺滅微生物或抑制微生物的物質(zhì)，這可以通過(guò)稀釋將其濃度降至無(wú)效，或通過(guò)過(guò)濾或化學(xué)中和法來(lái)去除。 由于可澆倒的洗提液數(shù)量有限，所以，本方法可能會(huì)對(duì)微生物低濃度懸浮液不具備所要求的靈敏度。 釋出物對(duì)生物負(fù)載估計(jì)不利影響的檢驗(yàn) 檢驗(yàn)的目的是研究從產(chǎn)品向懸液中釋出的物質(zhì)對(duì)脆弱微生物的影響，這里列舉了一個(gè)方法?？赡苡斜匾M(jìn)稀釋物、中和或者過(guò)濾來(lái)減少阻止活動(dòng)，或者消除抑制性物質(zhì)。這可以通過(guò)下列方法得到:a) 用熔化的回收培養(yǎng)基涂在產(chǎn)品表面上，等到培養(yǎng)基變硬，然后使產(chǎn)品作用于規(guī)定的培養(yǎng)條件下對(duì) 培養(yǎng)形成的菌落計(jì)數(shù)。平行計(jì)數(shù) 1 64 70 =1,15 如果樣品是經(jīng)環(huán)氧乙烷滅菌，則應(yīng)經(jīng)過(guò)充分通風(fēng)來(lái)降低殘留物的影響。 m L該稀釋?xiě)乙?，并在層流下進(jìn)行干燥。作為接種用微生物應(yīng)能抵抗干燥，這一點(diǎn)十分重要，因此經(jīng)常使用需氧菌芽抱。 64 0平均菌落數(shù) 2 但是應(yīng)注意的是，本方法不是很精確。此方法通常是用于測(cè)定生物負(fù)載方法之一。實(shí)驗(yàn)中，產(chǎn)品與少量微生物一同引進(jìn)到培養(yǎng)基，并與常規(guī)生物負(fù)載測(cè)定所需條件相同情況下進(jìn)行培養(yǎng)。 對(duì)于自動(dòng)計(jì)數(shù)方法，體系操作應(yīng)符合ISO/IEB 17025要求。但是有些類(lèi)型的膜濾器可以吸收或釋放抑制微生物生