【正文】
h organ new varieties of sweet potato in hebei province cultivated and prehensive processing using provides the basis, and drive the hebei industry economy.This topic research the spectrophotometry detection conditions and stability study of diosgenin, through paring three show color agent, and finally determined that 5% vanillin glacial acetic acid solutionhigh chlorine acid solution as colourdisplay reagent, show color stability conditions for join mL high chlorine acid, in 80℃ water under 20 min, and let rest for 30 min. Finally the measurement of diosgenin features absorption wavelength in the 540 nm.This subject research sweet potato based and diosgenin at the swollen change relations and correlation. Starch content increase obviously, diosgenin the increase of the content of the more obvious trend. diosgenin content of root with the extension of the growth cycle is obviously increased, and diosgenin of potato skins only expands the period in the beginning and end of the growth trend obvious, and diosgenin of root was obviously higher than potato skins.This topic research the soxhlet method and utrasonicassisted extraction method. Two methods in parison, utrasonicassisted extraction method, have higher extraction yield, extracting time short, simple operation etc, the third time extraction yield is %. By single factor and orthogonal test won the ultrasonic extraction auxiliary the optimal conditions: acid concentration 1 mol/L, acid solution temperature of 100℃, acid solution time 3 h, pH value for 5,solvent extraction time 1 h. Best extraction conditions of secondary extraction yield to %.Silica gel purification diosgenin coarse extraction solvent the best elution liquid for petroleum ether:ethyl acetate= 1:1, purification of sample purification and could reach %. RPHPLC method to detect the sweet potato diosgenin best detection conditions for: mobile phase: acetonitrile: methanol: water=8:1:1。甘薯中的主要功能性營養(yǎng)成分包括膳食纖維、多糖、糖蛋白、多酚類物質(zhì)、DHEA等。經(jīng)過研究表明,紫甘薯還具有抗突變、預(yù)防高血壓和抗氧化等作用[21,22]。由于飲食和生活習(xí)慣的不同,癌癥,如結(jié)腸癌、乳腺癌、前列腺癌等疾病在西方國家比較常見,而薯蕷皂甙元對這些疾病都有一定的抵抗作用[41]。作者分析預(yù)發(fā)酵之所以能提高薯蕷皂甙元的產(chǎn)量,主要?dú)w因于盾葉薯蕷中的糖苷酶促進(jìn)甾體皂甙發(fā)生酶解作用,從而提高薯蕷皂甙元的積累;而較長的發(fā)酵時間會使甾體皂甙水解成菝葜皂甙元酮和表菝葜皂甙元酮。結(jié)果得到優(yōu)化后的萃取條件為常溫,1:14料液比 (g/mL,黃姜粉末:表面活性劑水溶液) 、103 mol/L十二烷基硫酸鈉、 kHz超聲頻率、萃取時間40 min,%。石艷霞[68]等將薯蕷皂甙元皂甙元粗提液濃縮至一定體積,重結(jié)晶后過濾,105℃干燥,冷卻,稱重,并計(jì)算其含量。高效液相色譜法(HPLC):本法適合于高沸點(diǎn)、大分子、強(qiáng)極性和熱穩(wěn)定性差的化合物的檢測,因此被較多應(yīng)用于甾體化合物的檢測分析。為河北省甘薯的綜合利用和功能成分的開發(fā)提供了參考,帶動地方產(chǎn)業(yè)經(jīng)濟(jì),提高綜合利用價值。圖21 高氯酸用量對分光光度檢測穩(wěn)定性的影響 從圖21中可以看出高氯酸用量對顯色體系的穩(wěn)定性影響不大,當(dāng)顯色劑和薯蕷皂甙元結(jié)合后,顯色結(jié)構(gòu)相對穩(wěn)定,所以加入較多的高氯酸也不會影響顯色效果,因此, mL的高氯酸進(jìn)行添加,以減少藥品的消耗。圖26 分光光度法全波長掃描薯蕷皂甙元標(biāo)準(zhǔn)品結(jié)果 重復(fù)性試驗(yàn)取同一批甘薯薯蕷皂甙元樣品溶液6份。 樣品前處理 將采集來三個品種的新鮮甘薯各個器官分別收集,打漿;將塊根去皮,收集甘薯皮,然后將塊根打漿。將樣品中的蛋白質(zhì)進(jìn)行催化加熱分解,產(chǎn)生的氨與硫酸結(jié)合生成硫酸銨。甘薯中灰分含量按如下公式計(jì)算:灰分(%) (38)式中:m1—恒重后坩堝的質(zhì)量,單位為(g);m2—灰化后樣品與坩堝質(zhì)量,單位為(g);W—樣品的質(zhì)量,單位為(g)。結(jié)果如表33。溶劑萃取法的實(shí)質(zhì)就是固液萃取,一般情況下無化學(xué)反應(yīng)發(fā)生。如方程43和44.2測定最優(yōu)條件下甘薯中薯蕷皂甙元的提取率。由于試驗(yàn)的目的是尋求較好的水平組合,因此暫且不考慮各因素間的交互作用。 (41)在氧氣存在的情況下,過羥基按如下42方程所形成。甘薯中總薯蕷皂甙元含量的確定采用極限提取的方法,即稱取5g甘薯粉(鮮樣),溶于50 mol/L的鹽酸溶液中,在100℃下水浴4 h,過濾并用去離子水沖洗殘?jiān)林行?,殘?jiān)?0℃干燥2 h,用50 mL石油醚提取8 h,過濾,定容,待紫外檢測。表31 甘薯膨大期各個生長時間的薯蕷皂甙元相關(guān)性分析相關(guān)性 7天14天28天35天42天49天7天1.354.168.04814天 1.793.967**.899*.945**塊根28天 1.918**.975**.948**35天 1.981**.996**42天 1.992**49天 17天1.984**.524.834*.712.850*薯皮14天 1.387.736.816*.918**28天 1.898*.00935天 1.221.43042天 1.967**49天 1注:*,** 甘薯中基礎(chǔ)成分在膨大期的變化規(guī)律由于薯蕷皂甙元主要存在于甘薯塊根中,因此為了研究甘薯塊根在膨大期各物質(zhì)變化與薯蕷皂甙元的關(guān)系,在甘薯膨大期的第14天、28天、42天,測定了3個品種甘薯的基礎(chǔ)物質(zhì)成分的含量。 甘薯中灰分的測定方法,對樣品的灰分進(jìn)行測定。樣品先蛋白質(zhì)后,然后酸水解蔗糖成還原糖,再按還原糖測定。 鹽酸,分析純天津市大茂化學(xué)試劑廠乙醇,分析純北京化學(xué)試劑公司乙醚,分析純天津大茂化學(xué)試劑廠磷酸,分析純天津市標(biāo)準(zhǔn)科技有限公司氫氧化鉀,分析純天津市大陸化學(xué)試劑廠氫氧化鈉,分析純天津市大陸化學(xué)試劑廠濃硫酸,分析純新光化工試劑廠硫酸銅,分析純天津市凱通化學(xué)試劑有限公司硫酸鉀,分析純天津市百世化工有限公司硼酸,分析純天津市北方化玻購銷中心溴甲酚綠,指示劑中國上海甲基紅,指示劑北京紅星生化廠氯化鉀,分析純天津市大陸化學(xué)試劑廠冰醋酸,分析純天津市大茂化學(xué)試劑廠淀粉酶諾維信酶制劑公司無水乙醇,分析純天津市大陸化學(xué)試劑廠碘,分析純北京紅星生化廠石油醚,分析純天津大茂化學(xué)試劑廠酒石酸鉀鈉,分析純天津市大陸化學(xué)試劑廠亞鐵氰化鉀,分析純天津市大陸化學(xué)試劑廠葡萄糖,分析純天津市大陸化學(xué)試劑廠鹽酸,分析純 天津市大茂化學(xué)試劑廠乙腈,色譜純天津康科德科技有限公司甲醇,色譜純天津康科德科技有限公司 試驗(yàn)所用儀器設(shè)備1011型電熱鼓風(fēng)干燥箱 天津華北試驗(yàn)電爐廠玻璃儀器氣流烘干器河南豫華儀器有限公司JA 1003型電子天平( g)上海精科天平JJ 1000型電子天平( g)美國雙杰兄弟(集團(tuán))有限公司DK981型電熱恒溫水浴鍋河南省鞏義市英峪予華儀器廠SP756 p紫外可見分光光度計(jì) 上海光譜儀器有限公司KDY9820凱氏定氮儀 北京市通潤源機(jī)電技術(shù)有限責(zé)任公司KXL1010型控溫消煮爐 北京市通潤源機(jī)電技術(shù)有限責(zé)任公司北京醫(yī)用離心機(jī)廠DELTA 320型pH計(jì)梅特勒托利多儀器有限公司北京醫(yī)用離心機(jī)廠SHZD(Ⅲ)循環(huán)水式真空泵鞏義市英峪予華儀器廠天津市泰斯特儀器有限公司天津市泰斯特儀器有限公司Re201旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器河南省鞏義市英峪予華儀器廠201升降恒溫水浴鍋河南省鞏義市英峪予華儀器廠SHZD(Ⅲ)型予華牌循環(huán)水式真空泵河南省鞏義市英峪予華儀器廠超聲波昆山市超聲波儀器有限公司高效液相色譜儀上海島津儀器有限公司 試驗(yàn)內(nèi)容及方法甘薯膨大期即為甘薯由萌動生長轉(zhuǎn)為薯塊成熟直至收獲的時期。 香草醛冰醋酸高氯酸作為顯色劑的分光光度檢測結(jié)果 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制結(jié)果其回歸方程為:y=+,線性相關(guān)系數(shù)R2=。 試驗(yàn)結(jié)果及分析 不同顯色方法對甘薯薯蕷皂甙元檢測影響的試驗(yàn)結(jié)果,用濃硫酸顯色,干擾大,且不穩(wěn)定;用高氯酸作為顯色劑雖然顯色效果較穩(wěn)定,但由于甘薯中薯蕷皂甙元的含量相對較低,而當(dāng)薯蕷皂甙元含量較低時,用高氯酸檢測效果不明顯;香草醛高氯酸作為顯色劑,靈敏度較高,顯色穩(wěn)定性較好,而且香草醛高氯酸是薯蕷皂甙元常用的顯色劑,因?yàn)槭硎氃磉霸贑3位有羥基,△5(6)有雙鍵,當(dāng)提取樣品與其反應(yīng)后,C3位羥基脫水,形成共軛體系,因而吸收位置紅移程度很大,在540 nm處有最大吸收峰。而到目前為止,沒有研究報(bào)道關(guān)于甘薯中薯蕷皂甙元的提取和檢測的內(nèi)容,有試驗(yàn)研究報(bào)道,甘薯中發(fā)現(xiàn)存在DHEA,而薯蕷皂甙元則是DHEA的前體物質(zhì),因此對甘薯中薯蕷皂甙元的試驗(yàn)研究,在有利于綜合開發(fā)利用甘薯的同時,為甘薯中DHEA的提取也提供了一定的理論依據(jù)。氣相色譜法:此法以氣體作為流動相,其特點(diǎn)是分利率高速度快,樣品用量較少和檢測限低等。舒明勇[66]通過正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),得到薯蕷皂甙元最佳的提取條件:以粉碎粒度60目、萃取時間10 min、萃取溫度100℃、固液比1/20,之后采用酸性氧化鋁柱對薯蕷皂甙元進(jìn)行梯度洗脫純化,用洗脫溶劑為苯、石油醚、乙酸乙酯,之后采用HPLC檢測,%,%。陳圓華[58]等采用超聲波對黃姜中的薯蕷皂甙元進(jìn)行提取優(yōu)化。此法比傳統(tǒng)提取方法產(chǎn)率提高68%。它以薯蕷皂甙的形式廣泛存在于薯蕷屬、鞘姜屬和葫蘆巴屬植物中。程何偉[19]等采用無機(jī)陶瓷膜超濾設(shè)備得出甘薯生產(chǎn)淀粉廢水中糖蛋白的最佳提取工藝下的提取率為73%。這些的營養(yǎng)和活性物質(zhì),能有效解決各國普遍存在的營養(yǎng)和食品安全等問題[8]。RPHPLC法定性定量檢測純化后的薯蕷皂甙元,并確定了最佳檢測條件,流動相:乙腈:甲醇:水=8:1:1;流速: mL/min;進(jìn)樣量:20 μL;檢測波長:210 nm,檢出時間為:15 min左右。(請?jiān)谝陨戏娇騼?nèi)打“√”)除了文中特別加以標(biāo)注引用的內(nèi)容外,本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫的成果作品。本人授權(quán)河北科技大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索,可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。通過單因素和正交試驗(yàn)獲得了超聲波輔助提取的最優(yōu)條件:酸濃度1 mol/L、酸解溫度100℃、酸解時間3 h、pH值為溶劑提取時間1 h。根據(jù)目前市場對甘薯不同品種的需求,全國各地把培育優(yōu)質(zhì)專用多樣化甘薯最為目標(biāo)。糖蛋白顧名思義,由多糖和蛋白質(zhì)共同組成的一種復(fù)合產(chǎn)物,作為甘薯中的一種功能性成分,它對呼吸道、消化道、漿膜腔和關(guān)節(jié)