【正文】 功，因此在許多重要禾谷類作物中的應用受到限制。et另外，考慮到轉(zhuǎn)基因作物及其產(chǎn)品的安全性問題，培育具有安全選擇標記或無選擇標記的轉(zhuǎn)基因植物也將成為植物基因工程研究的熱點之一。[M].上海:華東理工大學出版社,2005,365．TrendsRevplants．EMBOJ，l99l，10：697704．王景雪，孫毅．農(nóng)桿菌介導的植物基因轉(zhuǎn)化研究進展．生物技術(shù)報，1999(15)：713．ofTDNAAgrobacterium:124126.et1999），無疑對實現(xiàn)禾谷類作物中導入大片段DNA并進行遺傳改良具有重要意義（李衛(wèi)等2000）。 大多數(shù)單子葉植物的轉(zhuǎn)化受其基因型、外植體來源、組織培養(yǎng)難易程度等因素的影響，比較難，以至在重要禾谷類作物中的應用受到一定的限制，與雙子葉植物相比，農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化單子葉植物還存在較大差距，其中煙草、葡萄等雙子葉植物的轉(zhuǎn)化效率高達60%以上，而單子葉植物中轉(zhuǎn)化效率較高的禾本科植物還不到30%(蔣玉寶等2005；孟芮等2006)。streak它是雙子葉植物較為常用也較為簡單有效的方法。此外，VirD2作為一個導向蛋白，可以指導整個TDNA復合體從農(nóng)桿菌進入到植物細胞核。VirA蛋白是一種結(jié)合在膜上的化學受體蛋白，可直接對植物產(chǎn)生的酚類化合物感應，其感應部位可能位于胞質(zhì)區(qū)域。其侵染植物是將其Ri質(zhì)粒上的TDNA插入到宿主植物基因組中，這一點與Ti質(zhì)粒相類似。bp(CAGGAATATAT)和4 目前，應用于植物轉(zhuǎn)基因較多的方法有基因槍轟擊法和農(nóng)桿菌介導法。根癌農(nóng)桿菌依據(jù)Ti質(zhì)粒誘導的植物細胞產(chǎn)生的冠癭堿的種類不同，根癌農(nóng)桿菌可分為4種類型：章魚堿型（Octopine）、胭脂堿型（Nopaline）、農(nóng)桿堿型（Agropine）和琥珀堿型（Succinamopine）。(ori區(qū))：該區(qū)段調(diào)控Ti質(zhì)粒的自我復制。vir基因表達的產(chǎn)物作用于TDNA產(chǎn)生TDNA鏈，進而轉(zhuǎn)化形成TDNA復合體，隨后在植物及細菌蛋白的共同作用下被攝入細胞核內(nèi)。②將整塊愈傷組織浸泡于菌液中搖動培養(yǎng)。1996）[1013]。這些性狀的改造就需要一個能將大片段DNA導入植物細胞并穩(wěn)定表達的轉(zhuǎn)化體系。1999），甲基化等原因造成基因表達失活（Kumpalta文HellensGelvinMayerhofer．農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學報，2001，19(1)：4548．葉興國，Shirleysato，徐惠君等．小麥農(nóng)桿菌介導轉(zhuǎn)基因植株的穩(wěn)定獲得[J]．中國農(nóng)業(yè)科學，2001,34(5)：469474.Z，NawrathandP39。張翼，路曦結(jié)，韓文兵等.alet存在問題與展望4通常使用的是第一種方式。VirD基因編碼的兩個產(chǎn)物VirD1和VirD2直接參與加工過程．VirD1蛋白是一種拓撲異構(gòu)酶，可將超螺旋型DNA變成松弛型DNA．VirD2蛋白具有特異剪切單鏈DNA在植物受到創(chuàng)傷后，創(chuàng)傷組織的細胞釋放出酚類化合物信號，在遺傳轉(zhuǎn)化過程中除了Ti質(zhì)粒上的基因參與外，還有農(nóng)桿菌染色體基因．染色體基因包chvA、chvB、att、pscA、chvD以及chvB．它們大多編碼一