【正文】 ，在血液中的平均濃度為42g/L()有著極其重要的生理功能。按其生物功能分，其屬于轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白。層析是根據(jù)混合物中,溶質(zhì)在互不混溶的兩相之間分配行為的差別,料液處理量小。反膠團(tuán)體系具有如下特征：熱力學(xué)穩(wěn)定；自發(fā)形成；表面張力低（小于10－）；透明（反膠團(tuán)的直徑小于100nm）；比表面大。表面活性劑的特點(diǎn)：雙親媒性結(jié)構(gòu)；至少溶于某一相；界面吸附；界面定向；形成膠束；多功能性(潤(rùn)濕、乳化和分散)。這次的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)用十六烷基溴化銨(CTAB)/正辛醇：三氯甲烷(4:1 V/V)反膠團(tuán)體系對(duì)牛血清白蛋白(BSA)進(jìn)行萃取，通過(guò)改變萃取體系水相的PH值、離子強(qiáng)度、兩液相的體積比等因素，研究了BSA在陽(yáng)離子表面活性劑體系的萃取機(jī)理，實(shí)驗(yàn)表明：，水相與有機(jī)相體積比為2：1時(shí)，在210nm時(shí)萃取率高達(dá)95%，具有較高的應(yīng)用價(jià)值。由表可看出，水相的pH值對(duì)BSA的萃取率影響甚大，萃取BSA的最佳液相為pH=pI(plBsA=)的蒸餾水體系，pH=pI時(shí)萃取率為零，所以本文選擇PH=。結(jié)果表明，萃取操作在一定PH值下進(jìn)行，BSA在該體系中沒(méi)有明顯失活變性的問(wèn)題。 cetyl trimethyl ammoniumMicroemulsions were prepared by solubilizinghydroxide particles within the nanosize aqueousThe precipitate was then dried at 100176。electron microscope was used for these studies.然后這兩微乳狀體系被充分混合。煅燒的粉末先把它存放到一塊碳涂上一層的TEM柵格上在甲醇中疏散，用JEOL 200CX轉(zhuǎn)播電子顯微鏡進(jìn)行研究。微乳狀體系通過(guò)在CTAB/丁醇/辛烷系統(tǒng)中加入不同濃度的鹽而形成的。used to study the size and shape of the calcinedSuperspeed centrifuge at 7000 rpm for 10 min. Theconstant stirring. Due to the frequent collisions of thewas chosen. This system has been shown to solubilizeFerric nitrate and cobalt nitrate ( % pure)尤其是1：1時(shí)結(jié)果更低,因此兩液相體積比選擇2：1時(shí)萃取效果最好。若A值較大，在萃取后通過(guò)紫外分光光度計(jì)能測(cè)量出A值，不至于因?yàn)槟芰康投鴾y(cè)不出來(lái)，影響萃取率的計(jì)算。利用季銨鹽為表面活性劑的反膠團(tuán)相一般需加入油性醇，如己醇和辛醇,其作用是降低表面活性劑親水頭陽(yáng)離子間的相互排斥作用[2]，正辛醇在水中的溶解度低,[10],當(dāng)有機(jī)相與水相混合時(shí),正辛醇微溶對(duì)萃取后水相吸光度測(cè)定的影響降低。 表面活性劑 表面張力是指作用于液體表面單位長(zhǎng)度上使表面收縮的力(mN/m)，它是液體的內(nèi)在性質(zhì)，其大小主要取決于液體自身和與其接觸的另一相物質(zhì)的種類，從廣義上講，能使體系表面張力下降的溶質(zhì)均可稱為表面活性劑，但習(xí)慣上只將降低表面張力作用較大的一類化合物稱為表面活性劑。反膠團(tuán)萃取技術(shù)的發(fā)現(xiàn)，是分離技術(shù)研究領(lǐng)域的一項(xiàng)突破。生物產(chǎn)品的生產(chǎn)費(fèi)用50－90％耗費(fèi)在分離純化過(guò)程中，因此，對(duì)這一過(guò)程的研究和改進(jìn)具有重要意義。BSA產(chǎn)品是血清的稀釋劑,是其它蛋白質(zhì)的穩(wěn)定劑。優(yōu)秀畢業(yè)設(shè)計(jì)1 引言1. 1牛血清白蛋白的簡(jiǎn)介 蛋白質(zhì)是一類重要的生物大分子，它在生物體內(nèi)占有特別重要的地位，蛋白質(zhì)和核酸是構(gòu)成細(xì)胞內(nèi)原生質(zhì)的主要成分，而原生質(zhì)是生命現(xiàn)象的基礎(chǔ)。配在酶試劑中,BSA 可以保護(hù)酶的活性,而不讓酶短期失活。目前，所采用的生化產(chǎn)品分離方法主要有鹽析、沉淀、層析、電泳、高效液相色譜等，它們的共同缺點(diǎn)是連續(xù)操作和放大困難。該技術(shù)應(yīng)用過(guò)程中，較少使用毒性試劑，對(duì)人體無(wú)害，而且反膠團(tuán)溶液可反復(fù)利用，親和配體的引入，還可提高目標(biāo)物的萃取率及分離的選擇性[4]。CTAB是季銨鹽型陽(yáng)離子表面活性劑，在堿性介質(zhì)中不受影響[8]。實(shí)驗(yàn)主要儀器有離心機(jī)、紫外可見分光光度計(jì)、恒溫磁力攪拌器等，離心機(jī)是生化實(shí)驗(yàn)室及生化工業(yè)廣泛使用的分離設(shè)備。 萃取最佳PH值的選擇 mol/L的CTAB/正辛醇/三氯甲烷(4：1，V/V)的反膠團(tuán)溶液提取ckcl = mol/、并在λ為210nm下測(cè)A，平行三次，結(jié)果見表6：表6 水相PH值對(duì)萃取率的影響PH值平均測(cè)量號(hào)波長(zhǎng)/(nm)A標(biāo)C標(biāo)/(g/L)A樣C樣/(g/L)R%123210負(fù)值負(fù)值01232108612321065水相的PH值決定了蛋白質(zhì)表面電荷的狀態(tài)，從而對(duì)萃取過(guò)程造成影響。因?yàn)樗噙^(guò)少，則有機(jī)相層較厚，蛋白質(zhì)在兩相界面間的接觸不充分，萃取率不高，水相過(guò)多，則有機(jī)相層會(huì)呈顆粒狀，水相與有機(jī)相不能形成良好界面，也不利于萃取，所以本文選擇水相與有機(jī)相體積比為2：1時(shí)為最佳萃取條件。were purchased from Aldrich。(dissolve into aqueous droplets) a large amountaqueous cores of waterinoil microemulsions [ 15,16],precipitate was then washed with a 1:1 mixture ofparticles. The calcined powder was ultrasonically帶有相同組分的兩微乳狀體系 (I和II )處于不同的含水的階段。磁化( M H回路)測(cè)量方法是在室溫下的一個(gè)最大限度應(yīng)用的領(lǐng)域的振動(dòng)的抽樣磁強(qiáng)計(jì)( LDJ 9600 )上在帶有5 kOe上被完成不定向的微粒的隨機(jī)集結(jié)。微乳狀體系II的含水階段能溶解氫氧化銨，沉淀劑濃度大于被要求的化學(xué)計(jì)量的10%。carbon coated TEM grid. A JEOL 200CX transmissionto remove any oil and surfactant from the particles.into contact. This led to the precipitation of cobaltiron[24].solution ( 38% NH3)。4 結(jié)論本文對(duì)牛血清白蛋白進(jìn)行反膠團(tuán)萃取及對(duì)萃取機(jī)理進(jìn)行了研究。故對(duì)于陽(yáng)離子表面活性劑，溶解的PH值需高于PI值時(shí)，反膠團(tuán)萃取才能進(jìn)行，表明蛋白質(zhì)所帶的凈電荷與表面活性劑極性頭所帶電荷符號(hào)相反，兩者的靜電作用對(duì)萃取蛋白質(zhì)有利，如果PH值很低，在界面上會(huì)產(chǎn)生白色絮凝物，并且萃取率也降低。離心分離是利用慣性離心力和物質(zhì)的沉降系數(shù)或浮力密度的不同而進(jìn)行的一項(xiàng)分離、濃縮或提煉操作，對(duì)那些固體顆粒很小或液體黏度很大，過(guò)濾速度很慢，甚至難以過(guò)濾的懸浮液十分