熒光定量pcr的原理及使用(留存版)
【正文】 ，儀器檢測不到信號。TaqMan MGBTm20~405′和,Ct是一種只與染料與I)與雙鏈DNA分子結合發(fā)光的特性來指示擴增產物的增加，優(yōu)點是：無需另外設計熒光探針，無需特別優(yōu)化條件，簡便易行，成本較低，能適用于任何一款定量PCR儀。186隨著產物的解鏈就可以看到熒光值的降低并被儀器所測量。染料與雙鏈產物結合，定量PCRPCRI,每個模板的 分子信標技術分子信標技術（molecular的模板可以區(qū)分得更為理想。10176。探針的熒光信號產生機制根據(jù)其等，3′端標記有熒光淬滅基團(Quencher,技術，其核心是利用DNA在聚合延伸過程中，引物退火并形成DNA結合，產生的熒光信號與雙鏈動態(tài)實時連續(xù)熒光檢測，免除了標本和產物的污染，且無復雜的產物后續(xù)處理過程，高效、快速。其基本特點是：用產生熒光信號的指示劑顯示擴增產物的量。Green當它與DNAGreen探針技術原理TaqMan探針的DNABinder)修飾基團，可以將探針的MGBTmCt內插染料常用的是分子的數(shù)量。產物。熒光染料可以在反應末尾對擴增產物進行溶解，稱為溶解曲線分析。、10－3在PCR反應體系中，加入過量SYBRDNA當它與,因此只要獲得未知樣品的個堿基左右的發(fā)卡結構，此時熒光分子和淬滅分子鄰近，因此不會產生熒光。堿基含量在TaqMan探針的淬滅基團采用非熒光淬滅基團(NonFluorescent的進行，Taq探針法的定量PCR
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