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實(shí)驗(yàn)一藥理實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)知識(留存版)

2025-08-07 14:19上一頁面

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【正文】 3 2021 6 2122 4 3 21 23 32 2 Σ 18 9 9第四節(jié) 藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的分析處理一、實(shí)驗(yàn)結(jié)果的記錄及表示方法實(shí)驗(yàn)過程中,要對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行及時、客觀的記錄。但不應(yīng)只根據(jù)一次的結(jié)果而輕率地下結(jié)論,在動物數(shù)少時尤其如此。自由度……統(tǒng)計學(xué)一專門術(shù)語。即求得的x2值越大,否定假設(shè)情況的可能性就越大,差值是由處理因素所致的可能性越大;反之,x2值越小,否定假設(shè)情況的可能性越小,即差值是由實(shí)驗(yàn)誤差所致的可能性越大。還應(yīng)在討論中指出實(shí)驗(yàn)結(jié)果的生物學(xué)意義。實(shí)驗(yàn)完畢后,應(yīng)將實(shí)驗(yàn)器材,用品及實(shí)驗(yàn)桌凳收拾干凈;實(shí)驗(yàn)動物尸體和廢物應(yīng)放到指定的地點(diǎn),不得隨地亂丟。常用于復(fù)制哮喘、組胺過敏、結(jié)核病模型,以研究平喘藥、抗組胺藥以及抗結(jié)核藥的作用。但有些實(shí)驗(yàn)對動物體重或周齡有特殊要求,如大鼠足腫脹法的抗炎實(shí)驗(yàn),宜選用120150kg的大鼠,對致炎劑敏感。用毛筆或棉棒蘸取此溶液,在動物的不同部位涂上苦味酸溶液表示不同號碼。操作時將灌胃管插入口腔,沿上腭壁輕輕插進(jìn)食管,當(dāng)插進(jìn)2~3 cm時,灌胃管的前端到達(dá)膈肌水平,此時可稍感有抵抗(圖242)。圖243圖2425.尾靜脈注射法 將小鼠裝入固定筒內(nèi)或玻璃鐘罩內(nèi),使其尾部外露。3.皮下注射法 注射部位為背部或大腿外側(cè)皮下。為避免誤入氣管,將導(dǎo)尿管的外口放入一杯水中,確認(rèn)無氣泡或管中液面不隨呼吸而上下波動,則可用注射器將藥液灌入,并以少量清水沖洗灌胃管。確定針頭在皮下后,注入藥液。操作時,注意犬的動向,以防被犬咬傷,最后在犬耳根后頸項(xiàng)上打一個活結(jié)。4.不可玩耍動物或使動物逃跑。(一)百分比濃度:包括質(zhì)量百分比濃度、質(zhì)量體積百分比濃度及體積體積百分比濃度。貓和家兔可采用靜脈注射、腹腔注射或直腸灌注等多種途徑給藥。用乙醚麻醉狗時,可根據(jù)狗的大小選擇合適的麻醉口罩,放入浸潤乙醚的紗布。剪毛時要把剪刀貼近皮膚,不能用手提起被毛,以免剪破皮膚。3.如動物麻醉過淺,可臨時補(bǔ)充麻醉藥,但一次補(bǔ)藥劑量不宜超過總量的1/5。用量為每公斤體重80~l00mg,經(jīng)靜脈或腹腔給藥。 理想的麻醉藥應(yīng)具備以下三個條件:第一,麻醉效果好,使動物無痛,麻醉時間能滿足實(shí)驗(yàn)要求:第二,對動物的副作用和對于所要觀察的指標(biāo)影響最小;第三,使用方便。 上述不同種類動物間劑量的換算法只能提供一個粗略的參考值。2.捉拿大鼠,尤其是已經(jīng)受到激惹的大鼠時,一定要注意防護(hù),以免被其咬傷。六. 犬的捉持和給藥方法犬的性格兇猛,會咬人。給藥方法:1. 灌胃法 可參照小鼠和大鼠灌胃法進(jìn)行。一人坐好,將兔的軀體夾于兩腿之間,左手抓住雙耳,固定其頭部,右手握住其兩前肢。圖244A圖244B給藥方法:1.灌胃法 大鼠的灌胃法與小鼠相似。 4.腹腔注射法 左手固定動物,使小鼠腹部朝上。也可只用左手捉拿小鼠,方法是先用左手的拇指和食指抓住小鼠的尾部中段,然后用左手的無名指和小指夾住尾的根部,并輕壓向背部,用左手的拇指和食指抓住小鼠的兩耳及頭頸部皮膚,將其置于手心中。 2. 涂染紅色,%中性紅或品紅溶液。例如在進(jìn)行發(fā)熱實(shí)驗(yàn)時,宜首選家兔:在進(jìn)行過敏反應(yīng)和變態(tài)反應(yīng)實(shí)驗(yàn)時,宜首選豚鼠;小鼠則宜用于半數(shù)致死量等方面的觀察。此外,因家兔耳長大,血管清晰,便于靜脈注射和采血,故也廣泛用于藥物的血管刺激性及溶血性的研究。如需補(bǔ)發(fā)增添時,應(yīng)向指導(dǎo)教師申報理由,經(jīng)同意后方能補(bǔ)領(lǐng)。繪圖時,應(yīng)在橫軸和縱軸上畫出刻度,標(biāo)明數(shù)值單位。(2) 將數(shù)據(jù)帶入四格表,并根據(jù)X2計算公式算出X2值。S……標(biāo)準(zhǔn)差,是用以估計原始數(shù)據(jù)(X)的分散程度或原始數(shù)據(jù)的實(shí)驗(yàn)誤差程度的人為單位。從而兩組實(shí)驗(yàn)獲得數(shù)據(jù)的差異就有可能是實(shí)驗(yàn)誤差所造成,而在被實(shí)驗(yàn)對象的數(shù)目很少時(小樣本),此種可能性更大。而多數(shù)是按性別、體重分群。在分組時,對實(shí)驗(yàn)對象進(jìn)行隨機(jī)抽取可保證被研究的樣本能代表總體,從而減少抽樣誤差;在施加多個處理因素時采用隨機(jī)原則,可保證各組樣本的條件基本一致,可減少組間人為的誤差。4. 在實(shí)驗(yàn)過程中遇到疑難之處,先要自己設(shè)法解決,如一時解決不了,應(yīng)向指導(dǎo)教師說明情況,請求教師協(xié)助解決。2. 嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)上的步驟進(jìn)行操作,準(zhǔn)確計算給藥量,節(jié)省器材和藥品。自身對照,對照與實(shí)驗(yàn)均在同一實(shí)驗(yàn)對象進(jìn)行,即同一個體處理前后的對照,如給藥前后的對比等。分群法是按某幾個因素將對象先分為數(shù)群,而后再按隨機(jī)抽樣法將每群中的對象分到各組中去。二、差值的顯著性測驗(yàn)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,實(shí)驗(yàn)者必須對所獲得的實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析處理,才能發(fā)現(xiàn)問題,得出結(jié)論?;竟剑? ……(只適用于兩組例數(shù)相等或近似之情況)X……被實(shí)驗(yàn)個體實(shí)驗(yàn)觀察指標(biāo)量的大小。 標(biāo)準(zhǔn)t值可根據(jù)t值表查出,由該表有關(guān)自由度及特點(diǎn)危險率(5%或1%)而找出該標(biāo)準(zhǔn)t值。 4.實(shí)驗(yàn)方法:實(shí)驗(yàn)步驟可作簡要描述。一旦發(fā)現(xiàn)儀器和設(shè)備故障或損壞,應(yīng)立即向指導(dǎo)教師報告,以便能及時維修或更換,不可擅自拆修或調(diào)換。其特點(diǎn)是性情溫順,易于飼養(yǎng)。由于進(jìn)化較低,其離體標(biāo)本(如心臟、腓腸肌等)能在較長時間內(nèi)保持著自律性和興奮性,而且蟾蜍容易獲得并價格便宜,故經(jīng)常被用于研究藥物對心臟的影響、反射弧分析以及肌肉收縮等實(shí)驗(yàn)中。下面以藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)最常用動物為例,介紹大鼠和小鼠的編號標(biāo)記方法。第四節(jié) 實(shí)驗(yàn)動物的捉持和給藥方法正確地捉拿與固定動物是藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本操作之一,也是實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行的保證。3.肌肉注射法 小鼠固定如上述。二. 大鼠的捉持和給藥方法 捉拿大鼠時,實(shí)驗(yàn)者應(yīng)注意防護(hù),如戴帆布手套進(jìn)行操作。家兔的固定方式有腹臥式和仰臥式兩種:作各種手術(shù)時,一般對麻醉后的動物進(jìn)行仰臥式固定,即將動物的四肢用粗的棉線固定,頭部則用兔頭固定夾固定。圖247圖246四. 豚鼠的捉持和給藥方法先用左手掌迅速扣住其背部,抓住其肩胛上方,將手張開,用手指握住頸部或握住身體的四周,再拿起來。 參照小鼠腹腔注射法?;爻樽⑸淦麽?biāo)ǎ缬谢匮?,則證明針尖在血管內(nèi),即可推注藥液。請粗略估計狗灌胃給藥時的劑量。例如,重碳酸鈉20 g配成400 ml溶液的比例濃度如下:比例濃度=1:=1: 20(三) 摩爾濃度 以1 L溶液中所含溶質(zhì)的摩爾數(shù)來表示溶液的濃度叫做摩爾濃度,用符號mol/L表示。表22 不同動物的戊巴比妥納麻醉劑量動物 狗 貓 兔 鼠每公斤體重用量 2535mg 40mg 35mg 3550mg硫噴妥鈉,為淺黃色粉末,其水溶液不穩(wěn)定,故須在臨用前配制,常用濃度為2.5%~3%,靜脈注射。動物達(dá)到最佳麻醉效果的表現(xiàn)是:皮膚夾捏反射消失,肢體肌肉松弛,呼吸節(jié)律變得深慢而平穩(wěn),角膜反射遲鈍,肢體呈自然倒下。 脫毛脫毛系指用化學(xué)品脫去動物的被毛,適用于無菌手術(shù)野的準(zhǔn)備、觀察動物局部皮膚血液循環(huán)和病理變化以及貼劑等皮膚給藥。如角膜反射消失,則表示麻醉較深。使用時可配制成10%~25%濃度的溶液。計算公式為:質(zhì)量百分比濃度=質(zhì)量體積百分比濃度是指每100 ml溶液中所含溶質(zhì)的克數(shù),用“%”表示。藥物對于某種動物的適當(dāng)劑量不能憑空推算。給藥方法:1. 灌胃法 將木質(zhì)開口器橫放于犬上下門齒間固定,經(jīng)開口器之小孔插入導(dǎo)尿管向前推入食管。4. 靜脈注射法 注射部位可選用前肢皮下頭靜脈,后肢小隱靜脈,耳殼靜脈。如用兔固定箱,可一人操作,2. 腹腔注射法 參照小鼠腹腔注射法。4.靜脈注射法 麻醉大鼠可從舌下靜脈給藥。以無名指和小指夾住尾尖,用中指托起尾巴,使之固定。推注藥液后輕輕拉出灌胃管。例如,在左前腿標(biāo)記紅色和黃色斑點(diǎn),這就表示為11;如果紅色標(biāo)記在左前腿上,而黃色標(biāo)記在左腰部,這就是12,以此類推(如圖2
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