【正文】 子標(biāo)記實(shí)驗(yàn)，體細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)所需試劑、酶、引物等及低值易耗品的測定藥品、試劑的藥品、試劑研究勞務(wù)費(fèi)12010040408015011050690100元/天教師研究工作勞務(wù)補(bǔ)貼田間數(shù)據(jù)測定臨工費(fèi)2001006020020020096050元/工包括校內(nèi)試驗(yàn)數(shù)據(jù)測定項(xiàng)目報(bào)告、總結(jié)、論文寫作資料費(fèi)，打印、復(fù)印費(fèi)35222432235000元/項(xiàng)包括工作總結(jié)、技術(shù)總結(jié)、2011年研究方案、論文寫作。不同生態(tài)區(qū)域特色品種篩選、改良加強(qiáng)現(xiàn)有品種篩選力度，特別重視對銅仁主栽品種、地方變異材料、國內(nèi)外各地特色品種的鑒選。在2009年銅仁地區(qū)煙葉生產(chǎn)調(diào)研成果的基礎(chǔ)上，針對銅仁地區(qū)特色煙開發(fā)中存在的主要技術(shù)問題，有目的地安排相關(guān)試驗(yàn)研究，達(dá)到解決存在問題、總結(jié)技術(shù)規(guī)范并推廣應(yīng)用的目的，擬定本實(shí)施方案。分類研究不同主栽品種在田煙、土煙中施肥量和施肥技術(shù)，重點(diǎn)以生產(chǎn)“中顆煙”為標(biāo)準(zhǔn)，查閱制定上、中、下各部位煙葉單葉重最適值標(biāo)準(zhǔn)，同時(shí)在考慮操作方便性的基礎(chǔ)上，對緩施肥技術(shù)作探討研究。本項(xiàng)目以單位間資源共享、優(yōu)勢互補(bǔ)為合作原則，發(fā)揚(yáng)團(tuán)隊(duì)精神，由貴州大學(xué)、銅仁地區(qū)煙草公司聯(lián)合攻關(guān)。（2）研究方法按研究設(shè)計(jì)、不同海拔高度，選取能代表該煙區(qū)的有代表性的煙田，品種為當(dāng)?shù)刂髟云贩N或基地單元的主栽品種，每塊煙田在打頂后選取具有代表性的煙株60株，煙株上每片葉均掛牌、標(biāo)明葉位，掛牌時(shí)測定煙株的株高（打頂高度）、莖圍、單株有效葉數(shù)、最大葉和倒10葉的葉面積、落黃速度（記每次采收后煙株所余葉片數(shù)）。 供試品種（系）選銅仁地區(qū)煙葉生產(chǎn)上曾經(jīng)種植或可能適應(yīng)的品種（系）進(jìn)行試驗(yàn)，2009年共10個(gè)（下表），以當(dāng)?shù)刂髟云贩N為對照，分別按111進(jìn)行編號。取樣時(shí)為防止混雜，必須填好內(nèi)外標(biāo)簽，注明試驗(yàn)名稱、地點(diǎn)（縣）、品種（系）名稱、部位、等級。 土煙試驗(yàn)：：①常規(guī)施肥（，其中64%基肥，合4KgN/畝,合50Kg/畝土煙基肥；36%在移栽后25天時(shí)追肥，,合15Kg/畝土煙追肥）；②優(yōu)化施肥（，其中40%基肥，,；60%在移栽后25天時(shí)追肥，,﹢15Kg/畝土煙追肥）；③優(yōu)化供氮A(92%常規(guī)施肥)[，其中40%基肥，合29Kg/畝土煙基肥；60%在移栽后25天時(shí)追肥，合15Kg/畝土煙基肥﹢15Kg/畝土煙追肥]；④優(yōu)化供氮B(84%常規(guī)施肥)（，其中40%基肥，；60%在移栽后25天時(shí)追肥，﹢15Kg/畝土煙追肥）；：每處理設(shè)三次重復(fù)，隨機(jī)區(qū)組布置，共12個(gè)小區(qū)，每個(gè)小區(qū)面積為66m2,共需試驗(yàn)地面積792m2,。由于各期播種導(dǎo)致了煙苗的生長分別處于不同的階段，對其養(yǎng)分管理與剪葉管理不能同時(shí)進(jìn)行，因此需要在條件相對一致的一個(gè)大棚內(nèi)設(shè)置5個(gè)苗池（每個(gè)容量為9盤），最好能相對集中連成一排。 試驗(yàn)設(shè)計(jì)：設(shè)3個(gè)處理（含對照）：①覆蓋方式保溫：大棚內(nèi)套小拱棚覆膜（透明）＋播種后浮盤覆蓋黑色膜7天。每個(gè)苗池的規(guī)格（長度、寬度、深度）、育苗開始時(shí)的苗池水量、肥料用量等必須相同。11 早生快發(fā)地膜覆蓋栽培技術(shù)研究銅仁地區(qū)適時(shí)提早移栽是減少病蟲害和中后期伏旱影響的重要措施。結(jié)合貴州省2010年烤煙收購指導(dǎo)價(jià)格進(jìn)行各處理煙葉產(chǎn)值、均價(jià)等指標(biāo)的計(jì)算。②栽前蓋膜7天。 不同海拔煙區(qū)適宜移栽期研究 研究目的：通過試驗(yàn)設(shè)計(jì)，采取不同播期播種、不同時(shí)期移栽，研究銅仁地區(qū)不同海拔煙區(qū)不同時(shí)期移栽與煙葉質(zhì)量、產(chǎn)量形成的關(guān)系，提出銅仁地區(qū)不同海拔煙區(qū)適宜的移栽期。 觀察項(xiàng)目與方法：于團(tuán)棵、現(xiàn)蕾期每小區(qū)隨機(jī)取樣5株，調(diào)查煙株生長動(dòng)態(tài)指標(biāo)，包括單株綠葉數(shù)、莖高、莖粗、單株葉面積、開展度。不同落黃長相分為三類：提早落黃（現(xiàn)蕾期煙株未達(dá)到品種正常高度和株型，煙株群體表現(xiàn)出明顯的脫肥，下部葉提前落黃）、正常落黃（現(xiàn)蕾期煙株達(dá)到品種正常高度和株型，煙株群體表現(xiàn)正常，下部葉正常落黃）和推遲落黃（現(xiàn)蕾期煙株達(dá)到品種正常高度和株型，煙株群體表現(xiàn)出過肥癥狀，葉色濃綠，下部不落黃）。單株葉面積＝單株所有綠葉的面積相加之和。表示方法有：①每天成熟葉片數(shù)＝采收葉片數(shù)／上次采收至本次采收間隔的天數(shù)。1葉齡。均價(jià)（元／kg）＝售煙金額（元）／售煙重量（kg）上等煙率。：各處理取樣均采取定級取樣與混合取樣兩種方式。定級取樣：取X2L（下部葉）、C3F（中部葉）。，掛牌烘烤，烤后煙葉分級、取樣均以此為基礎(chǔ)。，連續(xù)每炕進(jìn)行。產(chǎn)值。根系烘干后的重量。開展度。附：試驗(yàn)研究調(diào)查項(xiàng)目、方法與標(biāo)準(zhǔn)一、田間生長動(dòng)態(tài)調(diào)查、測定項(xiàng)目葉面積。對各處理煙葉進(jìn)行取樣（取樣等級：X2F、C3F、B2F，取樣重量：每個(gè)等級1～2kg），進(jìn)行化學(xué)品質(zhì)分析與評吸鑒定。漂浮育苗，分期播種，1月上旬播第一期，以后間隔10天播一期，共播5期。在成熟采烤期，對標(biāo)記煙株記錄每次采收的日期及采收葉片數(shù)，直到采烤結(jié)束，以便計(jì)算各處理煙株的落黃速度。結(jié)合貴州省2010年烤煙收購指導(dǎo)價(jià)格進(jìn)行各處理煙葉產(chǎn)值、均價(jià)等指標(biāo)的計(jì)算。（2）煙株生長動(dòng)態(tài)的觀測：每處理選擇3株煙株進(jìn)行掛牌標(biāo)記，從移栽后第10天開始進(jìn)行煙株生長動(dòng)態(tài)觀測，每次觀測的間隔時(shí)間為10天。（3）各處理形成移栽壯苗的日期（月/日）與壯苗率（％）：壯苗率于各處理苗池的兩端與中間共抽三個(gè)苗盤進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。釀熱溫床制作如前所述。壯苗率為每個(gè)苗盤上形成的壯苗數(shù)占該盤煙苗總數(shù)的百分率。播種期以10天為間隔，設(shè)置5個(gè)處理：①；②；③（2009年德江低海拔煙區(qū)播種結(jié)束日期）；④（2009年德江高海拔煙區(qū)播種結(jié)束日期）；⑤；重復(fù)3次。：田煙試驗(yàn)用基肥為銅仁地區(qū)2009年采用的6—10—25，追肥15—0—30。調(diào)查方法見附錄。 武陵煙區(qū)特色質(zhì)量煙葉的環(huán)境影響機(jī)理及環(huán)境評價(jià)體系、對所取得的試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，通過對武陵山區(qū)生態(tài)環(huán)境因素的調(diào)查、取樣分析（氣象、土壤、水資源、土壤養(yǎng)分），根據(jù)以上專題的研究結(jié)論，找出武陵山區(qū)煙葉特色質(zhì)量形成的有利與不利生態(tài)環(huán)境因素及指標(biāo)，找出特色質(zhì)量煙葉生產(chǎn)的障礙因子。3 武陵山區(qū)煙葉質(zhì)量特色形成機(jī)理研究（1）研究武陵煙區(qū)氣候條件對煙葉質(zhì)量特色的影響機(jī)理（2）研究武陵煙區(qū)土壤條件對煙葉質(zhì)量特色影響機(jī)理（3）研究武陵煙區(qū)特色質(zhì)量煙葉田間長勢長相與適宜單產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)（4）研究武陵煙區(qū)特色質(zhì)量煙葉的環(huán)境影響機(jī)理及環(huán)境評價(jià)體系（1）研究思路與設(shè)計(jì)與“特色質(zhì)量煙葉的田間長勢長相、適宜單產(chǎn)研究”專題結(jié)合進(jìn)行。共100個(gè)樣品，200kg。三、研究思路及研究內(nèi)容煙葉特色定位與質(zhì)量評價(jià)指標(biāo)體系研究根據(jù)今年調(diào)研情況，確定在23個(gè)對口卷煙廠基地單元（建議根據(jù)德江、石阡、江口歷史資料找優(yōu)質(zhì)煙葉出產(chǎn)地點(diǎn)或找不同生態(tài)類型）進(jìn)行不同質(zhì)量煙葉的篩選，交對口廠家鑒評，找出對口卷煙廠最喜歡的煙葉，反溯質(zhì)量形成的氣候因子、土壤因子、品種及栽培技術(shù)、烘烤技術(shù)。二、研究目標(biāo)針對銅仁目前不能解決的技術(shù)問題，采用深入的研究解決，組裝配套成功的經(jīng)驗(yàn)、技術(shù)、成果，示范推廣，促進(jìn)銅仁地區(qū)煙葉生產(chǎn)持續(xù)、穩(wěn)定、健康發(fā)展，生產(chǎn)水平上一個(gè)臺階，實(shí)現(xiàn)農(nóng)民增收、企業(yè)增效、財(cái)政增稅。特色煙葉定向栽培技術(shù)研究與示范重點(diǎn)解決移栽期調(diào)整的培育壯苗問題、早期移栽的低地溫問題、中后期保墑問題、矮壯苗和高莖壯苗培育與移栽技術(shù)、結(jié)合田間長勢的科學(xué)打頂技術(shù)。貴州大學(xué)負(fù)責(zé)項(xiàng)目的研究工作，負(fù)責(zé)制定研究方案、試驗(yàn)研究實(shí)施、技術(shù)培訓(xùn)，協(xié)助落實(shí)、檢查生產(chǎn)技術(shù)方案落實(shí)情況。所選煙株葉片均掛牌烘烤，烤后測定單株產(chǎn)量。序號品種序號品種1Va1162貴煙4號3GY24GY85紅花大金元6南江三號7興煙一號8G1409K32610GY511云煙87（CK）（1）田間試驗(yàn)設(shè)計(jì)：試驗(yàn)采用三重復(fù)隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)。表41 試驗(yàn)地基本情況記載表試地名稱試地面積及地塊試地概況地勢及試地周圍地貌輪作類型前茬作物最近一次種煙年份病蟲害狀況土壤類型土質(zhì)農(nóng)業(yè)土壤名稱肥力有機(jī)質(zhì)速效氮速效磷速效鉀備注表42 試驗(yàn)實(shí)施情況記錄表育苗方法播種時(shí)間移栽時(shí)間基肥種類數(shù)量時(shí)間追肥種類數(shù)量時(shí)間中耕培土灌溉除草病蟲害防治時(shí)間對象藥劑方法打頂抹杈時(shí)間方法其他表43 各品種(系)生育時(shí)期記錄表品種(系)名稱重復(fù)現(xiàn)蕾期(日/月)第一花期(日/月)腳葉成熟期(日/月)頂葉成熟期(日/月)出苗至移栽天數(shù)(天)移栽至中心花天數(shù)(天)大田生育期（天）1ⅠⅡⅢ表44 各品種(系)形態(tài)特征品種(系)名 稱株形葉 形主脈粗細(xì)葉肉厚薄生 長 勢田間整齊度葉片葉尖葉耳葉面葉緣25天50天12表45 主要農(nóng)藝性狀記載表品種(系)名稱重復(fù)株高(cm)葉數(shù)(片)莖圍(cm)節(jié)距(cm)腰葉長(cm)腰葉寬(cm)頂葉長(cm)頂葉寬(cm)1ⅠⅡⅢ表461 各品種(系)產(chǎn)量、質(zhì)量記錄表（分區(qū)組紀(jì)錄 區(qū)組*） 單位：Kg等級品種1品種2品種3品種4品種5品種6品種7品種8品種9品種10品種11X1FX2FX3F表462 各品種(系)經(jīng)濟(jì)性狀統(tǒng)計(jì)表品種(系)名稱重復(fù)畝產(chǎn)量(kg/畝)均 價(jià)(元/kg)畝產(chǎn)值(元/畝)上等煙率(%)中等煙率(%)青煙率(%)單葉重(g)1ⅠⅡⅢ表47 各品種(系)外觀質(zhì)量鑒定品種(系)名稱部位等級成熟度油份厚度葉片結(jié)構(gòu)顏色光澤1C3F2C3F5 特色品種改良研究標(biāo)本采集病原菌的分離純化病原菌的保存病菌的產(chǎn)毒培養(yǎng)毒素致病性測定毒素成分的鑒定毒素生物學(xué)特性研究離體培養(yǎng)（毒素篩選）基因型及外植體的選擇毒素連續(xù)篩選再生植株 抗性鑒定（田間鑒定）0農(nóng)藝性狀鑒定（田間鑒定） 感病品種抗性突變體 遺傳研究 研究目的為了利用體細(xì)胞無性系變異及青枯病或黒莖病毒素離體篩選技術(shù)，創(chuàng)造新抗源，培育、改良抗青枯病或黒莖病新品種。其余管理均同常規(guī)生產(chǎn)技術(shù)。每個(gè)苗池的規(guī)格（長度、寬度、深度）、育苗開始時(shí)的苗池水量、肥料用量等必須相同。②覆蓋＋釀熱方式增溫保溫：將苗床制成釀熱溫床，再結(jié)合處理1的方式進(jìn)行覆蓋保溫。各個(gè)苗池之間除了保溫增溫措施的不同外，其他條件與管理措施必須保持一致。提早移栽面臨的主要問題，除了育苗方面的壯苗不能適時(shí)育成以外，還受早期移栽的地溫偏低，煙苗生長緩慢的影響。對各處理煙葉取樣（取樣等級：X2F、C3F、B2F，取樣重量：每個(gè)等級1～2kg）（該試驗(yàn)含各重復(fù)各處理的取樣總數(shù)為72），進(jìn)行化學(xué)品質(zhì)分析（樣品數(shù)72）與評吸鑒定（樣品數(shù)24）。③栽前蓋膜0天（對照）。 試驗(yàn)設(shè)計(jì)：以海拔高度和移栽期為試驗(yàn)因素，采用二因素裂區(qū)試驗(yàn)設(shè)計(jì)。記載各個(gè)處理大田生育期、采收結(jié)束期。 試驗(yàn)處理：采用隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)，設(shè)置五個(gè)處理：①提早落黃－扣心打頂－少留葉；②提早落黃－扣心打頂－少留葉－補(bǔ)肥護(hù)叉（護(hù)留一個(gè)叉枝補(bǔ)充葉數(shù)）；③正常落黃－初花打頂－正常留葉；④推遲落黃－盛花打頂－正常留葉；⑤推遲落黃－盛花打頂－護(hù)叉（護(hù)留一個(gè)叉枝，用叉枝影響消耗母體營養(yǎng)，促進(jìn)其落黃）。莖粗。②整株煙葉平均每天成熟葉片數(shù)＝單株總?cè)~數(shù)／第一次采收至最后一次采收的總天數(shù)。指葉片出生到衰亡的天數(shù)。指一批煙葉中上等煙重量占整批煙葉重量的比例?；旌先樱合葘?0竿煙葉充分混合均勻。所有煙樣妥善保存，待所有試驗(yàn)結(jié)束后統(tǒng)一送貴大進(jìn)行化學(xué)成分分析和評吸。，還必須記錄中部葉烤完后停烤的天數(shù)。表131 下、中部葉不同成熟采收試驗(yàn)處理表下部葉處理煙葉變黃主脈變白（記錄）移栽后天數(shù)（記錄）Ⅰ變黃面積1020%Ⅱ變黃面積2030%Ⅲ變黃面積3040%Ⅳ變黃面積4050%中部葉Ⅰ變黃面積4050%Ⅱ變黃面積5060%Ⅲ變黃面積6070%Ⅳ變黃面積7080%注：主脈變白情況根據(jù)煙葉實(shí)際情況進(jìn)行記錄，以分?jǐn)?shù)表示。單位：kg。根干重。一般用cm表示。對各處理煙葉進(jìn)行取樣（取樣等級：X2F、C3F、B2F，取樣重量：每個(gè)等級