【正文】 標本的類型和采集量應根據(jù)所測病原體而定。 淋病奈瑟菌有自溶的特性，標本采集后應立即送檢。 2)凍干質控品復溶時，所加溶劑的量要準確 3)凍干質控品復溶時應輕輕搖勻，切忌劇烈振搖 上 海 市 臨 床 檢 驗 中 心 Shanghai Centre for Clinical Laboratory 質控品設置、數(shù)量 定性檢測 已知弱陽性質控樣本（基質與待測標本相同）： 至少帶 1份，監(jiān)測核酸提取和擴增檢測的有效性 已知陰性質控樣本（基質與待測標本相同）： 至少帶 1份，判斷核酸提取過程中是否發(fā)生污染 (實驗室的以前擴增產(chǎn)物的污染、標本間的交叉污染、強陽性標本氣溶膠經(jīng)加樣器導致污染、強陽性標本經(jīng)操作者手導致污染 翻蓋離心管在較高溫度溫育時蓋子崩開、擴增反應試劑的污染 定量檢測 已知高、中、低質控品（基質與待測標本相同） 已知陰性質控樣本（基質與待測標本相同） 上 海 市 臨 床 檢 驗 中 心 Shanghai Centre for Clinical Laboratory 板上雜交和膜上斑點印跡雜交的質控：在板上雜交和斑點雜交時，陽性和陰性質控應該在同一板或膜上與病人標本平行進行分析，這可排除不同反應中因使用不同雜交條件所致的對結果的錯誤解釋。 3S為失控限，將所得質控結果標在一張質控圖上，簡單明了。 上 海 市 臨 床 檢 驗 中 心 Shanghai Centre for Clinical Laboratory 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 +3S +2S +1S 均值 1S 2S 3S 22S 失控規(guī)則 22S失控規(guī)則示意圖 22S 失控規(guī)則 上 海 市 臨 床 檢 驗 中 心 Shanghai Centre for Clinical Laboratory 4） R4S 在同一批中兩個控制結果差超出 4S范圍 ，其中有一個超出了 +2S限值 ， 另一個超出了 ?2S限值 。 儀器的問題。而擴增效率相近與否，反應在擴增曲線圖上就是曲線的平行性。如果低于檢測下限，但又有擴增曲線，則應重新檢測，仍低于檢測下限，則報告為 “ 低于檢測下限 ” 。 上 海 市 臨 床 檢 驗 中 心 Shanghai Centre for Clinical Laboratory 結果解釋 臨床可以肺結核患者痰涂片陰性，而 TB菌 PCR陽性或時陰時陽，可能患者為初起病間斷排菌且排菌量不大所致；或經(jīng)抗結核治療后，常有矛盾報告 [培養(yǎng)（ ）、 PCR（ +）較多 ]，因為只要有 TB靶片段存在， PCR即可陽性，而測得陽性，不一定有活菌，加之病情與菌量不一定成正比。 上 海 市 臨 床 檢 驗 中 心 Shanghai Centre for Clinical Laboratory 實驗結果有效性判斷標準 標準曲線平滑均勻，斜率、截距和相關系數(shù)等參數(shù)的數(shù)值允許變化范圍均應在試劑制造商推薦的范圍內(nèi)。 試劑的問題。 上 海 市 臨 床 檢 驗 中 心 Shanghai Centre for Clinical Laboratory 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 +3S +2S +1S 均值 1S 2S 3S R4S 失控規(guī)則 R4S失控規(guī)則示意圖 上 海 市 臨 床 檢 驗 中 心 Shanghai Centre for Clinical Laboratory 5） 41S 有兩種表現(xiàn)： l包括出現(xiàn)警告在內(nèi)的這個超出 2S的控制結果 ，這個控制品前 3次結果均和這個控制結果在同方向超出 +1S或 ?1S范圍 。 2S為失控限，假失控概率太高，通常不能接受；以X177。 上 海 市 臨 床 檢 驗 中 心 Shanghai Centre for Clinical Laboratory 質控品均值建立 暫定均值的建立： 20d內(nèi)得到 20個數(shù)值，或至少在 5d內(nèi)，每天作不少于 4次重復檢測獲得 20個數(shù)值。 用于 RNA擴增分析的樣本，則應于上述 TE緩沖液中 70℃ 保存。 如用 痰 做 TB：應在抗結核藥物應用前或停藥兩周后采集標本，如不能停用抗結核藥物，應于下次抗結核藥物應用前采集。 如甘油三酯含量超過 6mmol/L或肉眼可見血清 /血漿呈白色渾濁狀的標本，應 4℃13 000rpm 離心 15min,吸取下層清亮血清或血漿轉移至 管中保存 泌尿生殖道分泌物 一次性采樣管（含保養(yǎng)液） 配套棉拭子（不含保養(yǎng)液） 痰液 結核分枝桿菌 DNA檢測標本：用 4%NaOH搖勻，室溫下放置 30分鐘左右液化，轉移至 ，離心，去上清，留沉淀用于核酸提取。 常規(guī)均值的建立：以最初 20個數(shù)據(jù)和三至五個月在控數(shù)據(jù)匯集的所有數(shù)據(jù)計算的累積平均數(shù)作為質控品有效期內(nèi)的常規(guī)均值，并以此作為以后室內(nèi)質控圖的均值。 結合在一起 ， 假失控和假告警概率低 ， 誤差檢出能力增強 ， 大大提高了失控的檢出率 。 上 海 市 臨 床 檢 驗 中 心 Shanghai Centre for Clinical Laboratory 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 +3S +2S +1S 均值 1S 2S 3S 41S 失控規(guī)則 41S 失控規(guī)則 41S失控規(guī)則示意圖 上 海 市 臨 床 檢 驗 中 心 Shanghai Centre for Clinical Laboratory 6） 10 連同出現(xiàn) 12S警告的這個結果 ，另外還有兩個控制品的結果 ， 在前幾批及本批結果中 ， 有連續(xù) 10次在 的一側 。 上 海 市 臨 床 檢 驗 中 心 Shanghai Centre for Clinical Laboratory 避免基因擴增檢驗假陰性結果的措施 避免由于來自于標本的血紅蛋白、肝素、某些激素或來自標本處理中的去垢劑、有機溶劑的抑制作用的措施：純化核酸；標本重復雙份測定；稀釋標本 定期對擴增儀的溫度控制和加熱模塊中熱傳導的一致性進行檢查和校準 上 海 市 臨 床 檢 驗 中 心 Shanghai Centre for Clinical Laboratory 注意事項 在 PCR試劑準備區(qū)配置反應混合液，先將 dNTP、引物、酶和緩沖液混合后，再分裝； 配制反應體系時，應注意移液器的使用方法，所有的液體都要緩慢加至管底，不要加至管壁，所有液體的混勻要用振蕩器進行，不能用移液器吹打，反應體