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蛋白質(zhì)的提取ppt課件(留存版)

  

【正文】 來(lái)評(píng)價(jià)所提取的精油的純度和質(zhì)量。放出玫瑰精油,用接收瓶收集。 基礎(chǔ)知識(shí) 動(dòng)物: 植物: 微生物: 主要來(lái)源于麝、靈貓、海貍和抹香鯨等 天然香料的來(lái)源 根、莖、葉、花、果實(shí)、種子 真菌 植物芳香油的物理性質(zhì) : 植物芳香油的化學(xué)本質(zhì) : 具有很強(qiáng)的揮發(fā)性 主要包括萜類(lèi)化合物及其衍生物 植物芳香油的提取方法: 植物芳香油選擇方法的依據(jù): 根據(jù)植物原料的特點(diǎn)來(lái)決定 蒸餾、 壓榨 、 萃取 提取植物芳香油的常用方法: 提取植物芳香油常用方法的原理: 水蒸氣蒸餾法 : 水中蒸餾法、水上蒸餾法、水氣蒸餾法 利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的植物芳香油攜帶出來(lái),形成油水混合物,冷卻后,油水混合物又重新分出油層和水層 水中蒸餾適于某些鮮花、破碎果皮和不易粘結(jié)的原料。 薄膜的浸潤(rùn)與選擇正確膜面是電泳成敗的關(guān)鍵之一。該膜具有均一的泡沫狀的結(jié)構(gòu),厚度約為 120μ m,有很強(qiáng)的通透性,對(duì)分子移動(dòng)阻力很小。 1.蛋白質(zhì)的分離步驟 血紅 蛋白提取和分離步驟 具體操作 步驟 (一) (二) (三) (四) 血 液 血 漿 水 分 固體物質(zhì) 血漿蛋白 無(wú)機(jī)鹽 磷 脂 葡萄糖等 血細(xì)胞 白細(xì)胞 血小板 紅細(xì)胞 ( 最多 ) 血紅蛋白 ( ) 90% 血液組成成分 洗滌的目的: 洗去血液中血漿及血小板等中的 雜蛋白 洗滌過(guò)程: 血液 100mL 3g檸檬酸鈉 低速離心 2 min 紅細(xì)胞 血 漿 吸出血漿 紅細(xì)胞 5倍體積 生理鹽水 緩慢攪拌 10min 重復(fù)洗滌 3次,直至上清液沒(méi)有 防止破壞紅細(xì)胞,使血紅蛋白流失 (一)樣品處理 黃色 2. 血紅蛋白的釋放 原理:紅細(xì)胞滲透作用吸水漲破,釋放血紅蛋白 分離過(guò)程: 紅細(xì)胞 混合液 離心管 甲苯層 脂類(lèi)物質(zhì) 血紅蛋白層 破碎物沉淀層 高速離心 10min 濾紙 過(guò)濾 脂類(lèi)物質(zhì) 沉淀物 燒杯 分液 漏斗 20mmol/L磷酸緩沖液 透析的目的是什么? 1mL 1mL 去除血紅蛋白中的小分子雜質(zhì) (二)粗分離 —— 透析血紅蛋白 ★注意事項(xiàng)★ ( 1)生理鹽水作用? ( 3)兩次離心的差異? ( 4)透析袋的作用機(jī)理? 模擬紅細(xì)胞生存環(huán)境,保持紅細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整。 ? 大部分蛋白質(zhì)均含有帶芳香環(huán)的苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸。蛋白質(zhì)溶液具有膠體溶液的典型性質(zhì),如丁達(dá)爾現(xiàn)象、布郎運(yùn)動(dòng)等。 ? 由于膠體溶液中的蛋白質(zhì)不能通過(guò)半透膜,因此可以應(yīng)用透析法將非蛋白的小分子雜質(zhì)除去。 ? 這三種氨基酸的在 280nm 附近有最大吸收。 破碎紅細(xì)胞;溶解細(xì)胞膜 釋放血紅蛋白。該薄膜電泳具有微量、快速、簡(jiǎn)便、分辨力高,對(duì)樣品無(wú)拖尾和吸附現(xiàn)象等優(yōu)點(diǎn) 血清蛋白參考值 等電點(diǎn) 分子量( kDa) 占總蛋白的百分?jǐn)?shù) (%) 清蛋白 69 61~71 α 1球蛋白 200 3~4 α 2球蛋白 300 6~10 β 球蛋白 90~150 7~11 γ 球蛋白 156~950 9~18 4. 經(jīng)醋酸纖維素薄膜電泳可將血清蛋白按電泳速度分為 5條區(qū)帶,從正極端依次為清蛋白、 α1 球蛋白、 α2 球蛋白、 β 球蛋白及 γ 球蛋白,經(jīng)染色可計(jì)算出各蛋白質(zhì)的百分含量。 點(diǎn)樣應(yīng)點(diǎn)在薄膜的毛面上,點(diǎn)樣量要 適量 ,不宜過(guò)多或過(guò)少。
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