【正文】 轉導 以 噬菌體為媒介 所進行的細菌遺傳物質重組的過程。 ?大腸桿菌中的 F因子在接合中將染色體轉移至另一細胞 ?轉化中，細菌細胞攝取周圍介質中的 DNA，并通過同源重組將其整合進自己的基因組，同時取代自己的一些基因。 ⑶ 有極高的自然整合率，且整合到細菌染色體一定 的 座位上。 影印培養(yǎng)法 MM原養(yǎng)型 MM+lay 賴氨酸缺陷型 MM+leu 亮氨酸缺陷型 MM+arg 精氨酸缺陷型 ? 注意： – (1)最初的培養(yǎng)基必須是非選擇性的，即各種突變型都能夠在其上生長； – (2)必須采用適當?shù)姆椒ㄈ缤坎蓟騽澗€法，以使培養(yǎng)物菌落之間要分開。?本章重點和難點：了解細菌進行遺傳物質交流的方式，掌握細菌染色體作圖的方法。 ?接合 ?轉化 第 二節(jié) 細菌的染色體作圖 ?性導 ?轉導 1. 接合現(xiàn)象的發(fā)現(xiàn) 1946年 K12 菌株 A met bio thr+ leu+ thi+ 菌株 B met+ bio+ thr leu thi 一 . 接合 單基因突變率 10 –6 回復突變 1012 or 1018 如何產(chǎn)生？ 原養(yǎng)型的出現(xiàn) 以 A、 B菌株直接接觸為前提 隔離培養(yǎng)后 不出現(xiàn)原養(yǎng)型 2. F因子及其轉移 1952年， A菌株 B菌株 鏈霉素 AB混合培養(yǎng)，原養(yǎng)型重組體 鏈霉素 BA混合培養(yǎng) ， 細菌接合中遺傳物質轉移 單向過程 （即從 A →B株） 細菌分為兩個類群（兩種接合型 ) 供體 （或雄菌株） 受體 （或雌菌株） 2. F因子及其轉移 致育因子 （或 F性因子，也叫 F質粒） 染色體外的一個共價環(huán)狀 DNA分子 （ 細菌 DNA的 2% 1/3基因與接合有關 ) 接合：原核生物中，遺傳物質從供體（ “ 雄性 ” ）轉移到受體（ “ 雌性 ” ）的過程。 Hfr2 ←pro +—leu+—gal+—lac+—F F﹣ lac strr F′lac+ strs F﹣ lac strr lac+頻率低 lac+頻率高 F′因子的主要用途 ⑴ 構建部分二倍體菌株，用于研究基因的相互作用。 一些種類的噬菌體在轉導中整合并轉移細菌基因至新寄主細胞。 并發(fā)性導頻率越高，連鎖越緊密 連鎖基因片段通過重組作圖 F + F﹣ → Hfr F﹣ → 多數(shù)為 F﹣ F + F′ F﹣ → F′ 三 . 轉化 1. 轉化的發(fā)現(xiàn) 1928年， 肺炎雙球菌 1. 轉化的發(fā)現(xiàn) 1928年， 肺炎雙球菌 1944年， DNA 細菌轉化 ：一個細菌品系由于吸收了從另一細菌品系分離得來的 DNA而發(fā)生遺傳性狀的改變的現(xiàn)象。在以下結果中， M表示許多重組子， L表示少量重組子， O表示無重組子，請根據(jù)下述結果，指出每一菌株的性別類型（ Hfr、 F＋ 還是 F） 1 2 3 4 5 O M M O 6 O M M O 7 L O O M 8 O L L O 1 7, 2 8, 3 8 → L 8 不是 Hfr 2 5, 2 6, 3 5, 3 6, 4 7 →M 6 、 4是 Hfr, 7 是 F－ 1 5, 1 6, 1 8, 2 7, 3 7, 4 8 → O 1是 F+ 8是 F+ F+ F－ F－ Hfr Hfr Hfr F－ F+ 3. 中斷雜交試驗及染色體作圖 1957年 Hfr菌株 strs azir tonAr gal+ lac+ F﹣ 菌株 strr azis tonAs gal﹣ lac﹣ 鏈霉素 疊氮化物 T1噬菌體 半乳糖發(fā)酵 乳糖發(fā)酵 步驟 : 供體受體混合培養(yǎng) ↓ 隔時取樣 ↓ 稀釋攪拌，中斷雜交 ↓ 在含鏈霉素的完全培養(yǎng)基上選重組子 ↓ 鑒定重組體基因型 ↓ 記錄重組體頻率及首次出現(xiàn)的時間 ↓ 分析作圖 Hfr菌株 strs azir tonAr gal+ lac+ F﹣ 菌株 strr azis tonAs gal﹣