細菌的遺傳分析(2)(文件)
【正文】 頻率低 lac+頻率高 F′因子的主要用途 ⑴ 構(gòu)建部分二倍體菌株，用于研究基因的相互作用。 1. 轉(zhuǎn)導現(xiàn)象的發(fā)現(xiàn) 1952年 Zinder Lederberg J. 鼠傷寒沙門氏菌 LA2 phe+ trp met+ LA22 phe﹣ trp+met﹣ ↓混合培養(yǎng) 原養(yǎng)型菌落 10﹣ 5（不可能是回復突變） ？ 轉(zhuǎn)化還是接合 ⑴ FA(過濾性因子 )不因 DNA酶而失活，說明是非裸露 DNA ⑵ FA與從溶源性細菌分離得到的噬菌體 P22質(zhì)量大小相同 ⑶ 對 P22的血清敏感，加熱失活 ⑷ 抗噬菌體 P22的沙門菌菌株對 FA也表現(xiàn)抗性 FA是噬菌體 P22 出現(xiàn)原養(yǎng)型菌落 表明不是接合 2. 普遍性轉(zhuǎn)導（一般性轉(zhuǎn)導） 2. 普遍性轉(zhuǎn)導（一般性轉(zhuǎn)導） 細菌染色體組中被轉(zhuǎn)導的基因是 隨機的，轉(zhuǎn)導的 DNA片段大小約為一個噬菌體基因組 的大小。攜帶不同基因兩病毒顆粒同時感染同一細菌細胞的頻率為 105 105。 supC+ trpA+ pyrF+ supC+ trpA pyrF 雙交換 supC+ trpA+ pyrF supC+ trpA+ pyrF+ supC+ trpA pyrF 四交換 supC+ trpA pyrF+ supC+ trpA+ pyrF+ supC+ trpA pyrF 雙交換 supC+ trpA pyrF supC+和 trpA+共轉(zhuǎn)導頻率 36+114/603= supC+和 pyrF+共轉(zhuǎn)導頻率 36/603= 根據(jù)重組體頻率推導基因順序 很多情況下，兩基因座位靠得很近，用重組率很難確定它們與第三個基因之間的次序 b a c 次序如何？ 流產(chǎn)轉(zhuǎn)導（ abortive transduction) 轉(zhuǎn)導 DNA分子進入受體細胞后，不與受體基因組發(fā)生交換，不隨細胞 DNA復制而復制，而是很穩(wěn)定地存在于細胞質(zhì)中，形成流產(chǎn)轉(zhuǎn)導。 一些種類的噬菌體在轉(zhuǎn)導中整合并轉(zhuǎn)移細菌基因至新寄主細胞。 ?本章要點： ?細菌利用幾種機制，在 DNA分子間和細胞間轉(zhuǎn)移 DNA序列。 兩個基因距離越近，并發(fā)轉(zhuǎn)導的可能性越大 并發(fā)轉(zhuǎn)導頻率 X =(1﹣ d/L)3 d—兩基因的距離（ Kb) L—最大可包裹 DNA長度 (Kb) 2. 普遍性轉(zhuǎn)導（一般性轉(zhuǎn)導） 在大腸桿菌中， thr和 leu兩個基因在細菌基因組中相距約為 2%，試問這兩個基因能否用 P1噬菌體進行并發(fā)轉(zhuǎn)導？為什么？ 如果能，其頻率如何？ P1噬菌體可包裹 %，能包裹此兩個基因 X = ( 1 － — ) 3 = % 2 普遍性轉(zhuǎn)導與作圖 利用 合轉(zhuǎn)導頻率 測定基因的連鎖關系 : 供體 leu+ thr+ azis → 受體 leu﹣ thr﹣ azir 實驗 選擇基因 未選擇基因 結(jié)論 1 leu+ 50％ azir ， 2％ thr+ leu azi 較近 2 thr+ 3 ％ leu+ ， 0 ％ azir thr leu 相鄰 3 leu+ thr+ 0％ azi r azi 在邊上 azi thr leu 在以 P1噬菌體進行的普遍性轉(zhuǎn)導系統(tǒng)中，供體菌株的基因型為 pur＋ nad＋ pdx－ ,受體菌為 pur－ nad－ pdx＋ 。如沙門氏菌染色體有 20223000個基因，噬菌體基因組大小 2030個基因，相當于沙門氏菌染色體的 1%。 并發(fā)性導頻率越高，連鎖越緊密 連鎖基因片段通過重組作圖 F + F﹣ → Hfr F﹣ → 多數(shù)為 F﹣ F + F′ F﹣ → F′ 三 . 轉(zhuǎn)化 1. 轉(zhuǎn)化的發(fā)現(xiàn) 1928年， 肺炎雙球菌 1. 轉(zhuǎn)化的發(fā)現(xiàn) 1928年， 肺炎雙
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