【正文】 本（包括所有的修改單）適用于本文件。 三氯甲烷：分析純。 硝酸：分析純。 水浴恒溫震蕩器。8 分析步驟 樣品固定 Ⅰ型樣品將樣品先用70%乙醇洗1次，再用超純水沖洗2次，20℃保存?zhèn)溆?。確定A260／~，方可正常進行后續(xù)實驗。g超純水————基因組DNA50ng/181。表5　 選擇擴增反應體系試劑體積(181。在相同遷移位置，按每一個體擴增片段的有無，出現(xiàn)擴增帶記錄為1，無擴增帶記錄為0。附錄c(資料性附錄)EcoRⅠ與MseⅠ選擴增引物序列EcoRⅠ選擇擴增引物：5180。附錄B(資料性附錄)EcoRⅠ與MseⅠ預擴增引物序列EcoRⅠ預擴增引物：5180。（7）電泳 采用恒恒功率電泳，至二甲苯青達凝膠的下2/3處，停止電泳。L)EcoRⅠ預擴增引物 (50ng/181。l5UMseⅠ4U/181。 DNA產(chǎn)物測定 DNA純度檢測吸取1~3 181。樣品數(shù)量應不少于10個/群體。 普通離心機。 四甲基乙二胺（TEMED）：分析純。 聚類分析（Cluster Analysis） 將研究對象分為相對同質(zhì)的群組（clusters）的統(tǒng)計分析技術。8 擴增片段長度多態(tài)性法????? 擴增片段長度多態(tài)性法1　 范圍本標準規(guī)定了水產(chǎn)生物擴增片段長度多態(tài)性分析（AFLP）的原理、試劑、儀器和設備、采樣、分析步驟和數(shù)據(jù)運算方法。GB/T 養(yǎng)殖魚類種質(zhì)檢驗 第15部分：RAPD分析3　 術語和定義下列術語和定義適用于本標準。 異戊醇：分析純。 37%甲醛溶液。 電泳槽。 Ⅱ型樣品從活體中直接采集肌肉或臟器組織， 20℃冰箱直接凍存。 紫外吸收定量測試260nm波長下測定產(chǎn)物（或產(chǎn)物稀釋液）的紫外吸收值，根據(jù)公式計算DNA濃度。l——10181。L)EcoRⅠ選擇擴增引物 (50ng/181。建立各個群體的01數(shù)據(jù)陣列。GACTGCGTACCAATTCXXX3180。TACTCAGGACTCAT5180。L。表3　 預擴增反應體系試劑體積(181。L）酶切緩沖液10X1XEcoRⅠ10U/181。L TE緩沖液 (10mmol/L TrisHCl pH ，lmmol/L EDTA)，置20℃保存?zhèn)溆谩? 采樣方法應在自然保護機構、人工養(yǎng)殖部門等協(xié)助下進行，以不傷害個體、不破壞其生境為原則，采集其毛發(fā)、皮毛等作為樣品，特殊情況（如出現(xiàn)受傷個體等）可酌情采取其他部位（如肌肉、肝臟等）。 低溫高速離心機。 硝酸銀（AgNO3）：分析純。 Shannon多樣性指數(shù)(Shannon index，I)用來估算群落多樣性的高低。附錄A、B、C均為資料性附錄。聚合酶鏈式反應（PCR）用一對寡核苷酸引物、四種脫氧核糖核苷酸（dNTPs）為原料，在合適的溫度、離子條件和耐熱 DNA聚合酶催化下，在體外人工合成特異的DNA片段的過