【正文】 colorization, respectively Finally, the use of precipitation, column method, organic solvent extraction, membrane separation and purification of polysaccharide. Auricularia auricula polysaccharide reviewed pharmacological effects of health care.Keywords:Auricularia auricula polysaccharide。本文就黑木耳的有效成之一—黑木耳多糖[3]的提取、分離純化、及近年來(lái)國(guó)內(nèi)外的研究進(jìn)展作一綜述。姜紅等[8]研究了纖維素酶和果膠酶各自分別作用提取黑木耳多糖的最佳工藝條件, 發(fā)現(xiàn)在兩種酶反應(yīng)體系中,最適工藝參數(shù)較為接近,為黑木耳雙酶水解提供了依據(jù)。一般常用的分離方法有 Sevag法[14]：根據(jù)蛋白質(zhì)在氯仿等有機(jī)溶劑中變性的特點(diǎn),用氯仿：戊醇或（正丁醇）5：1或4：1混合物劇烈振搖20到30分鐘, 蛋白質(zhì)與氯仿一戊醇（或正丁醇）生成凝膠物而分離，離心,分去水層和溶劑層交界處的變性蛋白質(zhì)。日本學(xué)者用Sepharose6B、Sephacryls200和S500、DEAETayopearl650M等色譜柱對(duì)黑木耳粗多糖進(jìn)行反復(fù)分離純化，并經(jīng)透析和SephadexG10處理，最后分出7種均一性多糖。超濾膜的另一特點(diǎn)是由于受滲透壓的阻礙作用小,所以在相當(dāng)?shù)偷膲毫Σ睿▇）下,仍具有高流通率。申建和[24]等人經(jīng)對(duì)家兔實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)黑木耳多糖(AA)可明顯延長(zhǎng)特異性血栓及纖維蛋白血栓的形成時(shí)間,縮短血栓長(zhǎng)度,減輕血栓濕重和干重,減少血小板數(shù),降低血小板粘附率和血液粘度,并可明顯縮短豚鼠有球血蛋白的溶解時(shí)間,降低血漿蛋白含量,升高纖溶酶活性。酸浸提法和堿浸提法容易使部分多糖發(fā)生水解,破壞多糖的活性結(jié)構(gòu)、減少多糖得率。H2O2檢出用高錳酸鉀法。另外,醇洗及醚洗過(guò)程中,減壓抽干時(shí)用薄膜覆蓋樣品,減少空氣接觸,也能防止顏色加深。但是酶的價(jià)格較高,對(duì)實(shí)驗(yàn)條件要求較高，為使酶發(fā)揮最大作用，需先通過(guò)實(shí)驗(yàn)確定通過(guò)最適溫度、pH及最適作用時(shí)間等。結(jié)果表明，水溶性黑木耳多糖注射劑量50mg/kg和200mg/kg對(duì)肉瘤180抑制率分別為44%和89%；堿溶性黑木耳多搪注射劑量200mg/kg對(duì)肉瘤180抑制率為31%；堿溶性黑木耳多糖注射劑量50mg/kg及堿不溶性黑木耳多搪注射劑量分別為10mg/kg、30mg/kg，對(duì)肉瘤180均無(wú)明顯抑制作用。采用超濾膜技術(shù)處理多糖具有收率高、不易破壞多糖的生物活性、能耗低等特點(diǎn)，適于工業(yè)化生產(chǎn)。此法目前最為常用，它一方面可純化多糖，另一方面還適于分離各種酸性多糖、中性多糖和粘多糖。[15]：按多糖溶液：三氟三氯乙烷1：1加入,在低溫下攪拌10分鐘左右,離心得上層水層,水層繼續(xù)用上述方法處理幾次,即得無(wú)蛋白質(zhì)的多糖溶液。%,提取時(shí)間縮短到140min,較以往的熱水浸提法和堿法提取具有明顯的優(yōu)點(diǎn)。蛋白質(zhì)含量相當(dāng)于肉類，鈣含量是肉類的約20 倍，鐵含量為各種食品之最，是一種高蛋白質(zhì)低脂的營(yíng)養(yǎng)食品，因此，稱為“素中之葷，菜中之肉”。介紹了黑木耳粗多糖經(jīng)去蛋白和脫色處理后，最后分別采用沉淀法，色譜柱法，有機(jī)溶劑浸提法，膜分離法純化多糖。因而細(xì)胞破壁技術(shù)也就成了提取生物活性成分的關(guān)鍵。此法在黑木耳多糖的提取中也得到了很好的應(yīng)用。此法會(huì)引起某些多糖的降解[16]。[7]: 稱取干燥后的黑木耳50g,經(jīng)石油醚300mL于60℃回流脫脂2h。純化除采用上述方法外，還有超過(guò)濾法、制備性區(qū)域電泳、活性碳柱色譜等等。吳憲瑞等人報(bào)道，%濃度黑木耳多糖培養(yǎng)基中飼養(yǎng)，40d后逐個(gè)試驗(yàn)其飛翔能力，與對(duì)照組比較，結(jié)果表明，黑木耳多糖能增加果蠅飛翔能力；%濃度培養(yǎng)羽化10h內(nèi)雄性果蠅成蟲(chóng)，說(shuō)明其具有延緩衰老作用?，F(xiàn)階段最為常用的破壁方法就是酶法，它能很有效的分解細(xì)胞壁，結(jié)果大大提高了多糖的收得率。 感謝班主任張雪松老師，三年的生活相處不久，卻從您身上學(xué)到了太多，必將終身受益。所以本是一種較為有效可行的方法。而血乳酸及血尿氮水平顯著低于對(duì)照組。吳憲瑞[1]等人用黑木耳多糖給正常小鼠注射, 可產(chǎn)生隨劑量加大而增強(qiáng)的降血糖作用, 能明顯增強(qiáng)小鼠胰島素分泌功能。目前應(yīng)用較多的是超濾和微濾技術(shù)。[17]包括分部沉淀法、鹽析法、金屬絡(luò)合物法和季銨鹽沉淀法。 超臨界流體萃取超臨界流體萃?。╯upercritical fluids extraction，SCFE）是20世紀(jì)90年代發(fā)展起來(lái)的一項(xiàng)新型提取技術(shù)，利用超臨界流體（supercritical fluids，SCF）為萃取劑，從液體或固體中萃取目標(biāo)組分。[7]: ,于50℃ h,其他步驟同“熱水浸提法”,% 。吳瑞憲[2]對(duì)黑木耳的營(yíng)養(yǎng)成分做了全面的分析,發(fā)現(xiàn)它富含大量的糖類和蛋白質(zhì),同時(shí)也是一種鈣和鐵含量較高的食品。我國(guó)黑木耳資源豐富, 為開(kāi)發(fā)應(yīng)用黑木耳提供了有利的條件。此法所需提取劑蒸餾水經(jīng)濟(jì)易得,但是需經(jīng)多次浸提,得率仍然很低,而且費(fèi)時(shí)費(fèi)料。超臨界流體萃取法雖然在得率(%)上稍高于微波輔助萃取法,但設(shè)備復(fù)雜,需要高壓力容器,投資成本較高。本試驗(yàn)采用了H2O2方法脫色，過(guò)氧化氫是一種無(wú)色無(wú)臭的液體，可與水以任何比例混合，它氧化性較強(qiáng)，酸性較弱，通常認(rèn)為，過(guò)氧化氫的脫色原理是它在水溶液中電離出的過(guò)氧氫根離子HO2能夠與色素結(jié)合，使之脫色。濾餅依次用無(wú)水乙醇、丙酮、乙醚4次洗滌,干燥,%。給小鼠皮下注射，測(cè)定吞噬雞紅細(xì)胞數(shù)。d)，連續(xù)灌胃20d，考察黑木耳粗多糖對(duì)小鼠耐缺氧時(shí)間、力竭游泳時(shí)間等多項(xiàng)生理指標(biāo)的影響。從去蛋白的效果來(lái)看, 完全用Sevag法去蛋白處理, 起碼要重復(fù)進(jìn)行8次,才能基本去除蛋白。 感謝我的朋友和06生物技術(shù)及應(yīng)用（1）班的全體同學(xué)，他們的支持和情感，是我三年大學(xué)中最大的財(cái)富。因?yàn)閭鹘y(tǒng)的Sevag法不能很好的去除黑木耳粗多糖中的蛋白質(zhì)、膠質(zhì)、色素等