【正文】 ??? TA(1)計(jì)算吸光系數(shù) a 溶液中 Nb的濃度為 )( 1336?????? Lgc用氯磺酚分光光度法測(cè)定鈮 , 50ml溶液中含鈮 ?g, 用 %, 計(jì)算吸光系數(shù) a, 摩爾吸光系數(shù) ? 。 如 用 (NH4)2S2O8將 Mn2+氧化為 MnO4時(shí)，試劑和樣品都無(wú)色，因此可用蒸餾水作參比液。 (4) carbonyl pounds ① Saturated Aldehydes and Ketones 275～ 295nm: weak R band(ε～ 20)， Y=H,R n → s* 180190nm p → p* 150160nm n → p* 275295nm OCRY② Y= NH2,OH,OR Auxochrome p?p共軛 K帶 紅移， R 帶 蘭 移； R帶 ?max =205nm ； ??10100 K K R R p p p* n p* ③ ?,? Unsaturated Aldehydes and Ketones K帶紅移： 177?250nm R 帶紅移： 290?310nm 177nm p Ocp p* p p p* p* n c Occp* n 10。 計(jì)算： 若分子中僅含一，二，三，四價(jià)元素 (H， O， N， C)，則可按下式進(jìn)行不飽和度的計(jì)算： ? = （ 2+2n4 +n3 –n1） /2 n4， n3， n1分別為分子中四價(jià)、三價(jià)、一價(jià)元素?cái)?shù)目。 設(shè)：待測(cè)溶液濃度為 cx， 標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為 cs(cs cx)。 (2) Comparison with standard spectra。 在 共軛 體系中， p?p*躍遷產(chǎn)生的吸收帶為？？？。因 此，對(duì)于不同的反應(yīng)，應(yīng)通過(guò)實(shí)驗(yàn)找出適宜的溫 度范圍。 c: concentration ? If the concentration is denoted in g/L, k is called as adsorption effiecient, and denoted as a ? If the concentration is denoted in mol/L, k is called as molar adsorption effiecient, and denoted as ? Larger ? , Higher of the sensitivity of the method. 與波長(zhǎng)有關(guān) ， 因此 ， ? 常以 ??表示 。 Simultaneous detection of Ferulic acid and Gastrodin by HPLC RPHPLC 270 nm 標(biāo)準(zhǔn)品 323 nm 標(biāo)準(zhǔn)品 270 nm 樣品 323 nm 樣品 Melamine Mobile phase: hepane sulfonic sodium water solution: acetonitrile Phenomenex. Luna C8 ( . 250mm, 5μm) 。 Examples： C H3C = OC H3? m a x 2 7 9 n m ( ? 1 5 )? m a x 2 9 1 n m ( ? 1 1 )OC H3 C HC H2= C H C HO? m a x ( R ) 3 1 5 n m ( ? 1 4 )? m a x ( R ) 3 1 9 n m ( ? 5 0 )C C H3Oacetone acrylaldehyde acetaldehyde acetophenone ii) Kband （ from German： konjuierte). It is formed byπ→π * transition in conjugated system, and the most mon band in UVvis. 特點(diǎn)： ① λmax 210－ 270nm， εmax＞ 10000； ② 溶劑極性 ↑時(shí) ， λmax不變 (雙烯 )或發(fā)生紅移 (烯酮 )。 M + R ? MR 試液 顯色劑 有色化合物 A CR a b A CR a b A CR (a) (b) (c) 圖 (a)、 (b) 可知顯色劑濃度在 a~b 范圍內(nèi)，吸 光度比較穩(wěn)定， 因此顯色劑濃度大小要嚴(yán)格控制 在 a~b之間。 總之，參比液的選擇原則：使試液的吸光度 真正反映待測(cè)物的濃度。 (c)如果發(fā)色團(tuán)具有 R帶 ， 還可見到紅移的弱 R帶 影響的大小與發(fā)色基團(tuán)的吸電子能力有關(guān) ， 吸電子能力越強(qiáng) ， 影響越大 ， 其順序?yàn)? － NO2＞－ CHO＞－ COCH3＞－ COOH＞－ CN－ 、－ COO－ ＞－ SO2NH2＞－ NH3+ ii) disubstituted benzene P356 a) one chromophore（ —NO2， —C=O） one auxochrome（如 —OH， —OCH3， —X） 對(duì)位 : synergistic effect, λmax: red shift. 間位 或 鄰位 : 區(qū)別很小 . N O 2 N H 2N H 2N O 2NH2NO2NH2NO2 260nm 280nm 380nm 280nm b) both are chromophores, or both are auxochromes, 由于效應(yīng)相同 ， 兩個(gè)基團(tuán)不能協(xié)同 ， 則吸收峰不超過(guò)單取代時(shí)的波長(zhǎng) ， 且鄰 、 間 、 對(duì)三個(gè)異構(gòu)體的波長(zhǎng)也相近 。 （ 2） multiponent ⑴ 若各組分的吸收曲線互不重疊，則可在各自最大吸收波長(zhǎng)處分別進(jìn)行測(cè)定。 ⑵ 若各組分的吸收曲線互有重疊，則可根據(jù)吸光度的加合性求解聯(lián)立方程組得出各組分的含量。 取代苯吸收波長(zhǎng)計(jì)算 P357 例 3 基本值： 246 鄰位環(huán)殘基 +3 對(duì)位 —OCH3 +25 274 nm （ 276nm） 例 4 基本值： 246 鄰位環(huán)殘基 + 3 鄰位 —OH取代 + 7 間位 CI取代 + 0 256nm （ 257nm） 例 5 基本值： 246 鄰位環(huán)殘基 + 3 間位 —OCH3取代 +7 對(duì)位 —OCH3取代 +25 281nm（ 278nm） OH 3C OOO HC IC O O C 2H 5CH 3OH 3COO UV of Inanic Compounds d Mn+ + Lb M(n+1)+—L(b1) h? {Fe3+—SCN]2+ [Fe2+—SCN]2+ h? 167。 4 ultraviolet spectrometer P329 ? 1) Light source ? Deuterium and hydrogen lamps ? W filament lamp ? Xe arc lamps ? 2) Monochromator ? 與原子吸收光度儀不同，在 UVVis光度計(jì)中，單色器通常置于吸收池的前面！ （可防止強(qiáng)光照射引起吸收池中一些物質(zhì)的分解） ? 3) Sample containers – Cuvettes ? Plastic ? Glass ? Quartz ? 4)Detectors: 硒光電池、 PMT、 PDA 光源 單色器 樣品室 檢測(cè)器 顯示 general process (1) (2) (3) 雙波長(zhǎng)分光度計(jì) 這表明 ， 試樣溶液濃度與兩個(gè)波長(zhǎng)處的吸光度差成正比 。 (2) 顯色劑用量 (3) pH