【正文】 用的核苷酸序列， 包括位于編碼區(qū)上游的 RNA 聚合酶結(jié)合位點等。 注意 三、將目的基因?qū)胧荏w細胞 （一）轉(zhuǎn)化： （二）方法 將目的基因?qū)? 植物細胞 將目的基因?qū)? 動物細胞 將目的基因?qū)? 微生物細胞 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 基因槍法 花粉管通道法 —— 顯微注射法 —— 感受態(tài)細胞 目的基因進入 _________內(nèi)，并且在 受體細胞內(nèi)維持 _____和 _____的過程 受體細胞 穩(wěn)定 表達 將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ǎ? （ 1） 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 ① 農(nóng)桿菌特點： 易感染雙子葉植物和裸子植物，對大多數(shù)單子葉植物沒有感染能力 ② 原理： Ti質(zhì)粒上的 TDNA可以轉(zhuǎn)移到受體細胞，并整合到受體細胞染色體的 DNA上。 c、延伸 （ 70℃ 75℃ ）：在 Taq酶的作用下， 合成與模板互補的 ________。 在基因操作的基本步驟中 ， 不進行堿基互補配對的步驟是 （ ） A、 人工合成目的基因 B、 目的基因與運載體結(jié)合 C、 將目的基因?qū)胧荏w細胞 D、 目的基因的檢測和表達 C 練習 知識點一： 非編碼區(qū) 非編碼區(qū) 編碼區(qū) 編碼區(qū)上游 編碼區(qū)下游 與 RNA聚合酶結(jié)合位點 啟動子 終止子 啟動子： 位于基因首端一段能與 RNA聚合酶結(jié)合并能起始 mRNA合成的序列。 （ 2）將重組 DNA分子導入水稻受體細胞的常用方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法和 法。 使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并可進行遺傳、表達和發(fā)揮作用 載體進入受體細胞穩(wěn)定表達，才能實現(xiàn)一種生物的基因在另一種生物中的轉(zhuǎn)化。 （ 1）獲得耐鹽基因后，構(gòu)建重組 DNA分子所用的限制性內(nèi)切酶作用于圖中的 處，DNA連接酶作用于 處。 RNA聚合酶 :能夠識別啟動子上的結(jié)合位點并與其結(jié)合的一種蛋白質(zhì) .(以模板轉(zhuǎn)錄然后脫落 ) ① 不能轉(zhuǎn)錄為信使 RNA，不能 編碼蛋白質(zhì)。 它們各自的作用是什么 ? 基因表達載體的組成： 復制原點 +目的基因 +啟動子 +終止子 +標記基因 它們各自的作用是什么 ? 啟動子： 位于基因的首端的一段特殊的 DNA片斷，它是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，有了它才能 驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出 mRNA，最終獲得蛋白質(zhì) 終止子： 位于基因的尾端的一段特殊的 DNA片斷， 能終止 mRNA的轉(zhuǎn)錄 標記基因 的作用是 為了 鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將有目的基因的細胞篩選出來 ① 載體 與 表達載體 的區(qū)別：二者都有標記基因和復制原點兩部分 DNA片段。 蛋白質(zhì)的氨基酸序列 mRNA的核苷酸序