【正文】 是用蛋白質(zhì)工程設(shè)計(jì)速效胰島素的生產(chǎn)過程，請(qǐng)據(jù)圖回答有關(guān)問題： ( 1 ) 構(gòu)建新的蛋白質(zhì)模型是蛋白質(zhì)工程的關(guān)鍵，圖中構(gòu)建新的胰島素模型的主要依據(jù)是 _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ 。 ( 3 ) 將基因表達(dá)載體導(dǎo)入細(xì)菌 B 之前，要將細(xì)菌 B 放入一定濃度的 _ _ _ _ _ _ _ _ 溶液中處理，使之成為感受態(tài)的細(xì)菌。 ( 2 ) 基因治療后，缺陷基因沒有改變，基因治療是把正?；?qū)胧荏w細(xì)胞中，以表達(dá)正常產(chǎn)物從而治療疾病，對(duì)原來細(xì)胞中存在缺陷的基因沒有清除或改變。 3 ． 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 生物種類 植物 動(dòng)物 微生物 常用方法 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 顯微注射技術(shù) 感受態(tài)細(xì)胞法 受體細(xì)胞 體細(xì)胞 受精卵 原核細(xì)胞 轉(zhuǎn)化過程 將目的基因插入到 Ti 質(zhì)粒的T D N A 上 → 農(nóng)桿菌 → 導(dǎo)入植物細(xì)胞 → 整合到受體細(xì)胞的 DNA上 → 表達(dá) 將含有目的基因的表達(dá)載體提純 → 取卵( 受精卵 ) → 顯微注射 → 受精卵發(fā)育 → 獲得具有新性狀的動(dòng)物 Ca2 ＋處理細(xì)胞→ 感受態(tài)細(xì)胞→ 重組表達(dá)載體 DNA 分子與感受態(tài)細(xì)胞混合 → 感受態(tài)細(xì)胞吸收 DNA 分子 4 ．目的基因的檢測(cè)與鑒定 特 別 提 醒 ( 1 ) 目的基因的插入位點(diǎn)不是隨意的：基因表達(dá)需要啟動(dòng)子與終止子的調(diào)控，所以目的基因應(yīng)插入到啟動(dòng)子 與終止子之間的部位。 ( 2 ) 蛋白質(zhì)工 程的改造對(duì)象：改造蛋白質(zhì)的 結(jié)構(gòu) ，本質(zhì)上是改造控制該蛋白質(zhì)合成的 基因 的結(jié)構(gòu)。 ( 2 ) 限制酶切割位點(diǎn)所處的位置必須是在所需的標(biāo)記基因之外，這樣才能保證標(biāo)記基因的完整性，有利于對(duì)目的基因的檢測(cè)。 ( 3 ) 導(dǎo)入重組質(zhì)粒 2 以后，往往還需要進(jìn)行檢測(cè)和篩選，可用 _ _ _ _ _ _ _ _ 制成探針，檢測(cè)是否導(dǎo)入了重組基因，在 培養(yǎng)基中加入 _ _ _ _ _ _ _ _ 可將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來。明確目的基因的插入位點(diǎn)是在標(biāo)記基因內(nèi)部還是標(biāo)記基因之外。 ( 3 ) 將基因表達(dá)載體導(dǎo)入細(xì)菌 B 之前，要將細(xì)菌 B 放入一定濃度的 C a C l2溶液中處理，使之成為感受態(tài)的細(xì)菌。 ( 4 ) 由新的蛋白質(zhì)模型到構(gòu)建新的基因，其基本設(shè)計(jì)思路是根據(jù)新的蛋白質(zhì)中氨基酸的序列，推測(cè)出基因中的脫氧核苷酸序列，然后用 DNA 合成儀直接合成出新的基因。 答案 ( 1 ) 目的基因 一種限制酶只能識(shí)別一種特定的脫氧核苷酸序列，并在特定的位點(diǎn)切割 DNA 分子 重 組 DNA ( 2 ) P C R 限制酶、 DNA 連接酶 ( 3 ) 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 顯微注射法 受精卵 ( 4 ) 從轉(zhuǎn)基因山羊的乳汁中提取蛋白質(zhì)，用相應(yīng)的抗體進(jìn)行抗原一抗體雜交。 回答下列問題： ( 1 ) 資料甲屬于基因工程的范疇。 ( 3 ) 由于同一物種的生物生理特性相同，因此進(jìn)行胚胎移植時(shí)，受體與供體物種相同，易于成功；兔甲是供胚胎的個(gè)體，稱為供體，兔乙是接受胚胎的個(gè)體，稱為受體。新課標(biāo)全國(guó)卷 Ⅰ ? 閱讀下列 材料： 資料甲： 科學(xué)家將牛生長(zhǎng)激素基因?qū)胄∈笫芫阎校玫搅梭w型巨大的 “ 超級(jí)小鼠 ” ；科學(xué)家采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法培育出轉(zhuǎn)基因煙草。熟悉各個(gè)步驟是正 確解答本題的關(guān)鍵。 ( 4 ) 圖解中從新的胰島素模型到新的胰島素基因的基本思路是什么？ ( 5 ) 下列關(guān)于蛋白質(zhì)工程的說法錯(cuò)誤的是 _ _ _ _ _ _ _ _ 。 ( 5 ) 將得到的大腸桿菌 B 涂 布在一個(gè)含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上，能夠生長(zhǎng)的，說明已導(dǎo)入了 _ _ _ _ _ _ _ _ ，反之則沒有導(dǎo)入。廣東卷 ? 從某海洋動(dòng)物中獲得一基因，其表達(dá)產(chǎn)物為一種抗菌性和溶血性均較強(qiáng)的多肽 P1 。用油菜素內(nèi)酯處理后，許多參與農(nóng)藥降解的基因 ( 如P 4 5 0 基因和紅霉素抗性基因 ) 表達(dá)和酶活性都得到提高，在這些基因 “ 指導(dǎo) ” 下合成的蛋白酶能把農(nóng)藥逐漸轉(zhuǎn)化為水溶性物質(zhì)或低毒甚至無(wú)毒物質(zhì)，有的則被直接排出體外。 ( 2 ) 限制酶不切割自身 DN A 的原因是原核生物中不存在該酶的識(shí)別序列或識(shí)別序列已經(jīng)被修飾。 ( 3 ) 限制酶是一類酶，而不是一種酶。某 課題組進(jìn)一步進(jìn)行了如下的實(shí)驗(yàn)操作，請(qǐng)回答： ( 1 ) 獲 得 油 菜 素 內(nèi) 酯 合 成 酶 基 因 的 方 法 有_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ 。目前在P1 的基礎(chǔ)上研發(fā)抗菌性強(qiáng)但溶血性弱的多肽藥物，首先要做的是 ( ) A ．合成編碼目的肽的 DNA 片段 B ．構(gòu)建含目的肽 DNA 片段的表達(dá)載體 C ．依據(jù) P1 氨基酸序列設(shè)計(jì)多條模擬肽 D ．篩選出具有優(yōu)良活性的模擬肽作為目的肽 解析： 該基因的表達(dá)產(chǎn)物多肽 P1 的抗菌性和溶血性均很強(qiáng)，要研發(fā)出抗菌性強(qiáng)但溶血性弱的多肽藥物，首先應(yīng)根據(jù)P1 的氨基酸序列設(shè)計(jì)模擬肽，再構(gòu)建相應(yīng)的 DNA 片段。 解析 ( 1 ) 構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，必須有啟動(dòng)子、目的基因、終止子以及標(biāo)記基因。 A ．蛋白質(zhì)工程能定向改造蛋白質(zhì)其結(jié)構(gòu)，使之更加符合人類需要 B ．蛋白質(zhì)工程是在分子水平上對(duì)蛋白質(zhì)分子直接進(jìn)行操作，定向改變其結(jié)構(gòu) C ．蛋白質(zhì)工程能產(chǎn)生自然界中不存在的新型蛋白質(zhì)分子 D ．蛋白質(zhì)工程與基因工程密不可分，又