【正文】 versible inhibition) I 以 共價(jià)鍵 與 E活性中心上的必需基團(tuán) 結(jié)合，從而抑制酶活性。 ? Vmax和 k3(kcat) ? Kcat/Km 表示酶的實(shí)際催化效率 Kcat/Km是 [E]和 S反應(yīng)形成產(chǎn)物的 表觀二級(jí)速率常數(shù)，也稱為專一性常數(shù)。布氏提出穩(wěn)態(tài)理論。 ? 反應(yīng)的平衡常數(shù)與酶的活性無(wú)關(guān)，與反應(yīng)速率的大小無(wú)關(guān)，而與反應(yīng)體系的溫度、反應(yīng)物及產(chǎn)物濃度有關(guān)。 Km值的大小判斷 分支代謝的流向。 溫度系數(shù) Q10：溫度升高 10℃ ，反應(yīng)速度與原來(lái)的反應(yīng)速度之比，大多數(shù)酶的 Q10一般為 2。Ｋ ｍ 為ＥＳ的解離平衡常數(shù) K i = k i 2k i 1[E][ I ][EI ]=Ｅ ｆ： 游離酶的濃度 〔 Ｅ 〕 ：酶的總濃度 〔 Ｅ 〕 ＝ 〔 Ｅ ｆ 〕 ＋ 〔 ＥＳ 〕 ＋ 〔 ＥＩ 〕 [ I ]K iV m a xK m[ S ]v1 = 1 +1 +V m a x1)K ]I[1(KK]S[K ]S[Vvimmmm ax ??????與標(biāo)準(zhǔn)方程的比較 當(dāng) [ I ]→0 時(shí)，方程還原成米氏方程。 非競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用特點(diǎn) 1. i與 S結(jié)構(gòu)不相似； 2. i與 S互不干擾同時(shí)與 酶 結(jié)合； 3. 抑制程度只取決于 [i]的濃度； 4. ↑[S] ，不能去除抑制作用。 Vm= (三） . pH對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響 反應(yīng)速度p H最 適 p H6 8 1 00● 最適 pH： 酶具有最大催化活性時(shí)的環(huán)境 pH。如酶能催化幾種不同的底物，對(duì)每種底物都 有一個(gè)特定的 Km值，其中 Km值最小的稱該酶的最適底物 。 ?研究一種因素的影響時(shí)，其余各因素均恒定。 單位是 mol/l。 COOH ? CH3CO ■ 類型 ： – 競(jìng)爭(zhēng)性抑制 (petitive inhibition) – 非競(jìng)爭(zhēng)性抑制 (nonpetitive inhibition) – 反競(jìng)爭(zhēng)性抑制 ( unpetitive inhibition) (reversible inhibition) ① .競(jìng)爭(zhēng)性抑制 ? 抑制劑具有與底物類似的結(jié)構(gòu)，競(jìng)爭(zhēng)酶的活性中心，并與酶形成可逆的 EI復(fù)合物，阻止底物與酶結(jié)合。 ? 。 （ 五） .酶濃度對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響 ? 當(dāng) [S]?? [ E] ，反應(yīng)速度對(duì)酶濃度呈正比。 Vmax=K3 [E] ? K3代表酶被底物飽和時(shí)每秒鐘每個(gè)酶分子轉(zhuǎn)換底物的分子數(shù)，稱為 轉(zhuǎn)換數(shù)或催化常數(shù) ， （ catalytic constant,Kcat）。 [S] V Vmax 當(dāng)?shù)孜餄舛雀哌_(dá)一定程度 反應(yīng)速度不再增加，達(dá)最大速度；反應(yīng)為零級(jí)反應(yīng) [S] V Vmax 酶反應(yīng)的速度在不停地變，實(shí)驗(yàn)上只有初速度的測(cè)定才有意義。 [S] V Vmax 隨著底物濃度的增高 反應(yīng)速度不再成正比例加速；反應(yīng)為混合級(jí)反應(yīng)。 ? Vmax不是一個(gè)常數(shù)，它取決于酶的濃度，它是一個(gè)酶反應(yīng)體系的速度的極限值。 在一定范圍內(nèi)，反應(yīng)速度達(dá)到最大時(shí)對(duì)應(yīng)的溫度稱為該酶促反應(yīng)的最適溫度 (optimum temperature). 最適溫 不是酶的特征性常數(shù)。 競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑有： 丙二酸 、 草酰乙酸 等 琥珀酸脫氫酶 磺胺類藥物的競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用 磺胺藥與 PABA相互競(jìng)爭(zhēng)與 FH2合成酶結(jié)合 (paminobenzoic acid, PABA） sulfa drugs PABA 二氫蝶呤啶 谷氨酸 FH2合成酶 磺胺類藥物 FH2 FH2還原酶 MTX FH4 相互競(jìng)爭(zhēng) 相互競(jìng)爭(zhēng) 磺胺類藥物的抑菌機(jī)理 （ ） （ ） 氨甲蝶呤（ methotrexate, MTX） 促進(jìn)核酸 的合成 ? 基本要求 ? 。 1. i與 S結(jié)構(gòu)相似； 2. i與 S互相競(jìng)爭(zhēng)與酶活