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第十三章紫外——可見(jiàn)分光光度法(留存版)

  

【正文】 9μg ? 氫燈發(fā)射 150~ 400nm波長(zhǎng)的光 , 適用于200~ 400nm波長(zhǎng)范圍 。第十三章 紫外 —— 可見(jiàn)分光光度法 ? 電磁輻射按其波長(zhǎng)可分為不同區(qū)域 。 ? 輔助設(shè)備 聚光透鏡、穩(wěn)壓電源 ? 單色器 ( monochromator) : ? 作用 復(fù)合光分解成按波長(zhǎng)順序排列的單色光 ? 組成 入射狹縫 、 色散元件 、 準(zhǔn)直鏡 。mL1 ? 谷物蛋白質(zhì)的測(cè)定 ? 植物樣品中可溶性糖的測(cè)定 ? 酶活性測(cè)定 二 多組分的測(cè)定 ? 吸收峰互不重疊 ? 吸收峰相互重疊 三、配合物組成的測(cè)定 摩爾比法 連續(xù)變化法 。 ? 吸收池 ( absorption cell, 比色皿 ) : ? 材料 無(wú)色光學(xué)玻璃 、 熔融石英 ? 形狀 長(zhǎng)方形 ? 規(guī)格 、 1cm、 2cm、 3cm和 5cm ? 要求 相同規(guī)格的兩個(gè)吸收池的透光度相差應(yīng)小于 % ? 注意事項(xiàng) 保持透光面干燥 、 潔凈 , 不可用手直接接觸 、 不能磨擦透光面 ? 檢測(cè)器 ( detector) : ? 作用 透射光信號(hào)轉(zhuǎn)換成電訊號(hào) 。 1 基本原理 一、 分子能級(jí) (量 )與電磁輻射 二、 光的性質(zhì) 三、 物質(zhì)的顏色 與光的關(guān)系 四、 物質(zhì)吸收光的定律 一 、 分子能級(jí) (量 )與電磁輻射 ? 分子的能量包括: 價(jià)電子能量( Ee) 1~ 20eV 分子內(nèi)原子在平衡位置的振動(dòng)能量( Ev) ~ 1eV 分子繞重心轉(zhuǎn)動(dòng)的能量( Er) 小于 E = Ee + Ev + Er 分子吸收光譜的特點(diǎn):帶狀光譜 二 光的性質(zhì) ? 單色光 :只有一種波長(zhǎng)的光 ? 復(fù)合光 :由兩種及兩種以上波長(zhǎng)的光組成的 光 ? 白光:紅、橙、黃、綠、青、藍(lán)、紫等顏色的光按一定比例混合而成 ? 互補(bǔ)色光 :兩種顏色的光按這一比例混合也可得到白光 白光 綠
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