【正文】 . 5 底物酪蛋白用量對酸性和中性蛋白酶活力的影響 ..................... 6 不同稀釋倍數(shù)的樣品酶液對酸性和中性蛋白酶活力的影響 ............. 6 對酸性和中性蛋白酶活力穩(wěn)定性的測定 ............................. 7 結(jié)論 ................................................................ 7 參考文獻(xiàn) ............................................................ 8 浙江經(jīng)貿(mào)職業(yè)技術(shù)學(xué)院畢業(yè)論文（設(shè)計） 第 1 頁 引言 蛋白酶是飼料工業(yè)中比較常見的一種飼用酶，蛋白酶是可以使蛋白質(zhì)水解成α氨基酸的酶，蛋白酶分為酸性酶、堿性酶、中性酶，酸性酶適宜 pH 值為 25，產(chǎn)生該酶的微生物主要有黑曲霉、根霉、米曲霉；中性蛋白酶的最適宜 pH 值為7 左右，活力值最高時約在 450℃ ， 主要由霉菌和細(xì)菌產(chǎn)生，其測定分析方法主要有福林顯色法、紫外光譜法。 乙液：稱取 70%乳酸鈉 16g，加水稀釋并定容至 1000mL。 含中性蛋白酶的添加劑飼料：稱取 2g 樣品，精致 ，于 100mL 容量瓶中，加入 90mL 蒸餾水或磷酸緩沖液，搖勻后置 40℃ 水浴浸提 30min，取出冷卻后定容至 100mL，過濾。新配制的福林試劑制作新的標(biāo)準(zhǔn)曲線。 浙江經(jīng)貿(mào)職業(yè)技術(shù)學(xué)院畢業(yè)論文（設(shè)計） 第 8 頁 參考文獻(xiàn) [1]趙林果 ． 復(fù)合酶制劑降解植物性飼料的研究 [J]． 飼料研究 ， 2021， 1(1)： 2． [2]張學(xué)英 ． 蛋白酶及其活力的測定 [J]． 2021， 28(6)： 13． [3]張寒俊，劉大川，楊國燕 ． 紫外光譜法定量測定不同蛋白酶活力的研究 [J]． 糧食與飼料工業(yè)， 2021， 21(9)： 36． [4]雷紅松，張學(xué)英 ． 標(biāo)準(zhǔn)曲線法在分析檢測中的應(yīng)用及討論 [J]． 釀酒科技， 2021，18(9)： 6465． [5]郝欣，肖冬光，郭學(xué)武，王妍 ． 純生啤酒中酸性蛋白酶測定方法的優(yōu)化 [J]． 釀酒科技 ， 2021， 26(11)： 97101． 。以吸光度為橫坐標(biāo)，以酪氨酸量為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，獲得線性回歸方程 ,見圖。 樣品酶液的制備 含酸性蛋白酶的添加劑飼料：稱取 2g 樣品，精致 ，于 100mL 容量瓶中，加入 90mL 蒸餾水或乳酸緩沖液，搖勻后置 40℃ 水浴浸提 30min，取出冷卻后定容至 100mL，過濾。使用時，以 1 份福林試劑與 2 份水混勻，制成稀福林試劑。本實(shí)驗確定了樣品的提取液為蒸餾水、底物酪蛋白用量為 1mL、樣品的稀釋倍數(shù)（酸性蛋白酶為 15002500，中性蛋白酶為 5002021），并對樣品中酸性和中性蛋白酶活力的穩(wěn)定性進(jìn)行測定，測得的穩(wěn)定性較高。 稱取無水碳酸鈉 ，用水溶解并定容至 1000mL。冷卻后轉(zhuǎn)入 100mL 容量瓶中，用相應(yīng)緩沖溶液定容至刻度。）℃水浴中放置 20min，取出，迅速冷卻至室溫。本實(shí)驗選擇稀釋倍數(shù)為 1000， 對中性蛋白酶活力進(jìn)行測定。 表 底物酪蛋白用量對酸性和中性蛋白酶活力的影響 項目 底物酪蛋白 （ mL） 1 2 酸性蛋白酶活力