【正文】 配制方法如表F1，牛、羊和豬補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)判定標(biāo)準(zhǔn)均相同。表D2 用稀釋液將抗原稀釋成1：1：50、1：71：100、1：150、1：200、1：300、1：400和1：500等稀釋度。 即此例補(bǔ)體應(yīng)作40倍稀釋，即為一個補(bǔ)體單位?！⊙a(bǔ)體效價(jià)測定 —.9 .3　牛、馬、鹿、駱駝1：50血清稀釋，豬、山羊、綿羊、狗1：25血清稀釋，出現(xiàn)“++”以上凝集現(xiàn)象時，受檢血清判定為可疑反應(yīng)。 a)++++菌體完全凝集，100％下沉，上層液體100％清亮； a)陰性血清對照：陰性血清的稀釋和加抗原的方法與受檢血清同。.1　。3　乳牛布病全乳環(huán)狀試驗(yàn)　材料準(zhǔn)備　布病全乳環(huán)狀抗原 本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的虎紅平板凝集試驗(yàn)、乳牛全乳環(huán)狀試驗(yàn)適用于家畜布病田間篩選試驗(yàn)和乳牛場布病的監(jiān)測及診斷泌乳母牛布病的初篩試驗(yàn)；試管凝集試驗(yàn)和補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)適用于診斷羊種、牛種和豬種布病感染的家畜。 a)強(qiáng)陽性反應(yīng)(+++)，乳柱上層乳脂形成明顯紅色的環(huán)帶，乳柱白色，臨界分明；.2　第2—。 ％。 ，：100的基礎(chǔ)稀釋液，按表B1方法作進(jìn)一步稀釋。 —+ （C1）考慮補(bǔ)體性質(zhì)不穩(wěn)定，操作過程中效價(jià)會降低，正式試驗(yàn)時使用濃度比補(bǔ)體效價(jià)要大10%左右，本例補(bǔ)體工作單位作1：36稀釋?！“幢鞤1加入各種成份，并經(jīng)37℃—38℃20min水浴2次。表F1 例舉范例如表D2 補(bǔ)體效價(jià)測定 選擇健康豚鼠3—5只，于使用前一天早晨飼喂前或停食后6h從心臟采血，分離血清后混合保存于普通冰箱中，也可從獸醫(yī)生物藥品廠購買凍干補(bǔ)體，使用前加稀釋液恢復(fù)原量后使用。 — 在主試驗(yàn)時溶血素的工作效價(jià)為滴定效價(jià)的倍量或稱二單位溶血素，則工作效價(jià)為1500倍稀釋。 0—40%溶血判為陽性反應(yīng)； 第一次判定，要求不加抗原的陽性血清對照管，不加或加抗原的陰性血清對照管，抗原對照管呈完全溶血反應(yīng)。.7 以羊和豬為例，每份血清用4支凝集試管。4　動物布病試管凝集試驗(yàn)　材料準(zhǔn)備　稀釋液　受檢血清在4min內(nèi)出現(xiàn)肉眼可見凝集現(xiàn)象者判為陽性(+)，無凝集現(xiàn)象，呈均勻粉紅色者判為陰性(—)。 %石炭酸生理鹽水。.3??；加入第1管內(nèi)，并混合均勻。充分振蕩混勻。 mL血清被檢血清對照管陽性血清陰性血清抗原溶血素補(bǔ)體血清加入量000稀釋液0000抗原00000工作量補(bǔ)體037℃—38℃水浴20min二單位溶血素02．5％紅細(xì)胞37℃—38℃水浴20min判定結(jié)果舉例++++—++++————++++++++ 50%一90%溶血判為可疑反應(yīng)；表B1ML管號12345678910對照1112131：20補(bǔ)體加入量00稀釋液加入量工作量抗原加入量(不加抗原量加稀釋液)