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本科畢業(yè)設計-洋蔥中黃酮類化合物提取方法研究(專業(yè)版)

2025-01-26 20:21上一頁面

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【正文】 濱州學院本科畢業(yè)設計(論文) 12 90min后,兩體系傳質(zhì)推動力下降,黃酮類物質(zhì)緩慢浸出。 乙醇浸提時間對黃酮類化合物提取的影響:稱取 5 份分別置于 5 個試管中,各加入纖維素酶 13ml 水,在 45℃ 的水中酶解 60 分鐘,后轉(zhuǎn)入索氏提取器,加入 95%的乙醇 37ml,分別浸提 30min、 60min、 90min、 120min。 6)用紫外分光光度計測吸光度 , 用 Origin軟件制作標準曲線 , 如圖 2。 抗腫瘤活性 因癌癥是難治之癥,醫(yī)學工作者對抗癌藥物的研究態(tài)度積極,醫(yī)學研究證明類黃酮的抗癌作用主要指能夠減小甚至消除一些化學物質(zhì)的毒性,關(guān)于類黃酮的抗癌作用機理, Wattenberg[28]認為它起到一種阻斷劑的作用,因為所有的化學致癌物質(zhì)進入體內(nèi)后,要在體內(nèi)一種依賴于細胞色素的 P450 的沒的作用下活化為可隨意與DNA 反應的中間物采有致癌活性的中間物,或誘導某些酶的活性,是致癌物脫毒,也可能與那些有致癌活性的中間體結(jié)合,從而避免它們與 DNA 結(jié)合或反應。目前 Lytn等人 [19]從洋蔥中分離出 9濱州學院本科畢業(yè)設計(論文) 4 種類黃酮化合物。 超聲波提取法 超聲波 提取法的原理是利用超聲波在液體中產(chǎn)生的 ―空化效應 ‖利用機械振動破壞植物細胞壁和細胞膜結(jié)構(gòu),從而增加細胞內(nèi)物質(zhì)的釋放與溶出,超聲波使提取液不斷震蕩,加速溶劑的擴散,而且超聲波具有熱效應,可縮短提取時間,提高提取濱州學院本科畢業(yè)設計(論文) 3 率 [12]。劉世民等 [4]研究了洋蔥中類黃酮化合物的提取方法,結(jié)果表明: 90℃ 熱水浸提40min,物料比 1:3,類黃酮物質(zhì)浸出量最大,測定結(jié)果重現(xiàn)性好。研究結(jié)果表明,最佳提取條件為:酶解溫 度為45℃ ,酶解 pH值為 6—7, 酶解時間為 60min, 酶用量為 ‰ , 乙醇濃度為 70%,浸提時間為 90min。 關(guān)鍵詞 : 洋蔥;黃酮類化合物;酶解法;乙醇浸提法 濱州學院本科畢業(yè)設計(論文) II Study On Extraction of Flavones Compounds of Onion Abstract The onion, the alias onion, is a plant for the lily branch onion. In the onion includes the sulfide, a kind of flavanone, benzene third element ingredients and so on phenol pound, azotic pound, the flavonoid content are most. The research indicated that flavonoid has the very widespread pharmacological action, has the anticancer treatment analgesia, sharpens the immunity ability and so on for medicinal purposes health care function。黎乃維等 [5]用熱水提取法對料液比、提取溫度、浸提時間等因素進行正交試驗。侯冬巖等 [13]利用超聲波法以 80%乙醇,在 10℃ 水浴中超聲提取 3次,每次 5分鐘,合并濾液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā),得提取率 %。類黃酮主要有 5,7,4’–三羥黃酮、 3,5,7,3’,4’,5’–六羥基黃酮以及黃酮糖苷等 [20]。近年來眾多研究證明了洋蔥類黃酮明顯的抗癌活性。 對比實驗 1)用電子天平準確稱取兩份洋蔥皮粉末各 1g, 編號 A、 B。冷卻后測吸光度,得到浸提時間對黃酮類化合物提取率的影響關(guān)系圖 8。 圖 8 吸光度與 乙醇 浸提時間關(guān)系圖 乙醇濃度的影響 由圖 9 可以看出,隨著乙醇濃度的增加,洋蔥皮黃酮類化合物 濃度 呈現(xiàn)上升的趨勢,當乙醇溶液濃度為 70%時,黃酮類化合物的提取率最高。浸提時間繼續(xù)增加,黃酮類化合物濃度有所下降,其主要原因是當浸提時間低于 90min時,洋蔥皮中的黃 酮類化合物含量比提取溶劑里高,兩體系中的濃度差大,傳質(zhì)推動力大,所以浸出速度快。冷卻后測吸光度,得到酶用量對黃酮類化合物提取率的影響關(guān)系圖 7。 5)分別加入 4%的 NaOH 4ml, 用 50%的乙醇定容至刻度 , 搖勻 , 靜置 15min。同時,洋蔥類黃酮化合物對亞油酸過氧化、油脂過氧化以及脫氧核糖氧化損傷均具有良好的抑制作用,能明顯抑制 H2O2誘導的紅細胞氧化溶血反應和大鼠肝組織勻漿脂質(zhì)過氧化反應的發(fā)生,表明洋蔥類黃酮化合物具有很強的體外抗氧化活性,作為天然抗氧化劑和功能性食品具有較好的開發(fā)潛力 [27]。洋蔥中類黃酮化合物多存在于鱗莖及最外表皮中,是槲皮素及其衍生物,主要有黃酮類、黃酮醇類和花色素 (基本結(jié)構(gòu)式見圖 1)等。酶的最佳溫度及最佳 pH值往往在一個很小的范圍內(nèi),為使酶的活性提高到最大值,必須嚴格控制酶反應時的溫度及 pH值,溫度、 pH值等輕微改變和抑制劑 (如 Cu2 +、 Al3 +、 Hg2 +等 )的存在,都可能使酶的活性大大降低,因此對實驗設備有較高的要求;酶提取法用于工業(yè)化的中藥提取中還需綜合考慮酶濃度、底物濃度、抑制劑和激動劑等對提取物有何影響 [11]。 水浸提法 洋蔥皮中類黃酮化合物 多屬易溶于極性溶劑的化合物,最早使用冷水、熱水浸提。研究了酶解各因素對黃酮類化合物提取率的影響,找出一套最佳的提取工藝條件。 Also has falls the pressure drop blood fats, increases caps the ripple quantity, strong heart, antiheart rhythm uneven and so on pharmacological actions. In recent years, the home had about withdraws flavonoid numerously from the onion the research, the method has the water immersion formulation, the microwave extraction process, the ethyl alcohol extraction process and so on. These extraction plans used the high temperature drying method to carry on processing to the foreign onion skin, but the hyperpyrexia will affect the flavanone the extraction rate. Using enzymes method, then the onion skin with ethanol extraction of flavonoid pounds extracted Onions. The study of enzymatic hydrolysis extraction of each factor to influence of flavonoids, find a set of optimal extraction process conditions. Research results show that the best condition for: 45 degrees Celsius temperature of enzymatic hydrolysis enzyme solution, pH value for 67, enzymatic hydrolysis time for 60min, enzyme dosage for per 1,000 to 70% ethanol concentration, extraction time for 90min. Key words: Onion。實驗研究表明:用6 倍水, pH= 在水溫 60℃ 條件下浸提 2 小時,類黃酮化合物提取含量可達。白明生等 [14]利用超聲波強化提取類黃酮化合物,采用正交試驗法,確定最佳提取條件為 70%的乙醇濃度,料液比 1:20,超聲溫度 30℃ ,超聲時間 15分鐘,在此條件下類黃酮化合物得 率可達 %。王大力等 [21]利用高效液相色譜 質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù) (HPLCMS)鑒定洋蔥樣品中類黃酮化合物,結(jié)果表明為槲皮素糖苷。 Walle 等 [29]認為洋蔥中的槲皮素糖苷具有預防冠心病和癌癥的作用。 A 樣品置于燒杯中 ,加水 13ml, 然后加入 5mg 纖維素酶 , 控制溫度在 45℃ , 用 HCl 溶液調(diào)節(jié) pH 值在~ 之間 , 酶解時間 60min。 乙醇濃度對黃酮類化合物提取的 影響:稱取
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