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免疫細胞分泌研究進展(專業(yè)版)

2024-10-03 13:53上一頁面

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【正文】 而生長激素(GH)對幾乎所有免疫細胞如淋巴細胞、巨噬細胞、 NK細胞、 胸腺細胞等都有促進分化和加強功能的作用。   最近, Paumet等[23]在RBL2H3肥大細胞株上對細胞胞吐的SNARE分子機制進行了研究, 發(fā)現(xiàn)了幾種SNARE蛋白質(zhì)復合體的異構體表達,其中一種23 kDa的SNAP (SNAP23)對SNARE的形成非常重要。46。關于膜融合孔調(diào)控的分子機制研究還剛剛起步。人的中性粒白細胞是成功應用wholecell和oncell膜片鉗法進行研究的少數(shù)免疫細胞之一[10]。絲裂酶原刺激后24 h可使K電流增大。神經(jīng)遞質(zhì)的分泌與細胞鈣離子濃度緊密偶聯(lián)(與鈣離子濃度的3~4次方成正相關)。 [!]  電化學技術監(jiān)測分泌的最大優(yōu)點是時間分辨率高(ms級), 能監(jiān)測單個囊泡的釋放以及囊泡中 的遞質(zhì)含量, 且較膜電容測量更為直觀。細胞分泌的最后一步是囊泡膜與胞漿膜融合的過程,當分泌發(fā)生時細胞膜的表面積會增加, 而細胞膜的電容大小正比于細胞膜的表面積(~1 μF/cm2),因此細胞膜電容的增加就代表細胞分泌量。故而有關細胞分泌活動的研究近年在國際上形成一個新的熱點。   1amp。施加的電壓可為恒電位或三角波循環(huán)電壓,前者的優(yōu)點是時間分辨率高, 后者的優(yōu)點是能區(qū)分不同的信息分子。1amp。Na通道僅存在于少數(shù)T細胞、 T細胞株和自然殺傷細胞。2 免疫細胞分泌抗體或細胞因子的研究   經(jīng)過適當處理, 免疫細胞可應用膜片鉗測量細胞膜電容。在融合孔閃爍過程中,其電導通常<1 ns, 并且在開和關兩種狀態(tài)的大小是一致的, 這表明中性粒細胞的融合孔在低電導時不存在細胞膜脂質(zhì)的流動。 這一過程除需要激活酪氨酸激酶(tyrosine kinase)外,還需要PKC的激活來使絲氨酸和蘇氨酸磷酸化。amp。形態(tài)學研究表明,在幾乎所有免疫細胞上都有不同神經(jīng)遞質(zhì)和激素的受體, 同時許多種神經(jīng)遞質(zhì)和激素受體在免疫細胞上都有分布。   細胞因子和神經(jīng)遞質(zhì)以及激素的多功能位點特性是其神經(jīng)和免疫調(diào)節(jié)的分子基礎。細胞內(nèi)膜結構上存在4種VAMP蛋白: VAMP cellubrevin、 tIVAMP和VAMP8, 其中以VAMP8對細胞胞吐活動最為重要。MHCI類抗原NK細胞受體可抑制NK細胞的脫顆粒和自然殺傷作用,但是尚不清楚是哪種特異性受體介導了這種作用, 以及這些受體是否影響細胞因子分泌等NK細胞的其他功能。與融合孔的研究相比, 對膜分裂孔(fission pore)的研究非常有限, 因為胞飲囊泡通常非常小, 不能被全細胞膜電容記錄所分辨, 而細胞貼附式膜電容記錄可分辨出單個囊泡的胞飲, Lollike已經(jīng)分辨出直徑300~700 nm的小囊泡分裂孔[2]。進一步研究Ca2 和GTPγS的促分泌效率的差別和他們分別在什么情況下起作用將是一個重要課題。電壓依賴性Ca通道僅在B淋巴細胞上存在, 而在T淋巴細胞以及T淋巴細胞株均未見報道。DMnitrophen在光解前對Ca2 有很高的親和力,對靜息的細胞鈣緩沖幾乎沒有影響, 是研究細胞鈣緩沖和鈣穩(wěn)態(tài)系統(tǒng)的非常理想的材料。但是電極只能檢測到少部分信息物質(zhì)(10%左右),而且對于那些不能被氧化的物質(zhì)的釋放不能直接檢測[16]。46。細胞分泌活動涉及一系列復雜的分子活動和信號轉(zhuǎn)導過程, 隨著新技術尤其是細胞分泌檢測技術的不斷出現(xiàn),這一過程正在被逐步揭示出來。54卷測定。2 電化學測量   用電化學技術監(jiān)測細胞分泌的原理是: 在電極尖端表面施加一定的電壓, 容易氧化的化學信使物質(zhì)就會在電極尖端釋放出電子而發(fā)生氧化,電極可獲得電子并產(chǎn)生一定的電流[3]。另一種方法是通過基因轉(zhuǎn)染方法將熒光基因如綠色熒光蛋白(GFP)基因轉(zhuǎn)入靶細胞中并選擇性地在囊泡中表達,然后用激光掃描共聚焦熒光顯微鏡等檢測囊泡的運動過程[5]。1 免疫細胞的離子通道和細胞功能   免疫細胞不屬于可興奮性細胞(如神經(jīng)細胞、 肌肉細胞等)之列, 但也具有某些與神經(jīng)細胞相類似的電生理特性。聯(lián)合應用膜片鉗技術、單細胞熒光測量以及報告基因(如GFP、 rFP)等研究方法, 有望闡明免疫細胞的信號轉(zhuǎn)導、 淋巴
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