基因工程-2-載體(專業(yè)版)
【正文】 :23:4312:23Feb2326Feb23 ? 1越是無(wú)能的人，越喜歡挑剔別人的錯(cuò)兒。 。 （ b）當(dāng)進(jìn)入宿主細(xì)胞后，通過(guò)粘性末端之間的堿基配對(duì)作用實(shí)現(xiàn)的線性分子的環(huán)化作用，由此形成的雙鏈區(qū)叫做 cos位點(diǎn) GGGCGGCGACCT CCCGCCGCTGGA T A C G 5’P 5’P 3’ 3’ 粘性末端 環(huán)化作用 （ a） （ b） λ噬菌體的缺陷與改造 λ噬菌體的缺陷： ⑴ 酶切點(diǎn)太多 5個(gè) BamH1位點(diǎn) ， 6個(gè) BglⅠ 位點(diǎn) ， 5個(gè) EcoRⅠ 位點(diǎn) 。 ① 能象 λDNA 一樣體外包裝，并高效導(dǎo)入受體細(xì)胞 ② 可以裝載比質(zhì)?；?λDNA 大得多的外源 DNA片段 cos區(qū) kb+質(zhì)粒部分 外源 DNA ③ 由于攜帶質(zhì)粒的選擇標(biāo)記，便于篩選 ④ 由于質(zhì)粒上的多種單一酶切位點(diǎn)，便于克隆。 12:23:4312:23:4312:232/26/2023 12:23:43 PM ? 1成功就是日復(fù)一日那一點(diǎn)點(diǎn)小小努力的積累。 2023年 2月 下午 12時(shí) 23分 :23February 26, 2023 ? 1業(yè)余生活要有意義，不要越軌。 2023年 2月 下午 12時(shí) 23分 :23February 26, 2023 ? 1少年十五二十時(shí)，步行奪得胡馬騎。 12:23:4312:23:4312:232/26/2023 12:23:43 PM ? 1以我獨(dú)沈久，愧君相見(jiàn)頻。質(zhì)粒載體 載體 噬菌體載體 動(dòng)物病毒載體 大腸桿菌質(zhì)粒載體 pBR322 單鏈 DNA M13載體 SV40載體 乳頭瘤病毒載體 昆蟲(chóng)桿狀病毒載體 柯斯 (COS)載體 λ 噬菌體載體 枯草桿菌質(zhì)粒載體 pNC3 酵母菌質(zhì)粒載體 2μ 農(nóng)桿菌 Ti質(zhì)粒載體 Ti 一 基因工程的基本元件 載體 四、 是基因工程中最重要的一個(gè)人工質(zhì)粒 ,有萬(wàn)能質(zhì)粒之美稱 . ① pBR322的構(gòu)建 a) 復(fù)制子 :松弛型 b) 選擇標(biāo)記 :Amp、 Tet c) 篩選形式 :抗性插入失活 d) 單一切點(diǎn) :24個(gè) ③物理圖譜
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