【正文】 ?背散射電子的 能量很高 ，它們以 直線軌跡逸出 樣品表面，對于背向檢測器的樣品表面，因檢測器無法收集到背 散射電子而變成一片陰影，因此在圖像上顯示出很強(qiáng)的襯度。 ? 可進(jìn)行微區(qū)成份定性分析 形態(tài)和形貌表征 掃描電子顯微鏡 五、特征Ｘ射線 ? 當(dāng)樣品原子的內(nèi)層電子被入射電子激發(fā)，原子就會處于能量較高的激發(fā)狀態(tài)，此時外層電子將向內(nèi)層躍遷以填補(bǔ)內(nèi)層電子的空缺，從而使具有特征能量的Ｘ射線釋放出來。 現(xiàn)在 SEM都與能譜（ EDS） 組合 ， 可以進(jìn)行成分分析 。 將 相對法 變成 絕對法 ， 不用標(biāo)樣直接測定 試樣的各種平均分子量，并可做擴(kuò)展效應(yīng)的校準(zhǔn)與改正。工作曲線中間的直線部分就是標(biāo)定曲線。這種解釋不考慮溶質(zhì)與載體之間的吸附效應(yīng)以及在流動相和固定相之間的分配效應(yīng)，其淋出體積僅僅由溶質(zhì)分子尺寸和載體的孔尺寸決定，分離完全時由于體積排除效應(yīng)所至，故稱為 體積排除機(jī)理 。從沉降速度 測定求得的高分子 沉降系數(shù) ， 除分子量外還受分子形狀等的影響，但沉降系數(shù)作為表示高分子的特征是非常重要的。 選擇性離子監(jiān)測（ selected ion monitoring， SIM） 對選定的某個或數(shù)個特征質(zhì)量峰進(jìn)行單離子或多離子檢測，獲得這些離子流強(qiáng)度隨時間的變化曲線。 ? 驗證 所得結(jié)果。 ? 采用高分辨質(zhì)譜法或同位素豐度法，求出 分子式 。 結(jié)構(gòu)鑒定 分子熒光光譜 某些物質(zhì)受到光照射，除吸收某種波長的光之外，發(fā)射出比原來所吸收光的波長更長的光 ——光致發(fā)光 （二級光）。能量的大小反映了光源、檢測器等儀器的整體性能。如果能在兩波長處分別記錄吸光度隨時間變化的曲線，還能進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)動力學(xué)研究。具有不同分子結(jié)構(gòu)的各種物質(zhì)，有對電磁輻射顯示選擇吸收的特性。這是由于 Boltzmann分布，處于振動基態(tài)上的粒子數(shù)遠(yuǎn)大于處于振動激發(fā)態(tài)上的粒子數(shù)。稀釋劑溴化鉀與樣品的比例非常重要 , 樣品太少不行 , 樣品太多則信息太豐富而特征峰不突出 , 造成分析困難或吸收峰成平頂。掃描速度降低 , 對操作環(huán)境要求更高 , 因此應(yīng)選擇適當(dāng)?shù)闹怠?它會直接影響近紅外定量分析結(jié)果的準(zhǔn)確度 。短波近紅外譜區(qū)更適合做透射分析，故又叫近紅外透射區(qū)，長波近紅外譜區(qū)更適合做反射或漫反射分析，也稱之為近紅外反射區(qū)。紅外光譜法不僅能進(jìn)行定性和定量分析，而且從分子的特征吸收可以鑒定化合物和分子結(jié)構(gòu)。通常所說的某種光的光譜是指該光包含的不同頻率成分的強(qiáng)度按頻率的分布，因此光譜就是光在頻率域中的表征。紅外分析結(jié)果一般是通過用已知化學(xué)值的標(biāo)準(zhǔn)樣品建立的模型來分析待測樣品，如果波長準(zhǔn)確度不能保證，整組數(shù)據(jù)就會因波長平移而使每個數(shù)據(jù)出現(xiàn)偏差，造成分析結(jié)果的誤差。 3. 譜帶的相對強(qiáng)度；譜帶的強(qiáng)弱對比不單是定量分析的基礎(chǔ)，而且可以暗示某一特殊基團(tuán)或元素的存在。 數(shù)據(jù)處理對紅外譜圖質(zhì)量的影： (1)平滑處理： 紅外光譜實驗中譜圖常常不光滑 ,影響譜圖質(zhì)量。 振動耦合效應(yīng) : 當(dāng) 2個相鄰的基團(tuán)振動頻率相等或接近時 , 2個基團(tuán)發(fā)生共振 ,結(jié)果使一個頻率升高 , 一個頻率降低。 5 共振拉曼效應(yīng)可以用來有選擇性地增強(qiáng)大生物分子特個發(fā)色基團(tuán)的振動，這些發(fā)色基團(tuán)的拉曼光強(qiáng)能被選擇性地增強(qiáng) 1000到 10000倍。由于兩束光同時分別通過參比池和樣品他，還能自動消除光源強(qiáng)度變化所引起的誤差。標(biāo)定應(yīng)在紫外光區(qū)和可見光區(qū)兩個部分進(jìn)行。 結(jié)構(gòu)鑒定 紫外光譜 2．結(jié)構(gòu)分析 結(jié)構(gòu)分析可用來確定化合物的構(gòu)型和構(gòu)象。 熒光量子產(chǎn)率 （ ?） ： 吸收的光量子數(shù)發(fā)射的光量子數(shù)??如果一個分子將吸收的光子全部釋放，則其量子產(chǎn)率為 100%。 M－ 29(CHO, C2H5)。 掃描速度 由于氣相色譜峰很窄，有的僅幾秒鐘時間，一個完整的色譜峰通常需要至少 6個以上數(shù)據(jù)點。 電負(fù)性對化學(xué)位移的影響 CH3Si(CH3)3 ， CH 3H， CH3N ， CH3Br， 0 CH3C1， CH3OH ， CH3NO2 CH2Cl2 影響化學(xué)位移的因素 （ 1）誘導(dǎo)效應(yīng) 結(jié)構(gòu)鑒定 核磁共振波譜法 （ 2） 磁各向異性效應(yīng) 磁各向異性效應(yīng)是由于置于外加磁場中的分子所產(chǎn)生的感應(yīng)磁場，使分子所在空間出現(xiàn)屏蔽區(qū)和去屏蔽區(qū)，導(dǎo)致不同區(qū)域內(nèi)的質(zhì)子移向高場和低場。如果配以在線的絕對分子量檢測器（如： LALLS、 MultiAngle LS、 DualAngle LS等），凝膠滲透 色譜可以測定高聚物的絕對分子量。只要選擇與溶液濃度由線性關(guān)系的某種物理性質(zhì)，即可通過對其測量以測定溶液的濃度。將此兩式代入上式，并整理后得到 GPC數(shù)據(jù)處理 單分散試樣 單分散試樣分子量均一，不存在分布和平均值問題，可以根據(jù) GPC譜圖求出 Ve值，根據(jù)標(biāo)定曲線求得其分子量 分子量及分子量分布的測定 1. 凝膠滲透色譜法 多分散試樣 許多聚合物的 GPC譜圖是對稱的（圖 719），近似于高斯分布，可以用正態(tài)分布函數(shù)來處理，由以下公式計算分子量 ： 式中： Mp― 峰值分子量，從圖中 Vp通過校準(zhǔn)曲線求得； σ: 校準(zhǔn)偏差，等于峰寬 W的四分之一； B: 校準(zhǔn)曲線的斜率。 分子量及分子量分布的測定 黏均分子量 分子量及分子量分布的測定 黏均分子量 特性粘度（極限粘度），其定義為比濃粘度（粘數(shù)） ηsp/c或比濃對數(shù)粘度（對數(shù)粘度） lnηr/c在無限稀釋時的外推值，用 [η]表示，即： [η] = lim(ηsp/c) = lim(lnηr/c) (5) c→0 c→0 [η] 稱為特性粘度（或極限粘數(shù)），其值與濃度無關(guān)，量綱是濃度的倒數(shù)。大多數(shù)二次電子只帶有幾個電子伏的能量。 形態(tài)和形貌表征 掃描電子顯微鏡 ３ 、 真空系統(tǒng) ? 是為了保證掃描電子顯微鏡電子光學(xué)系統(tǒng)的正常工作 。 ?因此， 吸收電子像的襯度是與背散射電子和二。 ? 可見光信號 通過光導(dǎo)管送入 光電倍增器 ， 光信號放大 ， 又轉(zhuǎn)化成電流信號輸出 ， 電流信號經(jīng)視頻放大器放大后就成為調(diào)制信號 。 ?可進(jìn)行微區(qū)成分定性分析 形態(tài)和形貌表征 掃描電子顯微鏡 二、二次電子 ? 二次電子 是指在入射電子束作用下被轟擊出來并離開樣品表面的 樣品的核外層電子 。 2. 增比粘度（粘度相對增量），用 ηsp表示，是相對于溶劑來說，溶液粘度增加的分?jǐn)?shù)： ηsp =（ ηη0） /η0 =ηr –1 （ 2） 3. 比濃粘度（粘數(shù)），對于高分子溶液，粘度相對增量往往隨溶液濃度的增加而增大，因此常用其與濃度 c之比來表示溶液的粘度，稱為比濃粘度或粘數(shù)，即： ηsp/c = (ηr1)/c (3) 粘數(shù)的因次是濃度的倒數(shù)，一般用 ml/g表示。 分子量及分子量分布的測定 1. 凝膠滲透色譜法 分子量－淋出體積普適標(biāo)定曲線 若已知一種聚合物的 M1，只須簡單計算，就能得到同一保留體積的另一種聚合物的 M2。 顯然，若兩個樣品達(dá)到完全分離， R應(yīng)等于或大于 1，如果 R小于 1，則分離是不完全的。 分子量及分子量分布的測定 1. 凝膠滲透色譜法 主要特點 操作簡便快捷、進(jìn)樣量小、 數(shù)據(jù)可靠且重現(xiàn)性好、自動化程度高等。 如：氘代氯仿、氘代苯、重水、氘代丙酮、氘代 二甲亞砜等， （有時使用不含質(zhì)子的四氯化碳和二硫化碳作溶劑，但溶解性能不好。 儀器接口 接口技術(shù)中要解決的問題是氣相色譜儀的大氣壓的工作條件和質(zhì)譜儀的真空工作條件的聯(lián)接和匹配。 M－ 27(HCN, C2H3)。 結(jié)構(gòu)鑒定 分子熒光光譜 200 260 320 380 440 500 560 620熒光激發(fā)光譜熒光發(fā)射光譜 磷光光譜室溫下菲的乙醇溶液熒（磷）光光譜結(jié)構(gòu)鑒定 分子熒光光譜 由于電子基態(tài)的振動能級分布與激發(fā)態(tài)相似 ，故通常熒光發(fā)射光譜與它的激發(fā)光譜成鏡像對稱關(guān)系。此外，可配合紅外光譜、核磁共振波譜法和質(zhì)譜法進(jìn)行定性鑒定和結(jié)構(gòu)分析，因此它仍不失為是一種有用的輔助方法。這個指標(biāo)越小越好。光度計能自動比較兩束光的強(qiáng)度，此比值即為試樣的透射比，經(jīng)對數(shù)變換將它轉(zhuǎn)換成吸光度并作為波長的函數(shù)記錄下來。這是拉曼光譜相對常規(guī)紅外光譜一個很大的優(yōu)勢。 張力效應(yīng) : 當(dāng)環(huán)狀化合物的環(huán)中有張力時 , 環(huán)內(nèi)伸縮振動降低 ,環(huán)外增強(qiáng)。 樣品對紅外光的吸收與樣品的吸光系數(shù)有關(guān) ,如果樣品對紅光外有很強(qiáng)的吸收 , 就需要用較高的分辨率以獲得較豐富的光譜信息 。也是說明是否含有某一基團(tuán)的標(biāo)志。波長準(zhǔn)確度可用波長誤差，即上述兩值之差來表示。 傅立葉變換紅外光譜儀的結(jié)構(gòu) 結(jié)構(gòu)鑒定 傅里葉紅外光譜 簡單介紹 FTIR的數(shù)學(xué)原理 周期性的運動可在兩種域 (Domain)中得到表征：一種表征域是表現(xiàn)出周期性的域，例如，電 (磁 )場強(qiáng)度隨時間 (空間 )的分布，就是在時(空 )域中表征光波的特征；另一種表征域是運動狀態(tài)按某一周期性參數(shù) (頻率、波長、波數(shù)等 )的分布，可統(tǒng)稱為頻域。根據(jù)實驗技術(shù)和應(yīng)用的不同，通常將紅外區(qū)劃分成三個區(qū)：近紅外光區(qū)（ ～ )，中紅外光區(qū) (～ 25μm）和遠(yuǎn)紅外光區(qū)（ 25～ 1000μm)，如下表：其中中紅外區(qū)是研究和應(yīng)用最多的區(qū)域，一般說的紅外光譜就是指中紅外區(qū)的紅外光譜。專用的紅外儀器往往只覆蓋單一波段，如美國 Zeltex的 ZXl01型手持式辛烷值分析儀用 700－1100nm的短波近紅外譜區(qū)， AGMED公司的土壤快速分析儀用的1650－ 2650nm的長波近紅外譜區(qū)；而通用型的紅外儀器往往覆蓋整個紅外譜區(qū)。儀器吸光度噪聲是指在一定的測量條件下，在確定的波長范圍內(nèi)對樣品進(jìn)行多次測量，得到光譜吸光度的標(biāo)準(zhǔn)差。用透射譜圖表示時 , 趨勢相反。 對于有色樣品或吸光系數(shù)大的樣品稀釋劑溴化鉀與樣品的比例是 150： 1。 此外 1 由于水的拉曼散射很微弱，拉曼光譜是研究水溶液中的生物樣品和化學(xué)化合物的理想工具。躍遷所吸收的能量符合波爾條件： 2 1 2 1h v E E??結(jié)構(gòu)鑒定 紫外光譜 光源 單色器 吸收池 檢測器 信號指示系統(tǒng) 全世界的紫外－可見分光光度計生產(chǎn)廠家有上百家，產(chǎn)品型號成千上萬，但就基本結(jié)構(gòu) 來說，都是由五個部分組成，即光源、單色器（單色儀）、吸收池、檢測器和信號指示系統(tǒng)。是儀器最重要的指標(biāo)之一，儀器測定的每個值都是在指定的波長下得到的，如果所示的波長和實際波長偏差很大，那么測出的結(jié)構(gòu)就毫無意義了。而且還能測定某些化合物的物理化學(xué)參數(shù)，如摩爾質(zhì)量、配合物的配合比例和穩(wěn)定常熟、酸堿電離常數(shù)等。 熒光的激發(fā)光譜與熒光光譜 （ 1）熒光的激發(fā)光譜 激發(fā)光譜：表示不同激發(fā)波長下所引起物質(zhì)發(fā)射某一波長熒光的相對效率。 M－ 16(O, NH2)。 質(zhì)譜法和核磁共振，紅外光譜連用，可以對復(fù)雜化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)分析和鑒定 結(jié)構(gòu)鑒定 質(zhì)譜法 結(jié)構(gòu)鑒定 氣相色譜法 使混合物中各組分在兩相間進(jìn)行分配 ,其中一相是不動的 (固定相 ),另一相 (流動相 )攜帶混合物流過此固定相 ,與固定相發(fā)生作用 ,在同一推動力下 ,不同組分在固定相中滯留的時間不同 ,依次從固定相中流出 ,又稱色層法 ,層析法 氣相色譜 和 液相色譜 (流動相 ) ? ? 1 2 3 4 5 6 7 8 9 放空 氣相色譜的主要組成部分 結(jié)構(gòu)鑒定 氣相色譜法 樣品各組分在流動相和固定相中的分配情況不同來進(jìn)行分離。 結(jié)構(gòu)鑒定 氣相色譜法 結(jié)構(gòu)鑒定 核磁共振波譜法 ? 核磁共振譜 (nuclear magic resonance 縮寫為 NMR) ? 用波長為 10～ 100m（ 頻率相當(dāng)于 MHz數(shù)量級）的電磁波照射樣品，這樣波長的電磁波能夠與放置在磁場中一定數(shù)量樣品的原子核相互作用，發(fā)生核磁共振躍遷，記錄其共振躍遷訊號位置和強(qiáng)度，就是核磁共振波譜。另外，對沉降系 數(shù)不同成分的混合物進(jìn)行分析，也可用沉降速度法，同時，也是對提純高分子樣品純度檢驗的重要方法之一。 分子量及分子量分布的測定 1. 凝膠滲透色譜法 載體