高二生物蛋白質(zhì)和dna技術(shù)(專業(yè)版)
【正文】 DNA聚合酶不能從頭合成 DNA，只能從 3′端延伸 DNA鏈 。 ?正答示范： (1)透 明圈 植酸鈉的消耗量 (減少量 )或磷酸 (肌醇 )的生成量 (產(chǎn)量 ) (2)小分子雜質(zhì) 凝膠色譜法：根據(jù)蛋白質(zhì)之間的分子大小、吸附性質(zhì)等差異進(jìn)行純化 (或電泳法：根據(jù)蛋白質(zhì)之間的電荷、分子大小等差異進(jìn)行純化 ) (3)變性、復(fù)性和延伸 (長(zhǎng) ) 加熱 (或高溫處理 ) (4)蛋白酶、脂肪酶、纖維素酶 ? 【 例 2】 近 十年來(lái)， PCR技術(shù) (多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) )成為分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室里的一種常規(guī)手段，其原理是利用 DNA半保留復(fù)制，在試管中進(jìn)行 DNA的人工復(fù)制 (如圖 )，在很短的時(shí)間內(nèi)，將 DNA擴(kuò)增幾百萬(wàn)倍甚至幾十億倍，使實(shí)驗(yàn)室所需要的遺傳物質(zhì)不再受限于活的生物體。在產(chǎn)酶菌株篩選過(guò)程中，常在基本培養(yǎng)基中添加不溶于水的植酸鈣制成固體平板，植酸鈣被植酸酶分解后可在平板上產(chǎn)生 ________，可根據(jù)其大小選擇目的菌株，所得菌株需要進(jìn)一步測(cè)定植酸酶活性。 ?(1)在加樣示意圖中 ， 正確的加樣順序是________。 ? 實(shí) 驗(yàn) 要 求 ? 白質(zhì)提取的原理和方法。吸管應(yīng)貼著管壁加樣，待樣品完全進(jìn)入凝膠層后才可關(guān)閉下端出口，加入緩沖液，待紅色蛋白質(zhì)接近色譜柱底端時(shí)，用試管收集流出液，每次 5 mL收集一管，連續(xù)收集。 ?(3)為構(gòu)建基因工程菌 ， 可用 PCR等技術(shù)從上述菌株中克隆植酸酶基因 。 ?① PCR一般要經(jīng)歷三十多次循環(huán) ， 每次循環(huán)可分為 ________、 ________、 ________三個(gè)步驟 。 ?答案： (1)氫 解旋 解旋酶 (2)3′ 四種脫氧核苷酸 堿基互補(bǔ)配對(duì)原則 (3)溫度 酸堿度 (4)① 高溫變性 低溫復(fù)性 中溫延伸 ② 3′端 A、 D ③ 解旋 熱變性 一 ?【 互動(dòng)探究 】 ?(1)用 于 PCR的引物一般長(zhǎng)度為 20～ 30個(gè)核苷酸 ， 它的化學(xué)本質(zhì)是什么 ？ ?(2)PCR反應(yīng)中 ， 如果以引物為標(biāo)記 ， 共有幾種 DNA分子產(chǎn)生 ？ ?提示： (1)引物的作用是與模板鏈結(jié)合 ，提供 3′末端 ， 使 DNA聚合酶能夠催化子鏈的延伸 ， 在生物體內(nèi) DNA復(fù)制時(shí) ， 引物一般為一小段 RNA， 但在 PCR反應(yīng)中 ， 可以是一小段 DNA或 RNA。 ?(2)PCR技術(shù)擴(kuò)增 DNA與細(xì)胞內(nèi) DNA復(fù)制所需原料一樣
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