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植物總dna的提取及瓊脂糖凝膠電泳檢測(專業(yè)版)

2025-09-05 10:40上一頁面

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【正文】 緩慢倒入膠板,待膠凝固后拔出梳子。 操作步驟 1)選取新鮮材料,研磨迅速徹底,研磨好的材料應(yīng)與 CTAB 抽提液充分混勻; 2)若提取產(chǎn)物有顏色,可能是材料中含有較多的多酚類物質(zhì),添加巰基乙醇( 2- 5%),盡可能選取幼嫩的材料; 3)收集 CTAB 與核酸形成的復(fù)合物時不要離心過度,否則沉淀再溶解難; 4)為了獲得具有生物活性的天然核酸,在分離制備過程中必須采用溫和的條件,避免過酸過堿、劇烈地攪拌,防止熱變性,同時還要避免核酸降解酶類的降解。 ?CTAB法 CTAB是一種陽離子去垢劑,它可以溶解膜與脂膜,使細胞中的 DNA蛋白質(zhì)復(fù)合物釋放出來,并使蛋白質(zhì)變性,使 DNA與蛋白質(zhì)分離。 ?在酸性溶液中,核酸易水解,中性或弱堿性溶液中較穩(wěn)定。 沉淀核酸 5. 12022r/min,離心 1min,倒掉上清液,將離心管倒置干燥。 核酸染色劑 注意事項: EB是致癌物質(zhì),切勿用手接觸,更不要污染環(huán)境。l 上樣 buffeer 混勻,用微量移液器小心加入樣品槽。 電泳原理 ? 瓊脂糖是一種線性多糖聚合物。 ?酚類物質(zhì) 提取液中加少量巰基乙醇,選取幼嫩的材料。 背景知識 核酸
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