植物總dna的提取及瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)(更新版)
【正文】 儀器用具 移液器－量程的選擇 1．取 2g 清洗涼干的新鮮葉片于研缽中，加 1/3 藥匙石英砂和 4mL 2 倍的 CTAB 提取液，迅速研磨。 ?在酸性溶液中，核酸易水解，中性或弱堿性溶液中較穩(wěn)定。在制備核酸時(shí)通常破壞細(xì)胞壁及細(xì)胞膜來使核蛋白釋放出來。 ?CTAB法 CTAB是一種陽(yáng)離子去垢劑，它可以溶解膜與脂膜，使細(xì)胞中的 DNA蛋白質(zhì)復(fù)合物釋放出來，并使蛋白質(zhì)變性，使 DNA與蛋白質(zhì)分離。加入等體積氯仿：異戊醇（ 24:1）混合液，充分顛倒混勻。 操作步驟 1)選取新鮮材料，研磨迅速?gòu)氐?，研磨好的材料?yīng)與 CTAB 抽提液充分混勻； 2)若提取產(chǎn)物有顏色，可能是材料中含有較多的多酚類物質(zhì)，添加巰基乙醇（ 2－ 5％），盡可能選取幼嫩的材料； 3）收集 CTAB 與核酸形成的復(fù)合物時(shí)不要離心過度，否則沉淀再溶解難； 4）為了獲得具有生物活性的天然核酸，在分離制備過程中必須采用溫和的條件，避免過酸過堿、劇烈地?cái)嚢?，防止熱變性，同時(shí)還要避免核酸降解酶類的降解。 ③使樣品呈色，使加樣操作更方便。緩慢倒入膠板，待膠凝固后拔出梳子。 DNA，在分離提取過程中應(yīng)注意那些問題 ？ 思考
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