【正文】 圖 4 圖 5 結論 結果表明，層析 H+、 Fe3+型和 D031H+樹脂能有效地分離木糖醇和山梨醇。 2 洗脫液流量對分離的影響 由液相層析理論可知，當其它條件固定時，只有當洗脫液流量低于某一數(shù)值時，才能使二物質得到最充分的分離。 原料 樹脂類型 分離得到的氨基酸 豬血粉 001 7陽樹脂 AspGluLeuHisLys Arg 110， 001 7， D371 ArgLysHisPhePheTyr等 含 COOHamp。應用這些樹脂從動物、植物、微生物及其代謝產物中分離純化天然多肽、蛋白質和酶的研究報道甚多， 表 2中僅是部分實例。 方法 1 中草藥粉末 稀酸水溶液 樹脂柱 流出液（棄去） 水洗至中性 方法 2 方法 3 取出樹脂，稍涼 方法 1 以不同濃度的酸性水或醇液分步解吸 洗脫液 1 洗脫液 2 洗脫液 3 弱酸性生物堿 中強酸性生物堿 強堿性生物堿 方法 2 用飽和 NaHCO3溶液潤濕有機溶劑提取 樹脂 提取液 10% NaHCO3溶液潤濕，溶劑提取 弱堿性生物堿 提取液 中強堿性生物堿 樹脂 10%氨水潤濕，溶劑提取 樹脂（回收） 提取液 強堿性生物堿 方法 3 用濃氨水堿化，晾干后置提取器以乙醚回流提取 提取液 弱堿性生物堿 樹脂 用氯仿回流提取 提取液 中等極性生物堿 樹脂 用乙醇回流提取 樹脂（回收） 提取液 強極性生物堿 例 2 陽樹脂對鹽酸麻黃堿交換吸附與解離研究 1 不同陽離子樹脂對鹽酸麻黃堿的交換作用 選用的 3種 強酸性陽離子樹脂對鹽酸麻黃堿的吸附結果如表 1所示。 ? 要依據(jù)樹脂的失效原因選擇再生劑 。 氣泡的發(fā)生往往是裝柱時沒有一定量的液體覆蓋而混入氣體造成的 。 但這樣的操作費時 、 分離效率低 、 不能進行微量成分的分離與分析 ， 不能連續(xù)監(jiān)測柱流出物成分的變化 。 ? ④運輸貯存中應保護好標記，以免與外界樹脂混淆。液膜擴散速度隨水流速增加而增大 。 溶液的 攪拌 或在樹脂柱中的流動有利于這個過程 。 ? 離子交換劑對交換化合物來說，主要取決于化合物的解離離子的電荷，半徑及酸堿性的強弱。解離常數(shù)大，酸堿性置換容易，但洗脫相對較難。 但由于樹脂表面總有一層溶液的薄膜 ， A必須在此膜內擴散并透過 。 ? （ 7)交換離子的性質 ? 主要是離子的價態(tài)和水化離子的大小 。 ? ⑤應防止包裝物擠破，不能野蠻裝卸。 這樣的操作僅僅用于分離或制備 ， 若用于分析則實用價值不大 。 要做到均勻裝柱 ， 柱內要有一定高度的水面 ， 樹脂要與水混合傾入 ， 借助水的浮力使樹脂自然沉積 ，操作盡可能均勻連續(xù) 。 通常仍是酸和堿 ， 有時是中性鹽 。結果表明，三種樹脂在30— 60分鐘內對鹽酸麻黃堿可以進行最大限度的交換，其中 1樹脂的交換效果最好 ，因此，在以后的實驗中均以 1樹脂為交換材料。 蛋白質和酶 離子交換樹脂 天花粉蛋白質 CMSephadex G50 胎盤免疫球蛋白 CMSephadex G50 HIV1反轉錄酶 陰離子交換樹脂 葡萄糖氧化酶 110弱酸樹脂 細胞色素 C D160A樹脂 小鼠腹水單克隆抗體 陽 /陰樹脂混合床 胰蛋白酶 DEAE纖維素 流感病毒蛋白 TSK IEX 645 DEAE 牛血清白蛋白 DEAESephadex A50 三、 離子交換法提取分離天然酸性有機化合物 例 1 甘草酸是甘草的有效成分可先用 陰離子交換樹脂（ OH型）富集甘草酸，以 46%氨水洗脫后，再用弱酸性陽離子交換樹脂（ H+）除去銨離子，可得到高純度的甘草酸。SO3H的陽樹脂 HisLysArg等 豬血母液 732陽樹脂 TyrPhe及混合氨基酸 豬毛 732陽樹脂 Lys等 雞毛 732樹脂 /711樹脂 ProAlaARG等 魚皮魚鱗 陽離子交換樹脂 Pro等 用離子交換樹脂分離混合氨基酸的一些實例列于表 1 例 1 陽離子樹脂對氨基酸的分析 ? 氨基酸可用多種液相色譜模式分離 。本實驗用層析柱內徑為3cm ，長為 100 cm，當層析溫度為 55℃ ，進樣量木糖醇和山梨糖醇均 為 30%的濃度、 10 ml時， 不同類型樹脂的最適宜洗脫液流量見表 1所示。最適宜溫度均為55℃ ，最適宜洗脫液流量：層析 H+及 Fe3+型樹脂分別為 ,D031H+型為。 圖 5表明，當進樣量恒定為 3g 時，進樣濃度增加，山梨糖醇的保留體積差逐漸增加，有利于二者的分離，考慮到工業(yè)上的使用，我們認為 30%的濃度是合適的。6H2O、 CH3COONH4水溶液淋洗，使樹脂分別轉成 Fe3+、 AL3+、Cr3+、 Ba2+、 Co2+ 和 NH4+型 。目前，用發(fā)酵法可生產谷氨酸、賴氨酸、蘇氨酸、異亮氨酸、纈氨酸、精氨酸、組氨酸、脯氨酸、鳥氨酸、和瓜氨酸等，陽離子交換樹脂是從發(fā)酵液中提取分離氨基酸的理想分離材料。例如，聚丙烯酸系列的弱酸樹脂，以纖維素、葡聚糖凝膠、瓊脂糖凝膠為載體的弱酸或弱堿脂等均適用于生物高分子的分離與純化。 樊振民等對 3種 常用的分離方法進行總結，給出下圖所示的 工藝流程 。 動態(tài)法簡便實用 ， 效率也高 。 這是由于裝柱不均勻造成樹脂時松時緊 。 淋洗液從柱的頂端加入 ， 靠重力作用自然流下 ，樣品也從柱的上端加入 ， 將流出物分段收集后 ，再另外進行分析 。若發(fā)現(xiàn)樹脂失水，不能直接向樹脂中加水，應先加入適量濃食鹽水，使樹脂恢復濕潤。但攪拌速度達一定值以后 ， 交換反應速度便不再上升 。 ? 當溶液中的 A離子與樹脂上的 B離子發(fā)生交換反應時 ，整個過程可分為如下幾部： ? （ 1) 離子 A到達樹脂表面 。通常強酸性交換劑交換液的pH應大于 2，弱酸性交換劑的交換液 pH應在 6以上。解離離子價數(shù)越高，電荷愈大，則它的吸附性愈強，愈易交換在樹脂上。 此膜厚度與攪拌強度有關 ， 一般為 102— 103cm。 在樹脂內擴散的離子是由于樹脂的固定的離子庫侖力的吸引而擴散進入的 ， 故離子價態(tài)越高 ， 吸引力越大 ， 擴散速度越快 。 2 、 預 處 理 （ 已 述 ） 3 、 防 止 樹 脂 污 染 樹 脂 污 染 有 幾 種 情 況 : 一 種 為 原 水 中 有 機 物 和 膠 體 硅 ； 另 一 種 是 重 金 屬 污 染 ； 還 有 一 種 是 樹 脂 本 身 長 期 運 行 中 高 分 子 裂 解 ， 造 成