【正文】 體細(xì)胞誘導(dǎo)成功后，必須轉(zhuǎn)入成熟培養(yǎng)基。 （三）細(xì)胞的工廠化生產(chǎn) 步驟：（ 1）高產(chǎn)細(xì)胞株的選擇 （ 2） “ 種子 ” 培養(yǎng) （ 3）細(xì)胞的規(guī)模培養(yǎng) 二、突變體選擇 突變體育種缺點(diǎn)：對(duì)多細(xì)胞有機(jī)體進(jìn)行誘變處理后會(huì)形成嵌合體 利用細(xì)胞培養(yǎng)進(jìn)行突變體選擇，多采用離體的單倍體細(xì)胞，因?yàn)樗芗訌?qiáng)獲得隱性突變體的機(jī)會(huì)。 起始密度： 細(xì)胞培養(yǎng)最低的有效密度，即能使細(xì)胞分裂、增殖的最低接種量，低于這個(gè)密度細(xì)胞不能分裂，甚至很快解體死亡。 開(kāi)放型連續(xù)培養(yǎng)： 為了不使限制細(xì)胞生長(zhǎng)的因子出現(xiàn)，創(chuàng)造一個(gè)穩(wěn)定的細(xì)胞生長(zhǎng)的環(huán)境，必須建立一套自動(dòng)控制系統(tǒng)來(lái)調(diào)節(jié)培養(yǎng)基注入的數(shù)量和培養(yǎng)液的總體積。 （ 1）細(xì)胞生長(zhǎng)在固定體積的培養(yǎng)基上，直至培養(yǎng)基中的養(yǎng)分為細(xì)胞耗盡為止。 步驟： 單細(xì)胞懸浮液的制備 懸浮細(xì)胞密度的調(diào)制 瓊脂培養(yǎng)基的配制 平板制作 培養(yǎng) （四）條件培養(yǎng)基：在培養(yǎng)基中加入高密度的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，一定時(shí)間后這些細(xì)胞就會(huì)向培養(yǎng)基中分泌一些物質(zhì)，使培養(yǎng)基條件化。 細(xì)胞培養(yǎng)，即通過(guò)細(xì)胞繼代培養(yǎng)，使細(xì)胞無(wú)限增殖，并使高等植物的單個(gè)細(xì)胞，在離體培養(yǎng)條件下，通過(guò)誘發(fā)細(xì)胞分裂形成細(xì)胞團(tuán)，再分化形成具根芽的完整植株。 （ 3）從懸浮培養(yǎng)物或疏松的愈傷組織上分離出單細(xì)胞，并把單細(xì)胞接種在培養(yǎng)瓶中的濾紙上面。 篩選細(xì)胞株的方法是： （ 1）從培養(yǎng)的愈傷組織中挑選出外觀疏松、生長(zhǎng)快的淺色愈傷組織。 （ 2）可在培養(yǎng)期間使細(xì)胞保持在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期中。 三、培養(yǎng)細(xì)胞的同步化 實(shí)現(xiàn)懸浮培養(yǎng)細(xì)胞同步化的方法： 饑餓法： 先對(duì)細(xì)胞斷絕供應(yīng)一種進(jìn)行細(xì)胞分裂所必需的營(yíng)養(yǎng)成分或激素，使細(xì)胞停滯在 G1期或 G2期，經(jīng)過(guò)一段時(shí)間的饑餓后，當(dāng)重新在培養(yǎng)基中加入這種限制因子時(shí)，靜止細(xì)胞就會(huì)同時(shí)進(jìn)入分裂。 細(xì)胞植板率 =每個(gè)平板形成的細(xì)胞團(tuán)數(shù) /每個(gè)平板接種的細(xì)胞總數(shù) 一、懸浮培養(yǎng)中細(xì)胞生長(zhǎng)的測(cè)定 第三節(jié) 植物細(xì)胞生長(zhǎng)和活力的測(cè)定 二、培養(yǎng)細(xì)胞活力的測(cè)定 TTC法 熒光素二乙酸法（ FDA法） 伊凡藍(lán)染色法 第四節(jié) 植物細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用 一、植物次生代謝產(chǎn)物的生產(chǎn) 二、突變體選擇 三、誘導(dǎo)多變體 （一 ）生產(chǎn)天然的植物成分 通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)可得到大量合成的植物次生化合物，如生物堿 、 抗菌劑、抗血平、橡膠、類(lèi)固醇、糖類(lèi)衍生物、天然色素等很多物質(zhì) . 一、植物次生代謝產(chǎn)物的生產(chǎn) ● 海巴戟的植物體內(nèi) —— 蒽醌 ● 胡蘿卜愈傷組織 —— 紫紅色、橙紅色、綠色、黃白色 4種愈傷 組織株系 ● 紫草 —— 紫草色素 ● 長(zhǎng)春花細(xì)胞和愈傷組織培養(yǎng)物 —— 利血平和阿馬靈 ● 三七的愈傷組織培養(yǎng)物 —— 三七皂苷（含量達(dá)干重的 %） ● 三分三的愈傷組織中 —— 茛菪堿 （含量可達(dá)干重的 % 一、植物次生代謝產(chǎn)物的生產(chǎn) 問(wèn)題： ，有些細(xì)胞培養(yǎng)物不能產(chǎn)生天然化合物或者比正常