分子生物學(xué)講座(8)(更新版)
【正文】 I和 Sau3A I（ 5`?GATC? 3`） ? 來源不同，識(shí)別切割的序列也不同，但產(chǎn)生相同的粘性末端，稱為同尾酶。 這類酶的作用需要 Mg2+， S腺苷甲硫氨酸及 ATP。 一、工具酶種類 限制性內(nèi)切酶：分 I、 II、 III 三種 連接酶： DNA連接酶、 RNA連接酶 聚合酶： DNA聚合酶、 RNA聚合酶 激酶、磷酸酶：堿性磷酸酶、 T4多核苷酸激酶 核酸酶：核酸外切酶、核酸內(nèi)切酶（ S1）、脫氧核糖核酸酶（ DNaseI）、核糖核酸酶（ RNase A、 RNaseH、 RNaseT1） 其他常用酶：甲基化酶、拓?fù)洚悩?gòu)酶 I、 SSB 二 、 限制性核酸內(nèi)切酶的概念 很多細(xì)菌和細(xì)胞中都能識(shí)別外來的核酸并將其分解， 1962年發(fā)現(xiàn)這是因?yàn)榧?xì)菌中含有特異的核酸內(nèi)切酶，能識(shí)別特定的核酸序列而將核酸切斷 ?；蚬こ淌巧锛夹g(shù)的核心和關(guān)鍵，是主導(dǎo)技術(shù)；細(xì)胞技術(shù)是生物技術(shù)的基礎(chǔ)；酶工程是生物技術(shù)的條件；發(fā)酵工程是生物技術(shù)獲得最終產(chǎn)品的手段，四個(gè)方面相互聯(lián)系的。是很強(qiáng)的誘導(dǎo)劑。在一個(gè)操縱元中至少在結(jié)構(gòu)基因群最后一個(gè)基因的后面有一個(gè)終止子。調(diào)控方式有負(fù)調(diào)控(negative regulation)和正調(diào)控 (positive regulation)。也就是說，即使沒有乳糖存在，也會(huì)有少數(shù)幾個(gè)結(jié)構(gòu)基因群得以合成，一旦有乳糖或者類似物存在，馬上可以利用。 IPTG和 Xgal被廣泛應(yīng)用在基因工程的工作中。 一般來說，基因工程是指在體外將核酸分子插入質(zhì)粒、病毒或其它的載體當(dāng)中，形成遺傳物質(zhì)的重新組合，使之進(jìn)入到寄主細(xì)胞內(nèi)，并且在寄主細(xì)胞當(dāng)中可以持續(xù)穩(wěn)定地繁殖。其功能就是保護(hù)自身的DNA,分解外來的 DNA,以保護(hù)和維持自身遺傳信息的穩(wěn)定 ,這對(duì)細(xì)菌的生存和繁衍具有重要意義。是分子生物學(xué)中應(yīng)用最廣的限制性內(nèi)切酶
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