【正文】 紅細(xì)胞的D抗原往往表現(xiàn)較弱，故必要時(shí)進(jìn)行顯微鏡鏡檢，以免錯(cuò)判結(jié)果，特別是陰性結(jié)果時(shí)。 假陰性反應(yīng)原因分析： 搞錯(cuò)抗血清 每次試驗(yàn)時(shí)應(yīng)細(xì)心核對(duì)抗血清瓶子上的標(biāo)簽?？? 39分為IgM和IgG球蛋白抗體 IgM 為天然抗體，在鹽水介質(zhì)中能直接相應(yīng)的紅細(xì)胞，使之發(fā)生肉眼可見(jiàn)的凝集反應(yīng)。這些特性為判定抗體特異性提供了參考信息。 陰性反應(yīng)：出現(xiàn)紅細(xì)胞不凝集?？鼓龢?biāo)本也用于直接抗球蛋白試驗(yàn)，并可提供洗脫技術(shù)所需的紅細(xì)胞來(lái)源。 0 將血標(biāo)本試管放37C水浴中10分鐘，離心。 0 0 試驗(yàn)溫度以2030C為宜，若為寒冷凝集，37C水浴分鐘，在此溫下觀察，凝集消失，說(shuō)明冷凝集素存在。在紛雜的塵世里，為自己留下一片純靜的心靈空間，不管是潮起潮落，也不管是陰晴圓缺，你都可以免去浮躁，義無(wú)反顧，勇往直前，輕松自如地走好人生路上的每一步3. 花一些時(shí)間，總會(huì)看清一些事。只有你自己才能把歲月描畫(huà)成一幅難以忘懷的人生畫(huà)卷。有時(shí)候覺(jué)得自己像個(gè)神經(jīng)病。 試驗(yàn)質(zhì)量檢驗(yàn)：取自身血清與自身紅細(xì)胞用本試劑盒試驗(yàn)方法作自身陰性對(duì)照試驗(yàn)，取IgG抗D血清與RhD（+）RBC用本試劑盒試驗(yàn)方法作陽(yáng)性對(duì)照實(shí)驗(yàn)，對(duì)照實(shí)驗(yàn)符合，試劑有效。 各管加 ，混勻，靜置 1 分鐘，各管加 Promoter1 滴，混勻，3000轉(zhuǎn)/分離心 15 秒，倒出上清液（殘留約 ），扣搖，肉眼可見(jiàn)明顯的凝集狀（如無(wú)凝集須重做），加假凝集清除液 1 滴與管底，輕搖，凝集 1 分鐘內(nèi)消失呈均勻混懸液，為陰性，凝集1分鐘內(nèi)不能被消除，即為陽(yáng)性。若懷疑冷抗體引起的直接抗球蛋白試驗(yàn)陽(yáng)性，其血液標(biāo)本凝固應(yīng)保持在 37℃，直到血清 40被分離出來(lái)為之。 結(jié)合譜細(xì)胞反應(yīng)格局，確定抗體特異性。 、譜細(xì)胞：選取八個(gè)以上的O型紅細(xì)胞組成一組譜細(xì)胞（已知抗原）。在鹽水介質(zhì)中不能凝集而只能致敏抗原的紅細(xì)胞，且必須通過(guò)特定的方法使致敏紅細(xì)胞發(fā)生凝集。 某種特定的抗血清不能和其他相應(yīng)抗原的變異型起反應(yīng)。 對(duì)于結(jié)果可疑的，必須洗滌紅細(xì)胞后重新檢驗(yàn)。 參考值范圍 陽(yáng)性反應(yīng)：出現(xiàn)紅細(xì)胞凝集，為RhD陽(yáng)性。 用機(jī)械的方法將U型板混勻。 離心，速度和時(shí)間可選擇以下二種之一： 轉(zhuǎn)速1000rpm，時(shí)間一分鐘1分鐘或3400rpm，時(shí)間15秒。 再加入1滴40%50%的被檢紅細(xì)胞懸液。 通常不與自身的血清凝集。這種區(qū)別用玻片法作試驗(yàn)更為明顯。 用 AAB、O 紅細(xì)胞及自身紅細(xì)胞檢查受檢血清。 各種原因引起的紅細(xì)胞溶解，誤判為不凝集。 對(duì)于可疑結(jié)果，必須更換所用的試劑，重新檢測(cè)。 所有試劑在開(kāi)封或使用時(shí)，必須檢查是否有變質(zhì)；凡可疑者，必須更換新的試劑進(jìn)行檢測(cè)工作。試劑開(kāi)封后必須貼上開(kāi)封日期、開(kāi)封人標(biāo)簽，用畢后應(yīng)放置冰箱保存，以免細(xì)菌污染。 鏡下可見(jiàn)數(shù)個(gè)紅細(xì)胞凝集在一起，周?chē)泻芏嘤坞x紅細(xì)胞。 將試管輕輕搖動(dòng)，使沉于管底的紅細(xì)胞浮起，先以?xún)?nèi)眼觀察有無(wú)凝集(或溶血)現(xiàn)象。 標(biāo)本出現(xiàn)中度溶血者，為不合格標(biāo)本，不能用于檢測(cè)。 標(biāo)本種類(lèi)及收集要求 受檢者血清； 枸緣酸鈉抗凝血或未稍取血，受檢者血液制成5 ％紅細(xì)胞鹽水懸液使用，制備方法見(jiàn)本節(jié)附注。 立即以1000r／min離心 3 min。 177。 編制人/修改人： 校核人： 審核人： 批準(zhǔn)人：批準(zhǔn)日期： 年 月 日 實(shí)施日期： 年 月 日文件類(lèi)型：作業(yè)指導(dǎo)書(shū) 文件編號(hào)：JCXRMYY JY0152009文件名稱(chēng)：臨床輸血檢測(cè)操作規(guī)程 第01版第0次修改 第3頁(yè)共12頁(yè) 注意事項(xiàng)： 分型血清必須為批批檢試劑，且在有效期內(nèi)使用；質(zhì)量性能符合要求。 生理鹽水啟用后，有效期為二周。 對(duì)于可能存在不完全抗原的時(shí)候，應(yīng)在各反應(yīng)方加入凝聚胺試劑，以檢驗(yàn)不完全抗原的存在。 受檢者血清中缺乏應(yīng)有的抗A 及或抗—B 抗體，如丙種球蛋白缺乏癥。 對(duì)受檢紅細(xì)胞作直接抗球蛋白試驗(yàn)，如結(jié)果呈陽(yáng)性，表示紅細(xì)胞已被抗體致敏。 如受檢者為A型血而疑為有類(lèi)B抗原時(shí)，可用下列方法進(jìn)行鑒別： 觀察細(xì)胞與抗—A及抗—B的凝集強(qiáng)度，與抗—A的反應(yīng)要比與抗 36—B的反應(yīng)強(qiáng)。 不被臍帶血清凝集。 操作步驟 玻片法： 干凈玻片上加1滴抗D?；靹?。 再在微孔中一滴約 35%的被檢紅細(xì)胞懸液，細(xì)胞懸液需事先制備于生理鹽水中。 如果呈陰性，需要試管法重做一遍實(shí)驗(yàn)。 Rh血型鑒定應(yīng)嚴(yán)格控制溫度與時(shí)間，因Rh抗原、抗體集反應(yīng)凝塊比較脆弱，觀察反應(yīng)結(jié)果時(shí)，應(yīng)輕輕側(cè)動(dòng)試管，不可用力振搖。 試管中漏假抗血清 在加入細(xì)胞懸液之前，必須檢查試管中有無(wú)抗血清。 IgG為免疫抗體，常經(jīng)妊娠或輸血等免疫產(chǎn)生。 試劑 、 紅細(xì)胞：選取三個(gè)以上的O型紅細(xì)胞組成一組篩選細(xì)胞（已知抗原）。表示紅細(xì)胞上沒(méi)有相應(yīng)抗體存在。 、 需要一管新鮮收集的凝固的血液標(biāo)本用作血清研究。 標(biāo)準(zhǔn)操作： 主（次）管加入受（供）血者血清 2 滴，加供（受）血者 4%紅細(xì)胞鹽水懸液1滴。 肉眼直觀判斷的結(jié)果應(yīng)確保與顯微鏡下觀察結(jié)果一致，直觀不能明確判斷的可疑結(jié)果須鏡檢，鏡下：陰性結(jié)果應(yīng)該是單個(gè)RBC均勻分布，有RBC凝集狀散在的即為若陽(yáng)性。用一些事情，總會(huì)看清一些人。