【正文】 液（）至刻度，搖勻，作為供試品溶液；另取鹽酸氯丙嗪對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，用鹽酸液（）溶解并稀釋制成8μg/ml的對(duì)照品溶液，以鹽酸液（）為空白，分別于254nm及277nm波長(zhǎng)處同時(shí)測(cè)定上述供試品溶液與對(duì)照品溶液的吸收度，按下式計(jì)算：鹽酸氯丙嗪含量（mg/ml）=(A254 — A277)u/V(A254 —— A277)s式中，C為對(duì)照品溶液濃度，V為取樣量（ml），U表示供試品溶液，S表示對(duì)照品溶液。以鹽酸液（）作空白，用分光光度計(jì)在254177。（1）測(cè)定原理 利于鹽酸氯丙嗪在堿性介質(zhì)中，氯丙嗪轉(zhuǎn)化為游離堿，被有機(jī)溶劑乙醚定量提取，然后將氯丙嗪的乙醚提取液，用鹽酸溶液提取，使氯丙嗪再轉(zhuǎn)化為鹽酸氯丙嗪，在254177。（2）鹽酸異丙嗪片的測(cè)定 取本品10片，除去糖衣后，精密稱(chēng)定，研細(xì)，精密稱(chēng)取適量（），置200ml量瓶中，加鹽酸溶液（9→1000）適量，振搖15min使鹽酸異丙嗪溶解，再用鹽酸溶液（9→1000）稀釋至刻度，搖勻，在249nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，按C17H20N2S10min后呈色完全，呈色可穩(wěn)定2h左右，并在500nm波長(zhǎng)附近具有最大吸收，最適宜的測(cè)定范圍為50250μg。一般多采用加入脫水劑，或經(jīng)濾紙過(guò)濾的方法，除去混入的水分。增加酸性染料的濃度 可以提高測(cè)定的靈敏度。1）水相最佳pH值的選擇：本法中水相的pH選擇極為重要，只有選擇合適的pH使有機(jī)堿性藥物均成陽(yáng)離子（BH+），而同一pH條件下，酸性染料電離足夠的陰離子（In ），陰陽(yáng)離子才能定量生成離子對(duì)，并完全溶于有機(jī)溶劑中，而過(guò)量的染料完全保留在水相中，才能保證定量的測(cè)定。1．硝苯地平的測(cè)定 基本原理 硝苯地平的測(cè)定原理，可用下列反應(yīng)式表示：終點(diǎn)時(shí)，微過(guò)量的的Ce4+將指示劑中的Fe2+氧化成Fe3+，使橙紅色配合物離子呈淡藍(lán)色或無(wú)色配位化合物離子，以指示終點(diǎn)的到達(dá)。此時(shí)1摩爾的硫酸奎寧可消耗4摩爾的高氯酸，因此片劑分析的滴定度與原料藥分析的滴定度不同。其反應(yīng)式如下：(C20H24N2現(xiàn)以硫酸阿托品和硫酸奎寧為例，簡(jiǎn)述其測(cè)定方法的基本原理與操作。其測(cè)定方法及其主要條件見(jiàn)表87。（3）滴定劑的穩(wěn)定性 本類(lèi)藥物的非水溶液滴定法所用的溶劑為醋酸，具有揮發(fā)性，且膨脹系數(shù)較大，因此溫度和貯存條件都影響滴定劑的濃度。因此，必須根據(jù)不同情況采用相應(yīng)的測(cè)定條件。第六節(jié) 含量測(cè)定本節(jié)選擇上述常用的五類(lèi)雜環(huán)藥物中的典型藥物，從其化學(xué)結(jié)構(gòu)、理化特性等方面，討論藥物結(jié)構(gòu)與含量測(cè)定的關(guān)系。 1. 常用的五種苯駢二氮雜卓類(lèi)藥物的TLC法 按常規(guī)法點(diǎn)樣10μl于硅膠G薄層板上，以苯丙酮(3 : 2)展開(kāi)劑，飽和15min，用上行法展開(kāi)15cm，揮散溶劑，用稀硫酸噴霧，于105℃干燥30min，置紫外燈下檢視熒光斑點(diǎn)，結(jié)果見(jiàn)表。氯氮卓 ChP（2000）[鑒別] （1）取本品約 10mg，加鹽酸溶液（1→2）15ml，緩緩煮沸 15 分鐘，放冷，溶液顯芳香第一胺類(lèi)的鑒別反應(yīng)（附錄Ⅲ）。從藥品質(zhì)量控制方法具有代表性出發(fā)，以下重點(diǎn)闡述地西泮、阿普唑侖和氯氮卓等藥物的分析?！》脏玎侯?lèi)藥物分子結(jié)構(gòu)中的未被氧化的二價(jià)Ｓ能與金屬鈀離子絡(luò)合形成有色絡(luò)合物，如與癸氟奮氖靜形成紅色的絡(luò)合物。的不同，產(chǎn)生不同的紅外吸收光譜，國(guó)內(nèi)外藥典已用于本類(lèi)藥物較多品種的鑒別。）不同，會(huì)引起吸收峰發(fā)生位移。我國(guó)是從茄科植物白曼陀羅的干燥品（洋金花）中提取東莨菪堿，然后制成氫溴酸鹽。以阿托品為例，其反應(yīng)式見(jiàn)教材。第三節(jié) 托烷類(lèi)藥物一、基本結(jié)構(gòu)與化學(xué)性質(zhì)1． 典型藥物的結(jié)構(gòu) 硫酸阿托品 氫溴酸東莨菪堿2．主要化學(xué)性質(zhì)（1）水解性 阿托品和東莨菪堿分子結(jié)構(gòu)中，具有酯的結(jié)構(gòu)，易水解。二、鑒別試驗(yàn)1．綠奎寧反應(yīng)（Thalleioquin）奎寧和奎尼丁為6位含氧喹啉衍生物，可以發(fā)生綠奎寧反應(yīng)。 參比溶液中丙酮含量在3%時(shí)，異煙肼(干擾組分)生成的縮合物在456nm波長(zhǎng)處的吸收度與供試溶液(不含丙酮)的吸收度相等，即△A456nm為零，對(duì)游離肼測(cè)定無(wú)干擾。吸取供試液10μl 與對(duì)照溶液2μl，分別點(diǎn)于同一硅膠薄層板（用羧甲基纖維素鈉溶液制備）上，以異丙醇－丙酮（3:2）為展開(kāi)劑，展開(kāi)后，晾干，噴以乙醇制對(duì)二甲氨基苯甲醛試液，15min后檢視，在供試品主斑點(diǎn)前方與硫酸肼斑點(diǎn)相應(yīng)的位置上，不得顯黃色斑點(diǎn)?！?四) 分解產(chǎn)物的反應(yīng) 尼可剎米+氫氧化鈉試液→加熱→二乙胺臭味，紅色石蕊試紙變藍(lán)； 丙硫異煙胺加鹽酸→加熱→硫化氫氣體，醋酸鉛試紙顯黑色。中國(guó)藥典已用于異煙腙的鑒別。這一反應(yīng)不能由吡啶環(huán)單獨(dú)發(fā)生，而是在溴化氰加到吡啶環(huán)，使環(huán)上氮原子由3價(jià)轉(zhuǎn)變成5價(jià)時(shí)，吡啶環(huán)水解，形成戊烯二醛后再與芳香第一胺縮合而成。本章討論化學(xué)合成的雜環(huán)類(lèi)藥物，選擇應(yīng)用比較廣泛的五類(lèi)雜環(huán)藥物中的幾個(gè)典型藥物予以重點(diǎn)介紹：即吡啶類(lèi)中的尼可剎米、異煙肼、異煙腙和丙硫異煙胺等；喹啉類(lèi)中的硫酸奎寧和硫酸奎尼丁等；托烷類(lèi)藥物中的硫酸阿托品和氫溴酸東莨菪堿等；吩噻嗪類(lèi)中的氯丙嗪、異丙嗪、奮乃靜和癸氟奮乃靜等；苯駢二氮雜卓類(lèi)中的地西泮、阿普唑侖和氯氮卓等。四、通過(guò)幾章具體藥物的學(xué)習(xí)及各類(lèi)藥物分析方法的熟悉，逐漸理解并學(xué)會(huì)藥物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定方法。 二、鑒別試驗(yàn) (一) 吡啶環(huán)的開(kāi)環(huán)反應(yīng) （Konig反應(yīng)）　當(dāng)溴化氰與芳香第一胺作用于吡啶環(huán)， 可形成戊烯二醛的有色喜夫氏堿類(lèi)（聚甲炔染料）。尼可剎米、異煙肼和異煙腙等，需經(jīng)適當(dāng)處理，即將酰肼氧化成羧基或?qū)Ⅴ０匪鉃轸然蟛庞写朔磻?yīng)。最常用的芳醛為香草醛，其次是對(duì)二甲氨基苯甲醛、水楊醛等與1,2－萘醌－4－磺酸在堿性介質(zhì)中可縮合顯紅色，凡具有－NH2或活性－CH2－基者均有此反應(yīng)。 （相當(dāng)于游離肼50μg）的溶液，作為對(duì)照溶液。進(jìn)而，可在456nm波長(zhǎng)處測(cè)定并計(jì)算二者的差示吸收度△A456nm，同時(shí)以對(duì)照品比較法計(jì)算游離肼含量。（3）熒光特性 硫酸奎寧和硫酸奎尼丁在稀硫酸溶液中均顯藍(lán)色熒光，而鹽酸環(huán)丙沙星則無(wú)熒光。2．鹽酸環(huán)丙沙星中特殊雜質(zhì)的檢查鹽酸環(huán)丙沙星在生產(chǎn)和貯藏過(guò)程中引入的特殊雜質(zhì)，通過(guò)酸度、溶液的澄清度與顏色、有關(guān)物質(zhì)等項(xiàng)目的檢查進(jìn)行控制。二、鑒別試驗(yàn)1．托烷生物堿一般鑒別試驗(yàn)本類(lèi)藥物為酯類(lèi)生物堿，水解后生成的莨菪酸，經(jīng)發(fā)煙硝酸加熱處理，轉(zhuǎn)變?yōu)槿趸苌?，再與氫氧化鉀醇溶液和固體氫氧化鉀作用，則轉(zhuǎn)成有色的醌型產(chǎn)物，開(kāi)始呈深紫色。三、氫溴酸東莨菪中特殊雜質(zhì)檢查氫溴酸東莨菪堿是從茄科植物顛茄、白曼陀羅、莨菪等中提取得到的莨菪堿的氫溴酸鹽。2位上的取代基（R39。 吩噻嗪類(lèi)藥物取代基R和R39。(二)　顯色反應(yīng) 　吩噻嗪類(lèi)藥物可被不同氧化劑如硫酸、硝酸、過(guò)氧化氫等氧化而呈色，反應(yīng)情況列于表。注意點(diǎn)：①異丙嗪遇光不穩(wěn)定，上述檢查應(yīng)在避光條件下操作。上述藥物除了氯氮卓外，均為地西泮的衍生物。 阿普唑侖2. 水解后重氮化偶合反應(yīng) 氯氮卓、艾司唑侖和奧沙西泮的鹽酸溶液(1→2)，緩緩加熱煮沸，放冷，加亞硝酸鈉和堿性β萘酚試液，生成橙紅沉淀，而后者放置色漸變暗。由于本類(lèi)藥物結(jié)構(gòu)相似，不易分離、鑒別，因此薄層色譜法常被用于本類(lèi)藥物的系統(tǒng)鑒別。而用高效液相色譜法，檢查本類(lèi)藥物質(zhì)量的報(bào)道，也在逐年增多。當(dāng)HA酸性較強(qiáng)時(shí)，反應(yīng)不能定量完成，根據(jù)化學(xué)反應(yīng)平衡的原理，必須采取措施，除去或降低滴定反應(yīng)產(chǎn)生的HA的酸性，使反應(yīng)順利地完成。HAc + HgX2 當(dāng)醋酸汞加入量不足時(shí),可影響滴定終點(diǎn),而使測(cè)定結(jié)果偏低,但過(guò)量的醋酸汞(1～3倍)并不影響測(cè)定結(jié)果。由于這些藥物的堿性強(qiáng)弱不同，因此測(cè)定時(shí)所采用的溶劑、指示劑及其指示終點(diǎn)的方法也不盡相同。采用非水溶液滴定法，以高氯酸滴定液直接滴定硫酸鹽類(lèi)藥物時(shí)，需注意本類(lèi)藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)，正確判斷反應(yīng)的摩爾比，才能準(zhǔn)確地計(jì)算出試驗(yàn)結(jié)果。當(dāng)用高氯酸直接滴定硫酸奎寧時(shí)，1mol的硫酸奎寧消耗3mol的高氯酸。3）硫酸奎寧片的測(cè)定：硫酸奎寧片劑堿化處理，生成奎寧游離堿，然后再用高氯酸標(biāo)準(zhǔn)溶液直接滴定。前者用鄰二氮菲指示劑指示終點(diǎn)；后者利用藥物自身的顏色變化指示終點(diǎn)?，F(xiàn)分別簡(jiǎn)單討論之。酸性染料的濃度，一般認(rèn)為對(duì)測(cè)定結(jié)果影響不大，只要有足夠量即可。4）水分的影響：在提取過(guò)程中，嚴(yán)防水分混入有機(jī)溶劑中，一則水相中有過(guò)量的有色酸性染料，而影響測(cè)定結(jié)果；二則水分的混入使氯仿混濁，而影響比色測(cè)定。可與鈀離子（Pd2+）形成紅色絡(luò)合物。（1）奧沙西泮的測(cè)定 取本品約15mg，精密稱(chēng)定，置200ml量瓶中，加乙醇150ml，于溫水浴中加熱，并時(shí)時(shí)振搖，使奧沙西泮溶解，放冷，用乙醇稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置100ml量瓶中，用乙醇稀釋至刻度，搖勻，在229nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度；另精密稱(chēng)取奧沙西泮對(duì)照品約15mg，同法操作并測(cè)定；計(jì)算，即得。2．萃取后分光光度法鹽酸氯丙嗪注射液的含量測(cè)定，除了上述采用選擇299nm波長(zhǎng)直接分光光度法消除處方中維生素C的干擾外，還可以利用萃取后分光光度法進(jìn)行測(cè)定。合并酸液，%濃度的溶液。合并乙醚液，用鹽酸液（）提取4次，每次25ml?，F(xiàn)以硫酸阿托品片和人血漿中硝苯地平的氣相色譜法為例，簡(jiǎn)述該法在雜環(huán)類(lèi)藥物分析中的應(yīng)用。(2) 測(cè)定方法1）內(nèi)標(biāo)溶液的制備：精密稱(chēng)取氫溴酸后馬托品約25mg，加水溶解并稀釋至50ml。H2O]的重量:[(C17H23NO3)2進(jìn)樣方式，不分流進(jìn)樣，進(jìn)樣時(shí)間1s，進(jìn)樣后80s，啟動(dòng)分流閥。本實(shí)驗(yàn)均在暗室紅燈下進(jìn)行。在本法中常采用化學(xué)鍵合相作為固定相，即在硅膠表面，利用硅醇基的活性與有機(jī)硅烷反應(yīng)，使硅烷基鍵合在硅膠表面，如鍵合為十八烷基時(shí)，則形成常用的十八烷基硅烷鍵合硅膠（ODS）?，F(xiàn)以具體示例簡(jiǎn)述該法的應(yīng)用。精密量取該溶液與內(nèi)標(biāo)溶液各5ml，置25ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻。取按處方量除硫酸阿托品外的賦形劑空白顆粒粉5份，分別精密稱(chēng)定，置50ml量瓶中，分別加入量瓶中，再用流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，過(guò)濾，棄去初濾液，取續(xù)濾液作為供試品溶液；，置50ml容量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照液。該法具有回收率高，專(zhuān)一性強(qiáng)、靈敏度高和重現(xiàn)性好等特點(diǎn)，并用此法對(duì)10名剖腹產(chǎn)產(chǎn)婦進(jìn)行了血藥濃度測(cè)定，為臨床安全用藥提供了科學(xué)依據(jù)。2．離子對(duì)高效液相色譜法離子對(duì)色譜法，是離子對(duì)提取與色譜技術(shù)相結(jié)合的產(chǎn)物，可用于分析呈離解狀態(tài)的藥物，如有機(jī)酸類(lèi)或有機(jī)堿類(lèi)。而引入離子對(duì)試劑庚烷磺酸鈉，以煙酰胺為內(nèi)標(biāo)物，建立反相離子對(duì)色譜法，取得較好的監(jiān)測(cè)效果。3）線性關(guān)系：、應(yīng)用上述方法進(jìn)行預(yù)處理和測(cè)定，計(jì)算異煙肼與內(nèi)標(biāo)物色譜峰之比，以此比值（Y）與異煙肼濃度（X）進(jìn)行線性回歸，其回歸方程為：Y= + ，r = 。1）色譜條件：色譜柱為HPRPODS柱（220mm）；柱溫為25℃；流動(dòng)相為乙腈[溴化四丁基銨（）+ 磷酸二氫鉀水溶液（）] = 14?86；；紫外檢測(cè)器波長(zhǎng)為277nm；；。4）試驗(yàn)方法：十名受試者實(shí)驗(yàn)前15天未服任何藥物，受試前12h內(nèi)禁食，當(dāng)日早晨空腹，隨機(jī)分成2組：5人分別口服供試品片劑各500mg，另5人分別口服對(duì)照品各500mg。；177。；177。38 /