【正文】 ?* 羧基 CH3COOH 乙醇 204 41 n → ?* 酰胺 CH3CONH2 水 214 60 n → ?* 偶氮基 CH3N=NCH3 乙醇 339 5 n → ?* 硝基 CH3NO2 異辛烷 280 22 n → ?* 亞硝基 C4H9NO 乙醚 300 100 n → ?* 硝酸酯 C2H5ONO2 二氧六環(huán) 270 12 n → ?* 助色團 化合物 溶劑 ?max/?m ? max/() CH4,C2H6 氣態(tài) 150,165 ___ OH CH3OH 正己烷 177 200 OH C2H5OH 正己烷 186 ___ OR C2H5OC2H5 氣態(tài) 190 1000 NH2 CH3NH2 173 213 NHR C2H5NHC2H5 正己烷 195 2800 SH CH3SH 乙醇 195 1400 SR CH3SCH3 乙醇 210,229 1020,140 Cl CH3Cl 正己烷 173 200 Br CH3CH2CH2Br 正己烷 208 300 I CH3I 正己烷 259 400 (5)紅移和藍移 ： 由于化合物 結(jié)構(gòu)變化 （ 共軛 、 引入助色團取代基 ） 或采用 不同溶劑 后吸收峰位置向 長波 方向的移動 ， 叫 紅移 （ 長移 ） 吸收峰位置向 短波 方向移動 ， 叫 藍移 （ 紫移 ， 短移 ） 。 ? 特點： 強度大，摩爾吸收系數(shù)大 ，通常在104~2 104L mol1cm1，吸收峰的位置一般在217~280nm； K帶的 波長和強度 與共軛體系的數(shù)目，位置和取代基的種類 有關(guān)。 E1帶的吸收峰大約在180nm（ ε ＞ 104）； E2帶約在 200nm（ ε7000 ），都屬強吸收。下表列出紫外、可見吸收光譜中常用的溶劑，以供選擇時參考。 (1) 玻璃 棱鏡：由于玻璃可吸收紫外光 ， 玻璃棱鏡只能用于 350 ~ 3200 nm的波長范圍 ， 能用于 可見光 域內(nèi) 。 2 檢測器類型：光電池、光電管和光電倍增管。 ? 適用于分析多組分混合物，混濁試樣（生物組織液） 第三節(jié) Lamber－ Beer定律 ? 透射比和吸光度 ? Lamber－ Beer定律 ? 吸光系數(shù) ? 偏離 Lamber－ Beer定律的因素 ? 透過光的強度 (Ⅰ t )和入射光強度 (Ⅰ o)之比稱為透光度（ T)： T=Ⅰ t / Ⅰ o ? 為表示物質(zhì)吸收光的程度引入 吸光度 (A)概念： 一 、透光度和吸光度 toIIL o gTL o gA ?? 1二 、 LamberBeer定律 ?描述物質(zhì)對單色光吸收強弱 (吸光度）與 液層厚度 和待測物濃度 的關(guān)系 CAB e e rlALa m b e r??定律：定律：A= Elc=E bc=εbc=abc 討論： 1． LamberBeer定律的適用條件（ 前提 ） （ 1）入射光為 單色光 （ 2）溶液是 稀溶液 （ 3）均相體系 2．在同一波長下，各組分吸光度具有 加和性 應(yīng)用：多組分測定。 ※ 注： 一般可用空白對比校正消除。取此溶液在 1cm的吸收池中，于 361nm處測定吸光度為 ，求 B12的百分含量？ mLgmLglE AC /???????mLgmLgC i /?? ??????mLgC / 52???????樣%%100%100%5512 ?????????樣CCB i2．標(biāo)準(zhǔn)曲線法 ?前提 ：固定 測定 條件和 儀器 條件 CACKA ????樣樣同上條件固定條件查得測定樣品曲線分別測定配制標(biāo)準(zhǔn)系列過程：CAACA???? ?????? ?? ~標(biāo)樣標(biāo)樣標(biāo)樣標(biāo)樣AACCAACC ????蘆丁含量測定 二 多組分定量方法 ????? cba AAAA 總定量依據(jù)：1．兩組分吸收光譜不重疊（ 互不干擾 ） 兩組分在各自 λmax 下不重疊 → 分別 按單組分定量 aaaaaaEACCEA1111 ????由bbbbbbEACCEA2222 ????由bbaaAEAE222111；測定；測定過程：????? 2．兩組分吸收光譜部分重疊 ? λ 1→ 測 A1→b 組分不干擾 → 可按 單組分定量測 Ca ? λ 2→ 測 A2→a 組分干擾 → 不能按單組分定量測 Cb babaaaAEEAE???2222111；和測定；測定過程：??aaaaaaEACCEA1111 ????由bbaababa CECEAAA ??????? 22222由baabab ECEAC222 ?????? 3．兩組分吸收光譜 完全重疊 —— 混合樣品測定 方法： 解線性方程組法 babababaAEEAEE????22221111；和測定；和測定??bbaababa CECEAAA ??????? 11111bbaababa CECEAAA ??????? 22222bababbabbaa EEEEEAEAC12211221???????? ??babaabaabab EEEEEAEAC12212112??????? ??紫外－可見光譜小結(jié) ?紫外－可見吸收光譜的產(chǎn)生 ?定量基礎(chǔ)： LamberBeer 定律 ?紫外－可見分光光度計 ?分析條件的選擇 ?測定方法（單組分，雙組分）